不同子宮內(nèi)膜組織中ER、PR蛋白的表達(dá)*

張 娟,任琛琛,楊 立,任瑞芳,白 楊,陳 琳,李瑪俊

鄭州大學(xué)第三附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科 鄭州 450052

不同子宮內(nèi)膜組織中ER、PR蛋白的表達(dá)*

張 娟,任琛琛#,楊 立,任瑞芳,白 楊,陳 琳,李瑪俊

鄭州大學(xué)第三附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科 鄭州 450052

#通訊作者，女，1968年11月生，博士，主任醫(yī)師，研究方向：婦科腫瘤， E-mail：renchenchen1106@163.com

子宮內(nèi)膜;雌激素受體；孕激素受體;中重度宮腔粘連

目的：觀察子宮內(nèi)膜功能層、基底層及淺肌層組織中雌激素受體(ER)、孕激素受體(PR)蛋白的表達(dá)情況。方法應(yīng)用免疫組化SP法檢測(cè)30例子宮內(nèi)膜功能層、基底層、淺肌層組織中ER、PR蛋白的表達(dá)。結(jié)果子宮內(nèi)膜功能層、基底層和淺肌層中ER和PR蛋白表達(dá)水平差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=17.582和19.182，P均<0.001)；功能層、基底層和淺肌層ER和PR蛋白表達(dá)水平依次降低。結(jié)論給予高于生理劑量的雌孕激素周期性療法刺激殘余的子宮內(nèi)膜生長(zhǎng)，可能預(yù)防中重度宮腔粘連分離術(shù)后宮腔粘連的再次發(fā)生。

子宮內(nèi)膜分為功能層、基底層和淺肌層，月經(jīng)期功能層壞死脫落，受卵巢雌孕激素的調(diào)節(jié)，基底層可再生形成功能層[1]。因感染、創(chuàng)傷等因素引起子宮內(nèi)膜功能層、基底層或淺肌層損傷，如損傷后不能及時(shí)修復(fù)，容易形成宮腔粘連[2]。宮腔粘連分離術(shù)(transcervieal resection of adhesions，TCRA)后宮腔再次粘連仍有可能發(fā)生，需要采取一定措施使子宮內(nèi)膜恢復(fù)正常狀態(tài)。輕度宮腔粘連分離術(shù)一般只傷及功能層，應(yīng)用生理劑量雌孕激素效果比較理想；但中重度宮腔粘連會(huì)傷及基底層甚至淺肌層，應(yīng)用雌孕激素治療的效果尚無(wú)定論。Romer 等[3]提出中重度宮腔粘連分離術(shù)后應(yīng)給予大劑量雌孕激素使內(nèi)膜上皮化進(jìn)而促進(jìn)其再生，加速子宮內(nèi)膜修復(fù)。但Chen等[4]認(rèn)為高雌激素狀態(tài)可使血清中轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子及成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子2表達(dá)升高，進(jìn)而使子宮內(nèi)膜發(fā)生纖維化改變，再次形成宮腔粘連 。作者應(yīng)用免疫組化方法觀察子宮內(nèi)膜功能層、基底層及淺肌層中雌激素受體(estrogen receptor,ER)和孕激素受體(progesterone receptor,PR)的分布情況，以期為中重度宮腔粘連分離術(shù)后雌孕激素的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1標(biāo)本選擇選取2000年1月至2012年12月因?qū)m頸不典型增生住院行子宮全切的患者30例，年齡27～45(38.5±0.5)歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：宮頸不典型增生，半年內(nèi)未服用任何激素類藥物，正常子宮(無(wú)子宮肌瘤、子宮腺肌癥、子宮內(nèi)膜息肉等)。所選標(biāo)本均為月經(jīng)中后期(月經(jīng)第15～21天)子宮內(nèi)膜。

1.2組織學(xué)觀察30例石蠟切片經(jīng)HE染色，于顯微鏡下觀察正常人子宮內(nèi)膜，根據(jù)各層的組織學(xué)[4-5]不同進(jìn)行分層。功能層：螺旋動(dòng)脈周圍蛻膜樣變，間質(zhì)水腫明顯，腺體擴(kuò)張、邊緣不規(guī)則、腔內(nèi)有分泌物；基底層：腺體呈管狀、腺上皮為柱狀，間質(zhì)致密，似增殖期內(nèi)膜，含多量厚壁血管(基底動(dòng)脈)；淺肌層：含有腺體，缺少子宮內(nèi)膜下組織，無(wú)厚壁血管，緊貼基底層。

