嬰幼兒毛細(xì)支氣管炎病毒病原學(xué)研究

李雪萍

(河北省保定市第二中心醫(yī)院, 河北 保定, 072750)

毛細(xì)支氣管炎屬于嬰幼兒時(shí)期發(fā)病率較高的呼吸系統(tǒng)感染性疾病之一。本病好發(fā)于2歲以內(nèi)的小兒，特別是半歲以內(nèi)的嬰兒[1]。主要臨床表現(xiàn)為喘咳、氣急、氣促、呼吸困難等癥狀。如果疾病持續(xù)發(fā)展，容易導(dǎo)致呼吸衰竭。嚴(yán)重者危及患兒的生命。研究[2]顯示醫(yī)院中本病患兒的死亡率約1%。有部分患兒疾病演變?yōu)楦呶Ｏ瓋?。因此，需要及早診斷毛細(xì)支氣管炎，防治病癥的進(jìn)一步惡化。大多學(xué)者[3]認(rèn)為，毛細(xì)支氣管炎是呼吸系統(tǒng)病毒感染導(dǎo)致的。當(dāng)然也與遺傳、環(huán)境和營養(yǎng)等有一定關(guān)系。病因?qū)W研究[4]顯示，常見的呼吸道病毒有呼吸道合胞病毒(RSV)、鼻病毒(RHV)、副流感病毒(PIV Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)、流感病毒(IVA、B)、腺病毒(ADV)等。本研究擬通過對(duì)毛細(xì)支氣管炎患兒進(jìn)行呼吸道合胞病毒(RSV)、副流感病毒(PIV Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)、流感病毒(IVA、B)、腺病毒(ADV) 7項(xiàng)呼吸道病毒DNA/RNA檢測，深入分析毛細(xì)支氣管炎疾病發(fā)生與病毒感染之間的關(guān)系。本研究結(jié)合患兒的家族史、檢查指標(biāo)以及病情等多方面考量和分析，為嬰幼兒喘息提供早期的預(yù)測依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本研究納入2011年10月—2014年2月在本院就診的毛細(xì)支氣管炎患兒160例。所有患兒均符合第七版《實(shí)用兒科學(xué)》的診斷標(biāo)準(zhǔn)[1]。其中年齡在3～6個(gè)月的有62例。半歲到1歲的患兒有66例。1～2歲的患兒有32例。

1.2 基線資料

全面收集患兒的各項(xiàng)臨床資料和數(shù)據(jù)。主要有年齡、性別、癥狀和體征等。采集患兒的生命體征：體溫、心率、血壓。觀察患兒的癥狀及體征，包括咳嗽、喘息、有無發(fā)紺、肺部口羅音。實(shí)驗(yàn)室檢查項(xiàng)目主要有外周循環(huán)血液的白細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞等，以及C反應(yīng)蛋白，肝功能，心肌酶等。

1.3 采集標(biāo)本

所有患兒在收治入院的第1天或第2天就采集標(biāo)本。方法是采用無菌吸痰管吸取患兒的鼻咽分泌物。然后放置在2 mL生理鹽水中。接著送到專門的實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢測。檢測方法是采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR測量上述7大類病毒。

1.4 實(shí)驗(yàn)儀器和步驟

本研究采用核糖核酸(RNA)抽提試劑盒。一般采用磁珠柱提取法。PCR-熒光探針采用呼吸道病毒核酸檢測試劑盒。實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀(MJ-OPTICON)。取0.2 μL PCR管，每份加入19 IFVA核酸突光PCR檢測混合液、1 y 1 RT-PCR酶、然后將樣品核酸提取液、DEPC-H2O、陽性對(duì)照品511 1分別加入PCR管中，蓋好管蓋混勻進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)。

1.5 結(jié)果判斷

基線調(diào)整取6～15個(gè)循環(huán)的焚光信號(hào)，閾值設(shè)定原則以閾值線剛好超過DEPC-HaO檢測突光曲線的最高點(diǎn)。Ct值為UNDET或40, 樣本低于檢測線，報(bào)告為陰性; Ct值<38,報(bào)告為陽性; Ct值38～40, 復(fù)檢一次，如仍為38～40, 則報(bào)告為陰性。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

本研究采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件分析數(shù)據(jù)。連續(xù)變量采用t檢驗(yàn)，分類變量采用卡方檢驗(yàn)。檢驗(yàn)水準(zhǔn)精確到a=0.05,P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 160例患兒鼻咽分泌物病毒檢出情況

