聯(lián)合檢測(cè)六項(xiàng)白帶生化標(biāo)志物在陰道炎中的臨床應(yīng)用

宋志廣

陰道炎是婦女多發(fā)病、常見(jiàn)病。隨著生活節(jié)奏的不斷加快, 其發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì), 而在婦科疾病的診斷過(guò)程中白帶常規(guī)檢測(cè)(簡(jiǎn)稱白帶常規(guī))發(fā)揮著關(guān)鍵作用。白帶常規(guī)主要包括滴蟲(chóng)、線索細(xì)胞、念珠菌和白細(xì)胞(清潔度)等。現(xiàn)大多數(shù)醫(yī)院對(duì)白帶常規(guī)的檢查采取革蘭染色鏡檢、濕片鏡檢, 兩者均需借助顯微鏡, 具有對(duì)檢測(cè)者經(jīng)驗(yàn)要求高、試驗(yàn)重復(fù)性差、個(gè)人主觀性較強(qiáng)、往往由于取樣失敗或者工作量大而導(dǎo)致漏檢等缺點(diǎn)。近年來(lái), 國(guó)內(nèi)外有不少研究報(bào)道［1-4］開(kāi)始利用白帶生化標(biāo)志物間接地檢驗(yàn)?zāi)撤N病原微生物, 對(duì)陰道炎癥、細(xì)菌性陰道病等疾病進(jìn)行診斷, 替代了人工顯微鏡鏡檢, 使操作標(biāo)準(zhǔn)化、快速化、批量化, 從而提高了工作效率。本次研究采用專用試劑盒對(duì)450例患者進(jìn)行六項(xiàng)白帶生化標(biāo)志物的檢測(cè), 總結(jié)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2013年12月～2014年4月來(lái)本院門診就診的500例患者為研究對(duì)象, 年齡18～70歲, 平均年齡(29.8±7.8)歲；就診前 3 d所有患者均無(wú)性生活、陰道用藥及沖洗。其中50例患者的白帶標(biāo)本因帶有血液、用藥后有明顯顏色被排除, 剩余450例標(biāo)本被定為最后的研究對(duì)象。所有標(biāo)本由婦科醫(yī)師用無(wú)菌專用棉拭子在子宮頸、陰道后穹隆及陰道壁上旋轉(zhuǎn)提取, 對(duì)帶有血液、用藥后有明顯顏色的標(biāo)本, 改用涂片革蘭染色鏡檢或生理鹽水涂片報(bào)告結(jié)果。

1.2 試劑、儀器與方法 河南安圖綠科生物工程公司生產(chǎn)提供聯(lián)合檢測(cè)試劑盒, 儀器采用安圖公司配套自動(dòng)化woMO聯(lián)檢分析儀。操作過(guò)程嚴(yán)格按說(shuō)明書進(jìn)行。

2 結(jié)果

450例標(biāo)本中95例N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶呈弱陽(yáng)或陽(yáng)性, 其中14例>4.8, 占14.7%, 經(jīng)革蘭染色或生理鹽水涂片鏡檢為陰道毛滴蟲(chóng)感染；81例pH≤4.6, 約占85.3%,為假絲酵母菌感染。135例脯氨酸氨基肽酶或(和)唾液酸苷酶呈陽(yáng)性, 315例全陰性。280例白細(xì)胞酯酶陰性, 170例陽(yáng)性。290例H2O2呈陰性或弱陽(yáng)性, 160例呈陽(yáng)性。240例pH值在4.0～4.5之間, 210例>4.5。

3 討論

目前, 大多數(shù)醫(yī)院對(duì)白帶常規(guī)的檢查采取革蘭染色鏡檢、濕片鏡檢。 但近些年來(lái), 國(guó)內(nèi)外有不少研究報(bào)道［1-4］開(kāi)始利用白帶生化標(biāo)志物間接地檢驗(yàn)?zāi)撤N病原微生物, 對(duì)陰道炎癥、細(xì)菌性陰道病等疾病進(jìn)行診斷, 并與革蘭染色鏡檢比較, 細(xì)菌性陰道病、乳桿菌、陰道毛滴蟲(chóng)、真菌兩種方法之間具有較好的符合性, 因此, 應(yīng)用生化標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)具有很好的應(yīng)用價(jià)值。

