清苔靈對(duì)水草和中華絨螯蟹的影響

解蘭琴

通過(guò)用不同濃度的清苔靈對(duì)中華絨螯蟹浸浴3 d，結(jié)果證明清苔靈濃度分別為0、0.15、0.2、0.3、0.45 mg/L對(duì)中華絨螯蟹無(wú)不良影響；通過(guò)用0.15 mg/L清苔靈對(duì)水草和河蟹養(yǎng)殖試驗(yàn)，證明清苔靈對(duì)水草和河蟹有顯著的影響，2周后河蟹出現(xiàn)死亡，隨時(shí)間的延長(zhǎng)死亡逐步上升。

1 不同濃度清苔靈對(duì)河蟹的影響

1.1 試驗(yàn)方法

1.1.1 材料和方法 市售中華絨螯蟹幼蟹，20 g左右，健壯，活力好；清苔靈（撲草凈有效含量26%）；餌料為市售河蟹專用飼料；養(yǎng)殖試驗(yàn)玻璃水族箱（規(guī)格：30 cm×60 cm×40 cm），水族箱用1%高錳酸鉀消毒10 min后用曝氣的自來(lái)水沖洗干凈；1/10 000電子天平。

1.1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 試驗(yàn)設(shè)計(jì)5個(gè)清苔靈的藥浴濃度水平，分別為0 mg/L（對(duì)照組）、0.15 mg/L（說(shuō)明書建議使用濃度）、0.2 mg/L、0.3 mg/L、0.45 mg/L（3倍，說(shuō)明書建議使用濃度）。河蟹樣本量為2，重復(fù)數(shù)3。所有處理按照隨機(jī)化區(qū)組設(shè)計(jì)。

1.1.3 試驗(yàn)方法 每缸放曝氣自來(lái)水0.01 m3，水溫18 ℃±0.5 ℃，光照周期14 L：10 D，光照強(qiáng)度800 lx。每缸隨機(jī)放入健壯螃蟹2只。馴化養(yǎng)殖24 h后再進(jìn)行藥浸試驗(yàn)。馴化和試驗(yàn)養(yǎng)殖過(guò)程中每天10：00和15：00各投餌一次。以藥品包裝上建議的0.15 mg/L噴灑用量為參考，分別稱取0.0、0.001 5、0.002、0.003、0.004 5 g的清苔靈各三份，分別用10 mL的水溶解均勻后，按照隨機(jī)編號(hào)分別噴灑到缸內(nèi)。正式試驗(yàn)開始后每天7：00、19：00觀察螃蟹活動(dòng)、存活狀況。試驗(yàn)期3 d（72 h）。

1.2 試驗(yàn)結(jié)果

第一天，所有處理和對(duì)照組一樣，沒(méi)有死亡，攝食、活動(dòng)狀況正常。河蟹幼蟹活力在各組間沒(méi)有明顯差異。

第二天，所有處理和對(duì)照組一樣，沒(méi)有死亡，攝食、活動(dòng)狀況正常。河蟹幼蟹活力在各組間沒(méi)有明顯差異。

第三天，所有處理和對(duì)照組一樣，沒(méi)有死亡，攝食、活動(dòng)狀況正常。河蟹幼蟹活力在各組間沒(méi)有明顯差異。

1.3 試驗(yàn)結(jié)論

清苔靈在上述不同使用濃度范圍內(nèi)，對(duì)河蟹沒(méi)有直接致死作用；甚至超過(guò)推薦濃度三倍的濃度也未見(jiàn)死亡。可見(jiàn)，在推薦使用濃度誤差范圍內(nèi)，清苔靈對(duì)河蟹幼蟹沒(méi)有直接致死作用。

