天麻息風(fēng)膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究

孫 雪

(河北省衡水市食品藥品檢驗檢測中心，河北 衡水 053000)

制劑與質(zhì)量控制

天麻息風(fēng)膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究

孫 雪

(河北省衡水市食品藥品檢驗檢測中心，河北 衡水 053000)

天麻；當(dāng)歸；天麻甙；色譜法，高壓液相；質(zhì)量控制

天麻息風(fēng)膠囊是由河北省衡水市中醫(yī)院生產(chǎn)的制劑，由天麻、當(dāng)歸等數(shù)味中藥制成，該制劑具有平肝、熄風(fēng)、止痙的功效，適用于肝腎陰虛、肝風(fēng)內(nèi)動引起的頭痛頭暈、耳鳴、兩目干澀、視物不清、四肢麻木、乏力等證，以及原發(fā)性高血壓、大腦供血不足等見上述證候者的治療，為了控制天麻息風(fēng)膠囊的質(zhì)量，筆者應(yīng)用薄層色譜法和高效液相色譜(HPLC)法對其檢驗，建立該制劑的內(nèi)控質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

1 材料與試藥

1.1 儀器 Angilent1100高效液相色譜儀(美國Angilent公司)；瑞士梅特勒電子天平XP205DR(瑞士梅特勒-托利多儀器(中國)有限公司)；瑞士梅特勒-托利多精密臺式酸度計FE20K(瑞士梅特勒-托利多儀器(中國)有限公司)；ZF-2型三用紫外分析儀(上海市安亭電子儀器廠)；SB3200超聲儀(上海必能信超聲有限公司)；紫外可見分光光度計(日本島津公司)。

1.2 藥品及試藥 天麻息風(fēng)膠囊(河北省衡水市中醫(yī)院制劑室，冀藥制字Z20090607，規(guī)格：每粒0.3g)。丹參對照藥材(中國藥品生物制品檢定所，批號：120913-201207)，當(dāng)歸對照藥材(中國藥品生物制品檢定所，批號：120927-201106)，天麻對照藥材(中國藥品生物制品檢定所，批號：120944-200911)，天麻素對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號：110807-200901)。甲醇為色譜純，水為純化水，其他試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 當(dāng)歸薄層鑒別 取天麻息風(fēng)膠囊內(nèi)容物6g，加無水乙醚40mL，放入SB3200超聲儀中超聲震蕩溶解10min，過濾，取濾液20mL蒸干，再將殘渣用2mL的乙醇溶解，作為供試品溶液。取當(dāng)歸對照藥材1 g，加無水乙醚40mL，按照當(dāng)歸供試品溶液的制法制成對照藥材溶液。再取當(dāng)歸空白對照品粉末0.5g(按處方及工藝，除去當(dāng)歸，制備，得到當(dāng)歸空白對照品)，按照當(dāng)歸供試品溶液的制法制成空白對照品溶液。參照《中華人民共和國藥典》2010年版一部薄層色譜法[1]，吸取上述3種溶液各5μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，用正己烷-乙酸乙酯(9∶1)作為展開劑，將薄層板放入層析缸20min展開，取出，置室溫下將薄層板晾干。在紫外可見分光光度計(365nm)下檢視。供試品溶液與對照藥材溶液在色譜中相應(yīng)的位置上，熒光顏色一樣，空白對照試驗無干擾。結(jié)果見插2，圖1。

2.2 天麻薄層鑒別 取天麻息風(fēng)膠囊內(nèi)容物3g，加70%甲醇15mL，放入SB3200超聲儀中超聲震蕩溶解30min，過濾，把濾液當(dāng)作供試品溶液[2]。再取天麻空白對照品粉末0.5g(按處方及工藝，除去天麻，制備，得到天麻空白對照品)，按照天麻供試品溶液的制法制成空白對照品溶液。取天麻對照藥材0.5g，加70%甲醇15mL，按照天麻供試品溶液的制備方法制成對照藥材溶液。參照《中華人民共和國藥典》2010年版一部薄層色譜法[1]，吸取上述2種溶液各5μL，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，用乙酸乙酯-甲醇-水(9∶1∶0.2)作為展開劑放入層析缸中，把薄層板放入層析缸中30min展開，然后將薄層板噴以10%磷鉬酸乙醇溶液，放入高溫干燥箱中在105℃條件下加到斑點(diǎn)清晰，供試品溶液與對照藥材溶液在色譜中相應(yīng)的位置上，所顯斑點(diǎn)的顏色相同。結(jié)果見插2，圖2。