生化標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)的原理：在試劑板中, 微生物本身產(chǎn)生的生化標(biāo)志物與預(yù)先固定好的、特異性底物反應(yīng)呈色或通過(guò)加顯色液顯色, 從而通過(guò)試劑板各孔的呈色情況來(lái)判斷微生物的存在情況。

乳桿菌屬在健康婦女陰道中占正常陰道菌群內(nèi)常駐菌的95%以上［5］, 乳桿菌具有維持陰道內(nèi)環(huán)境pH值的作用, 使其維持在4.0～4.5, 主要通過(guò)分解陰道上皮細(xì)胞所含糖原發(fā)揮作用。乳桿菌還可合成H2O2, 從而調(diào)節(jié)陰道微生態(tài)平衡, 維持陰道正常微環(huán)境, 使感染得到有效預(yù)防［6］。H2O2在過(guò)氧化物酶的作用下, 可與相應(yīng)底物發(fā)生呈色反應(yīng)。本研究顯示,H2O2呈陽(yáng)性反應(yīng)171例, 占38.0%, 提示乳桿菌極少或不存在。呈弱陽(yáng)性或陰性的為279例, 占62.0%, 提示乳桿菌中等量至大量存在。

在念珠菌感染時(shí), 乳桿菌可呈弱陽(yáng)或陽(yáng)性, 可以同時(shí)存在。當(dāng)感染念珠菌時(shí), pH可正?；蚵?4.5。感染厭氧菌、滴蟲(chóng)時(shí)pH可達(dá)5.5左右。更年期女性由于雌激素水平低落或缺乏, 使細(xì)胞內(nèi)糖原含量減少, 阻礙乳酸桿菌的生長(zhǎng), 使PH 值上升, 容易導(dǎo)致病原菌感染。在乳酸菌呈弱陽(yáng)性或陽(yáng)性時(shí), 患者應(yīng)用了各種洗液等造成pH值升高。

細(xì)菌性陰道病(BV)好發(fā)于育齡婦女, 約占15%～50%［4,5］,本研究顯示, 共135例患者BV呈弱陽(yáng)或陽(yáng)性。BV在細(xì)菌學(xué)上主要表現(xiàn)為陰道正常菌群減少, 被擬桿菌屬、陰道加德納菌、動(dòng)彎桿菌、消化球菌、普雷沃菌等取代, 在陰道菌群中,擬桿菌和普雷沃菌是唾液酸苷酶活性增加的主要病原菌。在陰道環(huán)境中, 與脯氨酸氨基肽酶相關(guān)細(xì)菌包括動(dòng)彎桿菌和加德納菌, 是BV分泌的特異性標(biāo)志物［6］。作者認(rèn)為, 綜合檢測(cè)脯氨酸氨肽酶和唾液酸苷酶, 可克服兩種方法在靈敏度上的缺陷, 成為檢測(cè)BV的理想方法［7］。

念珠菌陰道炎最常見(jiàn)的病原體是熱帶念珠菌和白色念珠菌, 這兩種念珠菌及陰道毛滴蟲(chóng)均具有氨基葡萄糖苷酶的活性［8］。在堿性條件下, N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶可通過(guò)水解特異性的底物與乙酰氨基葡萄糖苷酶發(fā)生呈色反應(yīng)。同時(shí)根據(jù)感染陰道毛滴蟲(chóng)時(shí), pH值會(huì)顯著增高, 通常在5.0左右, 感染念珠菌時(shí), pH值基本上在正常范圍內(nèi), 或略>4.5, 結(jié)合N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶和pH值來(lái)判斷感染類型。

綜上所述, 作者認(rèn)為聯(lián)合應(yīng)用白帶的六項(xiàng)生化標(biāo)志物檢測(cè), 結(jié)果客觀、簡(jiǎn)單易行, 對(duì)于輔助診斷女性陰道微生態(tài)環(huán)境具有重要的應(yīng)用價(jià)值, 可廣泛應(yīng)用于臨床。

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