2 清苔靈對(duì)水草和河蟹養(yǎng)殖的影響

2.1 材料和方法

2.1.1 試驗(yàn)材料 中華絨螯蟹；清苔靈；養(yǎng)殖試驗(yàn)水族箱；鮮活水草：金魚藻、黑葉輪藻、紅葉草、水綿（青苔）等，各種水草分別成束栽植在沉水的小花托內(nèi)，用小石子壓置；“正大”螃蟹用顆粒配合餌料；1/10 000電子天平；電子秤；溫度計(jì)；水質(zhì)溶氧儀；日光燈照光源等。

2.1.2 試驗(yàn)方法 水溫、光照周期、光照強(qiáng)度等試驗(yàn)條件同1.1。

試驗(yàn)對(duì)照組（D組）：共4個(gè)水族箱，每水族箱放入兩只螃蟹，對(duì)照組的前2個(gè)水族箱（D1、D1′）水量控制在0.02 m3，后2個(gè)水族箱（D2、D2′）水量增加到0.08 m3，水位較前者增加3倍，每個(gè)水族箱均放入高15～20 cm左右的上述水草、青苔（水綿）各一束。

噴灑清苔靈藥物組（Y組）：藥物濃度為0.15 mg/L，分為3組，每組3個(gè)水族箱。第一組（Y1、Y1′、Y1"）水量控制在0.02 m3；第二組（Y2、Y2′、Y2"） 水量控制在0.08 m3；第三組（Y3、Y3′、Y3"）水量也控制在0.08 m3，但水中添加磚瓦附著物和漂浮物供螃蟹浮出水面或臨時(shí)逃逸和躲避。每個(gè)水族箱水草和青苔量投放同對(duì)照組。

每個(gè)試驗(yàn)水族箱放2只螃蟹。所有處理按照隨機(jī)化區(qū)組設(shè)計(jì)。

4月23日開始馴化養(yǎng)殖，1 d后進(jìn)行藥物試驗(yàn)，馴化和養(yǎng)殖試驗(yàn)中每天10：00和15：00各投餌一次，投餌量為每水族箱20粒，觀測(cè)溶氧、pH等水質(zhì)因子，對(duì)水草、河蟹的反應(yīng)和存活狀況進(jìn)行記錄。

日常管理和記錄：每天定時(shí)、定量投餌。4月25日、4月30、5月4日、5月8日測(cè)量水體溶氧和pH的變化，記錄水綿、水草的生長(zhǎng)狀況情況和河蟹的反應(yīng)情況，試驗(yàn)結(jié)束后解剖觀察河蟹內(nèi)臟特點(diǎn)。

2.2 試驗(yàn)結(jié)果

2.2.1 水草、青苔的變化狀況 試驗(yàn)開始2 d內(nèi)，各試驗(yàn)缸內(nèi)的不同水草外觀癥狀相似，用藥的和沒(méi)有用藥的對(duì)照組的水草都沒(méi)有明顯變化。感覺(jué)好像藥物對(duì)水草的影響不太明顯。

3～4 d后，用藥缸的紅葉草和黑葉輪藻的葉邊緣稍有褪色，其它水草和水綿變化不大。

6～7 d左右，用藥缸的紅葉草的葉片基本褪色開始軟化腐敗，并逐漸集聚成絮狀沉入水底。黑葉輪藻開始部分葉片出現(xiàn)軟化和腐爛。（青苔）水綿開始由綠色變黃，有的變成黑綠色，逐漸開始死亡。金魚藻的顏色也開始變淡。

8～9 d左右，很多黑葉輪藻的葉片開始發(fā)暗變軟腐爛，部分葉片從莖上落下。此時(shí)，用藥缸的缸底都可以發(fā)現(xiàn)有許多腐敗的水草葉片以絮狀沉在水底。同時(shí)，伴隨著腐敗物發(fā)臭氣味出現(xiàn)（見(jiàn)表3）。