本次研究納入160例患兒。共有92例至少檢查出有一種病毒感染?？偟臋z出率達(dá)到57.50%。各類型病毒的具體分布情況，RSV檢出例數(shù)最多，有66例，達(dá)到71.73%。其次為IVA、PIVⅢ，各為7例，占到7.61%。見表1。

表1 各類病毒所占比例分布

2.2 各年齡段檢出情況比較

本次研究發(fā)現(xiàn)，在年齡段為3～6月組患兒, RSV檢出40例，ADV檢出1例, IVA檢出4例，IVB檢出3例，PIVⅠ檢出1例，PIVⅡ檢出2例, PIVⅢ檢出4例，總陽性率達(dá)到88.70%。在年齡段為6月～1歲組患兒，RSV檢出18例，ADV檢出1例, IVA檢出3例，IVB檢出1例，PIVⅠ檢出1例，PIVⅡ檢出0例，PIVⅢ檢出2例，總陽性率達(dá)到39.39%。在年齡段為1～2歲組患兒，RSV檢出8例，ADV檢出1例, IVA檢出0例, IVB檢出0例, PIVⅠ檢出1例, PIVⅡ檢出0例, PIVⅢ檢出1例，總陽性率達(dá)到34.37%。不同年齡段的各種病毒陽性檢出情況比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。見表2。

表2 各年齡段各種病毒陽性檢出情況比較[n(%)]

2.3 混合感染病毒情況

本研究患兒病毒混合感染共11例，分別為RSV合并IVA感染5例、RSV合并PIVⅢ感染3例、RSV合并IVB感染1例，RSV+PIVⅠ感染1例，RSV合并ADV感染1例。

2.4 各病毒的臨床癥狀與體征分布

在檢出的病毒中，感染RSV患兒癥狀比例最高的是喘鳴音，其次為口周發(fā)紺、肺紋理粗亂，肺部實(shí)變很少。ADV患兒表現(xiàn)比例最高的是發(fā)熱、呼吸困難、口周發(fā)紺、喘鳴音等，其次為濕口羅音、斑、片影、實(shí)變。IVA患兒表現(xiàn)比例最高的是喘鳴音，其次為發(fā)熱，沒有肺部實(shí)變例數(shù)。IVB患兒表現(xiàn)比例最高的是喘鳴音，其次為發(fā)熱，沒有肺部實(shí)變例數(shù)。PIVⅠ患兒表現(xiàn)比例最高的是口周發(fā)紺、喘鳴音，其次為肺紋理粗亂，沒有發(fā)熱、呼吸困難的例數(shù)。PIVⅡ比例最高的是口周發(fā)紺、喘鳴音，其次為肺紋理粗亂，沒有發(fā)熱、呼吸困難的例數(shù)。PIVⅢ患兒表現(xiàn)比例最高的是喘鳴音，其次為呼吸苦難、發(fā)熱，沒有肺部實(shí)變例數(shù)?；旌细腥净純罕憩F(xiàn)比例最高的是喘鳴音，其次為肺紋理粗亂、發(fā)熱。見表3。

表3 各病毒主要臨床表現(xiàn)、體征及輔檢的陽性率比較 %

2.5 RSV與ADV感染臨床比較

單純RSV感染55例患兒，53例都沒有高熱表現(xiàn)，發(fā)熱時(shí)間為2～4 d。呼吸衰竭有10例，心力衰竭有1例，肝損害有19例，多表現(xiàn)為肺紋理增粗，整個(gè)病程5～11 d。而3例ADV感染患兒均有高熱表現(xiàn)，發(fā)熱時(shí)間為7～16 d。呼吸衰竭有2例，心力衰竭有1例，肝損害有3例，多表現(xiàn)為氣腫 或?qū)嵶?，整個(gè)病程12～26 d。