2.3 含量測定

2.3.1 色譜條件 流動相：乙腈-0.1%磷酸溶液(3∶97)；檢測波長：220nm；柱溫：35℃。進(jìn)樣量：10μL；流速：1.0mL/min。理論板數(shù)不低于4000[3]。樣品的分離度良好，對照品和樣品峰一致，陰性對照沒有特征峰出現(xiàn)，說明此色譜條件可行。

2.3.2 對照品溶液制備 精密稱定五氧化二磷(P2O5)干燥24h的天麻素對照品0.02519 g，加甲醇25mL制成每1 mL含1 mg的溶液作為對照品溶液。

2.3.3 供試品溶液制備 取裝量差異項下的天麻息風(fēng)膠囊內(nèi)容物約0.9 g，放入具塞錐形瓶中，精密加入80%甲醇溶液25mL，稱定質(zhì)量。放入SB3200超聲儀中超聲2h，按減失質(zhì)量法用80%的甲醇溶液補(bǔ)足，過濾，濾液作為供試品溶液。

2.3.4 陰性對照溶液制備 按處方比例制成陰性對照品，按2.3.3項下制備方法制成陰性對照溶液。

2.3.5 線性關(guān)系考查 取濃度為1 mg/mL的天麻素對照品溶液，分別吸取1、2、5、10、20mL，置10mL的容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度。分別精密吸取10μL，注入Angilent高效液相色譜儀，測定峰面積。峰面積為縱坐標(biāo)，溶液濃度為橫坐標(biāo)，得回歸方程：Y=794640X+393.2(r=0.999 7，n=5)。結(jié)果表明，天麻素對照品溶液在0.01～0.1 mg/mL范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系。

2.3.6 精密度試驗 精密吸取同一對照品溶液，連續(xù)進(jìn)樣5次，按峰面積計算相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為0.75%。結(jié)果表明精密度試驗良好。

2.3.7 重復(fù)性試驗 取供試品溶液(批號：121036)，按2.3.3項下制備方法配制5份供試液，按2.3.1項下測定，RSD為 0.45%(n=5)。結(jié)果表明重復(fù)性試驗良好。

2.3.8 加樣回收率試驗 取已知含量同一批天麻息風(fēng)膠囊(批號：121102)6份，每份稱質(zhì)量約為0.3g(平均粒質(zhì)量0.309 8 g)，分別精密加入天麻素對照品溶液(0.055mg/mL)1.0mL，按2.3.3項下制備方法制備待測溶液，平均回收率為98.7%，RSD為1.1%。測定結(jié)果見表1。

表1 加樣回收率試驗

3 討 論

應(yīng)用薄層色譜法對處方中的當(dāng)歸、天麻進(jìn)行定性鑒別，經(jīng)過多次實(shí)驗，找出最佳的色譜條件，使斑點(diǎn)清晰可見，附近無雜質(zhì)斑點(diǎn)干擾。簡便迅速，重復(fù)性好，專屬性強(qiáng)，能有效控制產(chǎn)品質(zhì)量。因為天麻是處方中的主藥成分，該實(shí)驗采用HPLC法對天麻中的天麻素含量進(jìn)行測定，將對照品溶液用紫外可見分光光度計進(jìn)行掃描，在220nm波長處對紫外吸收靈敏，因此該實(shí)驗選定220nm作為測定波長。在進(jìn)行含量測定時選用3種流動相進(jìn)行比較：甲醇-磷酸鹽溶液(0.1 mol/L磷酸二氫鉀溶液和0.1 mol/L磷酸氫二鈉溶液等量混合)-水(2∶2∶96)、乙腈-0.05%磷酸溶液(4∶96)、乙腈-0.1%磷酸溶液(3∶97)，實(shí)驗證明應(yīng)用乙腈-0.1%磷酸溶液(3∶97)作為流動相保留時間合適，分離度能達(dá)到1.5以上，得到最佳的分離效果。

[1] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典2010年版：一部[S].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：70，313，97.

[2] 謝培山，錢忠直.中華人民共和國藥典中藥材薄層色譜彩色圖集：第1冊[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2009：144.

[3] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典2005年版：一部[S].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005：372.

(本文編輯：習(xí) 沙)

孫雪(1973—)，女，副主任藥師，學(xué)士。研究方向：藥物分析和藥品檢驗。

R284.1；R287

A

1002-2619(2014)09-1380-02

2013-10-21)