對(duì)照組的缸內(nèi)水草在前6 d表現(xiàn)正常。但到第7～8 d，淺水（0.02 m3）對(duì)照的兩個(gè)缸內(nèi)也有部分紅葉草、黑藻的葉片發(fā)暗并出現(xiàn)壞死，水中和用藥缸一樣，有點(diǎn)難聞氣味出現(xiàn)。對(duì)照組出現(xiàn)這種情況，可能與水量較少有關(guān)。因?yàn)樗w較淺，水生植物不能全部沉浮在水中，相互黏粘、疊摞在一起，影響了他們的光合作用和新陳代謝，從而導(dǎo)致部分葉片壞死、腐敗。

2.2.2 用藥后水草死亡及對(duì)養(yǎng)殖環(huán)境的影響 試驗(yàn)證明，噴灑清苔靈后，對(duì)不同水草的殺滅作用是有選擇性的。紅葉草最敏感，葉片死亡和腐爛相對(duì)時(shí)間較短，5 d左右就可出現(xiàn)明顯癥狀。其次是黑葉輪藻。在7 d以后，青苔（水綿）和金魚藻才表現(xiàn)出壞死。水草死亡后開始腐爛，并在水底聚集成絮狀，腐爛發(fā)酵后產(chǎn)生毒害物質(zhì)，同時(shí)消耗水中溶氧量。由表1可以看出，在沒(méi)有換水的情況下，藥物處理組的水溶氧量隨著時(shí)間的延長(zhǎng)顯著降低，明顯低于對(duì)照組的。同時(shí)，水的pH值也隨著時(shí)間的延長(zhǎng)而逐漸降低（見(jiàn)表2 ）。溶氧降低和水體的酸化，與水草死亡后腐敗有直接的關(guān)系。腐敗水草產(chǎn)生有毒有害物質(zhì)一方面消耗溶氧，從而損害河蟹的正常生理機(jī)能，另一方面直接對(duì)河蟹的鰓等器官產(chǎn)生毒害作用。在沒(méi)有附著物使河蟹不能爬出水面的情況下，在有毒有害物質(zhì)存在的情況下，低于3 mg/L左右的溶氧，河蟹會(huì)出現(xiàn)呼吸障礙，嚴(yán)重的會(huì)死亡。解剖看到的死蟹的鰓呈灰白色，說(shuō)明是因?yàn)槿毖踉斐裳捍罅考杏邛w部，以進(jìn)行補(bǔ)償氣體交換；由于血液的沉積，河蟹血液中的Cu2+也隨著其死亡而沉積在那里。所以河蟹因缺氧死后鰓一般呈灰色。如果水中有附著物，或者能爬出水面上岸呼吸，河蟹是可以生存的；Y3處理組有部分存活，可能跟放入磚瓦供河蟹暫時(shí)逃離惡劣水質(zhì)和缺氧環(huán)境有關(guān)。如果發(fā)現(xiàn)部分螃蟹開始死亡時(shí)候，及時(shí)換水和充氧，及時(shí)改善水質(zhì)后是可以挽救部分螃蟹的。

2.2.3 河蟹死亡情況

對(duì)照組：在養(yǎng)殖過(guò)程中，D1組死亡一只，其它各對(duì)照缸均正常成活。該只死亡原因可能跟對(duì)照一組的水體較少較淺，導(dǎo)致少部分水草葉片腐敗有關(guān)。因?yàn)樗w較淺時(shí)，水草不能正常沉浮，影響其光合代謝作用，使部分葉片枯萎、腐爛。導(dǎo)致水質(zhì)變差，腐敗產(chǎn)生的有害物質(zhì)增加，溶氧減少。

藥物組：Y1組用藥第6 d以后，開始逐漸死亡。到試驗(yàn)結(jié)束，除了Y1有一只存活外，其它兩缸全部死亡。

Y2組第6 d左右也開始逐漸死亡，除了Y2′有一只存活外，試驗(yàn)結(jié)束后，全部死亡。

Y3組在試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，Y3、Y3′ 各有一只存活，Y3"仍然有兩只全部存活（見(jiàn)表3）。