1.3子宮內(nèi)膜組織ER、PR蛋白的表達(dá)采用免疫組化SP法檢測(cè)。鼠抗人ER、PR單克隆抗體來(lái)自于丹麥DAKO公司。具體步驟如下：石蠟切片常規(guī)經(jīng)二甲苯脫蠟，梯度酒精水化，自來(lái)水沖洗；每張切片加50 μL過氧化物酶阻斷溶液，室溫下孵育10 min，PBS沖洗3次；每張切片加50 μL一抗(稀釋100倍)孵育150 min，PBS沖洗3次；每張切片加50 μL生物素標(biāo)記的二抗，孵育60 min，PBS沖洗；加100 μL新鮮配制的DAB顯色液3～5 min，蒸餾水沖洗終止反應(yīng)；蘇木素復(fù)染。染色結(jié)果判定： ER、PR主要定位于細(xì)胞核，以棕紅色為陽(yáng)性染色。每張切片選取10個(gè)高倍視野觀察，參照文獻(xiàn)[5]的方法計(jì)算陽(yáng)性細(xì)胞的百分率,陽(yáng)性細(xì)胞<10%為(-)，～29%為(+)，～49%為()，≥50%為()。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理應(yīng)用SPSS 17.0進(jìn)行分析，子宮內(nèi)膜各層組織中ER和PR蛋白陽(yáng)性表達(dá)的比較采用k個(gè)相關(guān)樣本的秩和檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

ER和PR在子宮內(nèi)膜功能層、基底層及淺肌層之間的表達(dá)見圖1、表1和2。

χ2=17.582,P<0.001

表2 子宮內(nèi)膜各層組織中PR蛋白的表達(dá)水平 例

χ2=19.182,P<0.001。

3 討論

子宮內(nèi)膜功能層受卵巢激素變化的調(diào)節(jié)，具有周期性增殖、分泌和脫落變化。月經(jīng)后基底層再生并修復(fù)子宮內(nèi)膜創(chuàng)面，重新形成子宮內(nèi)膜功能層并再次進(jìn)入下一個(gè)月經(jīng)周期，形成正常的子宮內(nèi)膜形態(tài)。輕度宮腔粘連一般只傷及功能層，術(shù)后應(yīng)用生理劑量的雌孕激素序貫治療，促使子宮內(nèi)膜再生并使術(shù)后創(chuàng)面重新上皮化[6]。中重度宮腔粘連傷及基底層甚至淺肌層時(shí)，是否也可經(jīng)驗(yàn)性給予生理劑量的雌孕激素序貫治療，預(yù)防宮腔粘連的再次發(fā)生？

ER、PR位于細(xì)胞核中，當(dāng)受體與激素結(jié)合形成復(fù)合物后，以活化的形式結(jié)合到染色體的特定部位，引起基因的活化，啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄合成新的DNA，繼而合成新的蛋白質(zhì)，通過這些具有生物學(xué)功能的蛋白質(zhì)調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長(zhǎng)和代謝。該研究結(jié)果表明子宮內(nèi)膜不同損傷部位的ER、PR表達(dá)并不一致，ER、PR在子宮內(nèi)膜功能層、基底層及淺肌層的陽(yáng)性表達(dá)水平依次降低，以上結(jié)果為中重度宮腔粘連分離術(shù)后雌孕激素的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

綜上所述，作者認(rèn)為中重度宮腔粘連分離術(shù)后應(yīng)給予高于生理劑量的雌孕激素序貫治療，可能預(yù)防宮腔再次粘連。但該實(shí)驗(yàn)樣本量較少，并且只是從理論上提示中重度宮腔粘連術(shù)后可以用高于生理量的雌孕激素，需要進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。

[1]豐有吉.婦產(chǎn)科學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2002.

[2]羅麗蘭.不孕與不育[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1998:241

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[5]陳樂真.子宮內(nèi)膜病理組織學(xué)診斷[M].北京:人民軍醫(yī)出版社,2001.

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(2013-08-12收稿 責(zé)任編輯李沛寰)

Expressions of ER and PR protein in different endometrial tissue

ZHANGJuan,RENChenchen,YANGLi,RenRuifang,BAIYang,CHENLin,LIMajun

DepartmentofObstetricsandGynecology,theThirdAfflliatedHospital，ZhengzhouUniversity，Zhengzhou450052

endometrium; estrogen receptor; progesterone receptor;moderately severe intrauterine adhesion

Aim: To observe distribution of the expressions of estrogen receptor (ER) and progesterone receptor (PR) in endometrium function layer, base layer, shallow muscular layer.Methods: Immunohistochemical SP method was applied to detect the expressions of ER and PR in 30 cases of endometrium function layer, base layer, and shallow muscular layer.Results: The expression levels of ER and PR protein in function layer, base layer and shallow muscular layer had statistical difference(χ2=17.582 and 19.182,P<0.001),and the expression levels of ER and PR proteins in function layer, base layer and shallow muscular layer decreased successively.Conclusion: Using estrogen and progesterone at higher dose to stimulate the growth of remnant endometrium may prevent the recurrence of intrauterine adhesion.

10.13705/j.issn.1671-6825.2014.03.017

*河南省人口計(jì)生委計(jì)劃生育科學(xué)技術(shù)項(xiàng)目 2013年

R711.6