2.6 RSV感染患兒詳細(xì)分析

66例RSV感染患兒，單純感染55例，合并感染11例。其中在疾病早期或恢復(fù)期的嗜酸性粒細(xì)胞都升高患兒有12例，而且有7例患兒的總IgE升高2倍及以上。這些患兒都有家族過敏史，臨床表現(xiàn)較為嚴(yán)重，出現(xiàn)呼吸困難10例。呼吸衰竭的5例。胸片見局限性肺氣腫或/和肺不張，間質(zhì)炎癥改變，療程長，住院平均日13 d, 隨訪后期易反復(fù)喘息發(fā)作。而在疾病早期嗜酸性粒細(xì)胞不高，恢復(fù)期升高患兒有3例。他們總IgE均升高2倍或以上，均有家族過敏史，臨床表現(xiàn)重，呼吸困難甚至呼吸衰竭，胸片表現(xiàn)局限性肺氣腫或/和斑片狀致密影，療程亦較長，住院平均日13～15 d, 隨訪后期半數(shù)以上有易反復(fù)喘息發(fā)作。另外一組嗜酸性粒細(xì)胞處于低水平的40例患兒，總IgE及家族過敏史均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，臨床表現(xiàn)呼吸困難20例，僅3例發(fā)生呼吸衰竭。11例混合感染患兒，9例恢復(fù)期嗜酸性粒細(xì)胞均升高，總IgE均升高，均有家族過敏史，其中5例表現(xiàn)呼吸困難，3例出現(xiàn)呼吸衰竭，此5例出院后3月內(nèi)均有反復(fù)喘息史。胸片均見實(shí)變樣改變。各類病毒感染的癥狀比較顯示，不同病毒的感染癥狀有區(qū)別。RSV患兒主要表現(xiàn)為喘鳴音，口周發(fā)紺、肺紋理粗亂等。ADV患兒主要表現(xiàn)為發(fā)熱、呼吸困難、口周發(fā)紺、喘鳴音等。IVA、IVB患兒主要表現(xiàn)為喘鳴音，發(fā)熱，沒有肺部實(shí)變。PIVⅠ、PIVⅡ主要表現(xiàn)為口周發(fā)紺、喘鳴音，肺紋理粗亂，沒有發(fā)熱、呼吸困難。PIVⅢ主要表現(xiàn)為喘鳴音，呼吸困難、發(fā)熱，沒有肺部實(shí)變?；旌细腥净純褐饕憩F(xiàn)為喘鳴音，肺紋理粗亂、發(fā)熱。

3 討 論

縱觀當(dāng)前的臨床研究，大多學(xué)者[5-6]認(rèn)為嬰幼兒的毛細(xì)支氣管炎主體上是由于呼吸道合胞病毒(RSV)感染導(dǎo)致的，當(dāng)然也有其他病毒的感染。比如也有腺病毒(ADV)、流感病毒A、B型(IVA、B)、副流感病毒Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型(PIV Ⅰ、PIVIK PIVⅢ)等。研究收治的160例患兒，共有92例至少檢查出有一種病毒感染?？偟臋z出率達(dá)到57.50%。各類型病毒的具體分布情況，RSV檢出例數(shù)最多，有66例，達(dá)到71.73%。其次為IVA、PIVⅢ，各為7例，占到7.61%。在年齡段為3～6周組患兒，總陽性率達(dá)到88.70%。在年齡段為6周～1歲組患兒，總陽性率達(dá)到39.39%。在年齡段為1～2歲組患兒，總陽性率達(dá)到34.37%。不同年齡段的各種病毒陽性檢出情況比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。而且在中3～6月組陽性率顯著高于6月～1歲組與1～2歲組(P均<0.05)。可見，隨著年齡的增加，病毒感染的陽性檢出率不斷降低。92例陽性病例中，RSV檢出66例(占71.73%), 這說明RSV是毛細(xì)支氣管炎的主體病原體。而且不同年齡段的患兒感染RSV也顯著高于其它病毒種類。這個(gè)結(jié)果與以往的研究報(bào)告類似[7-8]。另外，RSV陽性率以3～6月組患兒最高，其次為6月～1歲組患兒，最低是1～2歲組患兒。三組患兒RSV檢測陽性率存在顯著差異(P=0.000), 各組相互間比較均存在顯著差異(P<0.01或<0.05)。其他病毒感染陽性率比較沒有差異。這些說明嬰幼兒患有毛細(xì)支氣管炎發(fā)生年齡為2歲以內(nèi)，峰值為3～6個(gè)月。詳細(xì)分析RSV感染毛細(xì)支氣管炎患兒，發(fā)現(xiàn)嗜酸性粒細(xì)胞增多的患兒容易出現(xiàn)哮喘。這提示RSV感染出現(xiàn)嬰幼兒的反復(fù)喘息發(fā)生可能和自身的敏感體質(zhì)有一定聯(lián)系。因此，臨床治療中針對(duì)過敏體質(zhì)的患兒要提前預(yù)防哮喘的發(fā)生。有研究[9]顯示近年來，變應(yīng)性炎癥在嬰幼兒毛細(xì)支氣管炎的發(fā)病中扮演一定的作用。實(shí)驗(yàn)研究[10]揭示患兒的氣道分泌物和外周血中可以檢測出許多與哮喘病人獨(dú)有的一些炎性介質(zhì)。這些炎性物質(zhì)能促進(jìn)氣管平滑肌收縮，腺體分泌，很有可能是促發(fā)哮喘的原因。

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