對(duì)死亡蟹立即解剖觀察，發(fā)現(xiàn)死亡蟹的鰓絲全部發(fā)灰白色；有的鰓囊后背部的三角囊還腫大腹水，呈黑褐色。而沒(méi)有用藥物處理的對(duì)照組河蟹及從市場(chǎng)買回來(lái)的新鮮活蟹，解剖觀察鰓呈淡黃色。另外發(fā)現(xiàn)，死亡后的部分雌性蟹的卵巢發(fā)黑褐色，而不是正常雌性河蟹的黃紅色。

2.3 結(jié)論

0.15 mg/L清苔靈可以緩慢引起部分水草和（青苔）水綿的死亡，一般在6 d后開始出現(xiàn)明顯癥狀。

用藥處理后，逐漸死亡后的青苔（水綿）及水草葉片腐爛聚集成絮狀物并沉入水底，發(fā)酵后產(chǎn)生有害物質(zhì)，并酸化水質(zhì)，嚴(yán)重降低水中溶氧。

用藥處理后的養(yǎng)殖水體后期由于腐敗水草產(chǎn)生有毒有害物質(zhì)，可以造成河蟹中毒，在低溶氧情況下造成呼吸困難，鰓組織壞死，從而導(dǎo)致河蟹死亡。鰓部解剖特征也驗(yàn)證了這一結(jié)果。

通過(guò)用不同濃度的清苔靈對(duì)中華絨螯蟹浸浴3 d，結(jié)果證明清苔靈濃度分別為0、0.15、0.2、0.3、0.45 mg/L對(duì)中華絨螯蟹無(wú)不良影響；通過(guò)用0.15 mg/L清苔靈對(duì)水草和河蟹養(yǎng)殖試驗(yàn)，證明清苔靈對(duì)水草和河蟹有顯著的影響，2周后河蟹出現(xiàn)死亡，隨時(shí)間的延長(zhǎng)死亡逐步上升。

1 不同濃度清苔靈對(duì)河蟹的影響

1.1 試驗(yàn)方法

1.1.1 材料和方法 市售中華絨螯蟹幼蟹，20 g左右，健壯，活力好；清苔靈（撲草凈有效含量26%）；餌料為市售河蟹專用飼料；養(yǎng)殖試驗(yàn)玻璃水族箱（規(guī)格：30 cm×60 cm×40 cm），水族箱用1%高錳酸鉀消毒10 min后用曝氣的自來(lái)水沖洗干凈；1/10 000電子天平。

1.1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 試驗(yàn)設(shè)計(jì)5個(gè)清苔靈的藥浴濃度水平，分別為0 mg/L（對(duì)照組）、0.15 mg/L（說(shuō)明書建議使用濃度）、0.2 mg/L、0.3 mg/L、0.45 mg/L（3倍，說(shuō)明書建議使用濃度）。河蟹樣本量為2，重復(fù)數(shù)3。所有處理按照隨機(jī)化區(qū)組設(shè)計(jì)。

1.1.3 試驗(yàn)方法 每缸放曝氣自來(lái)水0.01 m3，水溫18 ℃±0.5 ℃，光照周期14 L：10 D，光照強(qiáng)度800 lx。每缸隨機(jī)放入健壯螃蟹2只。馴化養(yǎng)殖24 h后再進(jìn)行藥浸試驗(yàn)。馴化和試驗(yàn)養(yǎng)殖過(guò)程中每天10：00和15：00各投餌一次。以藥品包裝上建議的0.15 mg/L噴灑用量為參考，分別稱取0.0、0.001 5、0.002、0.003、0.004 5 g的清苔靈各三份，分別用10 mL的水溶解均勻后，按照隨機(jī)編號(hào)分別噴灑到缸內(nèi)。正式試驗(yàn)開始后每天7：00、19：00觀察螃蟹活動(dòng)、存活狀況。試驗(yàn)期3 d（72 h）。

1.2 試驗(yàn)結(jié)果

第一天，所有處理和對(duì)照組一樣，沒(méi)有死亡，攝食、活動(dòng)狀況正常。河蟹幼蟹活力在各組間沒(méi)有明顯差異。

第二天，所有處理和對(duì)照組一樣，沒(méi)有死亡，攝食、活動(dòng)狀況正常。河蟹幼蟹活力在各組間沒(méi)有明顯差異。

第三天，所有處理和對(duì)照組一樣，沒(méi)有死亡，攝食、活動(dòng)狀況正常。河蟹幼蟹活力在各組間沒(méi)有明顯差異。

1.3 試驗(yàn)結(jié)論

清苔靈在上述不同使用濃度范圍內(nèi)，對(duì)河蟹沒(méi)有直接致死作用；甚至超過(guò)推薦濃度三倍的濃度也未見(jiàn)死亡?？梢?jiàn)，在推薦使用濃度誤差范圍內(nèi)，清苔靈對(duì)河蟹幼蟹沒(méi)有直接致死作用。

2 清苔靈對(duì)水草和河蟹養(yǎng)殖的影響

2.1 材料和方法

2.1.1 試驗(yàn)材料 中華絨螯蟹；清苔靈；養(yǎng)殖試驗(yàn)水族箱；鮮活水草：金魚藻、黑葉輪藻、紅葉草、水綿（青苔）等，各種水草分別成束栽植在沉水的小花托內(nèi)，用小石子壓置；“正大”螃蟹用顆粒配合餌料；1/10 000電子天平；電子秤；溫度計(jì)；水質(zhì)溶氧儀；日光燈照光源等。

2.1.2 試驗(yàn)方法 水溫、光照周期、光照強(qiáng)度等試驗(yàn)條件同1.1。

試驗(yàn)對(duì)照組（D組）：共4個(gè)水族箱，每水族箱放入兩只螃蟹，對(duì)照組的前2個(gè)水族箱（D1、D1′）水量控制在0.02 m3，后2個(gè)水族箱（D2、D2′）水量增加到0.08 m3，水位較前者增加3倍，每個(gè)水族箱均放入高15～20 cm左右的上述水草、青苔（水綿）各一束。

噴灑清苔靈藥物組（Y組）：藥物濃度為0.15 mg/L，分為3組，每組3個(gè)水族箱。第一組（Y1、Y1′、Y1"）水量控制在0.02 m3；第二組（Y2、Y2′、Y2"） 水量控制在0.08 m3；第三組（Y3、Y3′、Y3"）水量也控制在0.08 m3，但水中添加磚瓦附著物和漂浮物供螃蟹浮出水面或臨時(shí)逃逸和躲避。每個(gè)水族箱水草和青苔量投放同對(duì)照組。

每個(gè)試驗(yàn)水族箱放2只螃蟹。所有處理按照隨機(jī)化區(qū)組設(shè)計(jì)。

4月23日開始馴化養(yǎng)殖，1 d后進(jìn)行藥物試驗(yàn)，馴化和養(yǎng)殖試驗(yàn)中每天10：00和15：00各投餌一次，投餌量為每水族箱20粒，觀測(cè)溶氧、pH等水質(zhì)因子，對(duì)水草、河蟹的反應(yīng)和存活狀況進(jìn)行記錄。

日常管理和記錄：每天定時(shí)、定量投餌。4月25日、4月30、5月4日、5月8日測(cè)量水體溶氧和pH的變化，記錄水綿、水草的生長(zhǎng)狀況情況和河蟹的反應(yīng)情況，試驗(yàn)結(jié)束后解剖觀察河蟹內(nèi)臟特點(diǎn)。

2.2 試驗(yàn)結(jié)果

2.2.1 水草、青苔的變化狀況 試驗(yàn)開始2 d內(nèi)，各試驗(yàn)缸內(nèi)的不同水草外觀癥狀相似，用藥的和沒(méi)有用藥的對(duì)照組的水草都沒(méi)有明顯變化。感覺(jué)好像藥物對(duì)水草的影響不太明顯。

3～4 d后，用藥缸的紅葉草和黑葉輪藻的葉邊緣稍有褪色，其它水草和水綿變化不大。

6～7 d左右，用藥缸的紅葉草的葉片基本褪色開始軟化腐敗，并逐漸集聚成絮狀沉入水底。黑葉輪藻開始部分葉片出現(xiàn)軟化和腐爛。（青苔）水綿開始由綠色變黃，有的變成黑綠色，逐漸開始死亡。金魚藻的顏色也開始變淡。

8～9 d左右，很多黑葉輪藻的葉片開始發(fā)暗變軟腐爛，部分葉片從莖上落下。此時(shí)，用藥缸的缸底都可以發(fā)現(xiàn)有許多腐敗的水草葉片以絮狀沉在水底。同時(shí)，伴隨著腐敗物發(fā)臭氣味出現(xiàn)（見(jiàn)表3）。

對(duì)照組的缸內(nèi)水草在前6 d表現(xiàn)正常。但到第7～8 d，淺水（0.02 m3）對(duì)照的兩個(gè)缸內(nèi)也有部分紅葉草、黑藻的葉片發(fā)暗并出現(xiàn)壞死，水中和用藥缸一樣，有點(diǎn)難聞氣味出現(xiàn)。對(duì)照組出現(xiàn)這種情況，可能與水量較少有關(guān)。因?yàn)樗w較淺，水生植物不能全部沉浮在水中，相互黏粘、疊摞在一起，影響了他們的光合作用和新陳代謝，從而導(dǎo)致部分葉片壞死、腐敗。

2.2.2 用藥后水草死亡及對(duì)養(yǎng)殖環(huán)境的影響 試驗(yàn)證明，噴灑清苔靈后，對(duì)不同水草的殺滅作用是有選擇性的。紅葉草最敏感，葉片死亡和腐爛相對(duì)時(shí)間較短，5 d左右就可出現(xiàn)明顯癥狀。其次是黑葉輪藻。在7 d以后，青苔（水綿）和金魚藻才表現(xiàn)出壞死。水草死亡后開始腐爛，并在水底聚集成絮狀，腐爛發(fā)酵后產(chǎn)生毒害物質(zhì)，同時(shí)消耗水中溶氧量。由表1可以看出，在沒(méi)有換水的情況下，藥物處理組的水溶氧量隨著時(shí)間的延長(zhǎng)顯著降低，明顯低于對(duì)照組的。同時(shí)，水的pH值也隨著時(shí)間的延長(zhǎng)而逐漸降低（見(jiàn)表2 ）。溶氧降低和水體的酸化，與水草死亡后腐敗有直接的關(guān)系。腐敗水草產(chǎn)生有毒有害物質(zhì)一方面消耗溶氧，從而損害河蟹的正常生理機(jī)能，另一方面直接對(duì)河蟹的鰓等器官產(chǎn)生毒害作用。在沒(méi)有附著物使河蟹不能爬出水面的情況下，在有毒有害物質(zhì)存在的情況下，低于3 mg/L左右的溶氧，河蟹會(huì)出現(xiàn)呼吸障礙，嚴(yán)重的會(huì)死亡。解剖看到的死蟹的鰓呈灰白色，說(shuō)明是因?yàn)槿毖踉斐裳捍罅考杏邛w部，以進(jìn)行補(bǔ)償氣體交換；由于血液的沉積，河蟹血液中的Cu2+也隨著其死亡而沉積在那里。所以河蟹因缺氧死后鰓一般呈灰色。如果水中有附著物，或者能爬出水面上岸呼吸，河蟹是可以生存的；Y3處理組有部分存活，可能跟放入磚瓦供河蟹暫時(shí)逃離惡劣水質(zhì)和缺氧環(huán)境有關(guān)。如果發(fā)現(xiàn)部分螃蟹開始死亡時(shí)候，及時(shí)換水和充氧，及時(shí)改善水質(zhì)后是可以挽救部分螃蟹的。

2.2.3 河蟹死亡情況

對(duì)照組：在養(yǎng)殖過(guò)程中，D1組死亡一只，其它各對(duì)照缸均正常成活。該只死亡原因可能跟對(duì)照一組的水體較少較淺，導(dǎo)致少部分水草葉片腐敗有關(guān)。因?yàn)樗w較淺時(shí)，水草不能正常沉浮，影響其光合代謝作用，使部分葉片枯萎、腐爛。導(dǎo)致水質(zhì)變差，腐敗產(chǎn)生的有害物質(zhì)增加，溶氧減少。

藥物組：Y1組用藥第6 d以后，開始逐漸死亡。到試驗(yàn)結(jié)束，除了Y1有一只存活外，其它兩缸全部死亡。

Y2組第6 d左右也開始逐漸死亡，除了Y2′有一只存活外，試驗(yàn)結(jié)束后，全部死亡。

Y3組在試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，Y3、Y3′ 各有一只存活，Y3"仍然有兩只全部存活（見(jiàn)表3）。

對(duì)死亡蟹立即解剖觀察，發(fā)現(xiàn)死亡蟹的鰓絲全部發(fā)灰白色；有的鰓囊后背部的三角囊還腫大腹水，呈黑褐色。而沒(méi)有用藥物處理的對(duì)照組河蟹及從市場(chǎng)買回來(lái)的新鮮活蟹，解剖觀察鰓呈淡黃色。另外發(fā)現(xiàn)，死亡后的部分雌性蟹的卵巢發(fā)黑褐色，而不是正常雌性河蟹的黃紅色。

2.3 結(jié)論

0.15 mg/L清苔靈可以緩慢引起部分水草和（青苔）水綿的死亡，一般在6 d后開始出現(xiàn)明顯癥狀。

用藥處理后，逐漸死亡后的青苔（水綿）及水草葉片腐爛聚集成絮狀物并沉入水底，發(fā)酵后產(chǎn)生有害物質(zhì)，并酸化水質(zhì)，嚴(yán)重降低水中溶氧。

用藥處理后的養(yǎng)殖水體后期由于腐敗水草產(chǎn)生有毒有害物質(zhì)，可以造成河蟹中毒，在低溶氧情況下造成呼吸困難，鰓組織壞死，從而導(dǎo)致河蟹死亡。鰓部解剖特征也驗(yàn)證了這一結(jié)果。

通過(guò)用不同濃度的清苔靈對(duì)中華絨螯蟹浸浴3 d，結(jié)果證明清苔靈濃度分別為0、0.15、0.2、0.3、0.45 mg/L對(duì)中華絨螯蟹無(wú)不良影響；通過(guò)用0.15 mg/L清苔靈對(duì)水草和河蟹養(yǎng)殖試驗(yàn)，證明清苔靈對(duì)水草和河蟹有顯著的影響，2周后河蟹出現(xiàn)死亡，隨時(shí)間的延長(zhǎng)死亡逐步上升。

1 不同濃度清苔靈對(duì)河蟹的影響

1.1 試驗(yàn)方法

1.1.1 材料和方法 市售中華絨螯蟹幼蟹，20 g左右，健壯，活力好；清苔靈（撲草凈有效含量26%）；餌料為市售河蟹專用飼料；養(yǎng)殖試驗(yàn)玻璃水族箱（規(guī)格：30 cm×60 cm×40 cm），水族箱用1%高錳酸鉀消毒10 min后用曝氣的自來(lái)水沖洗干凈；1/10 000電子天平。

1.1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 試驗(yàn)設(shè)計(jì)5個(gè)清苔靈的藥浴濃度水平，分別為0 mg/L（對(duì)照組）、0.15 mg/L（說(shuō)明書建議使用濃度）、0.2 mg/L、0.3 mg/L、0.45 mg/L（3倍，說(shuō)明書建議使用濃度）。河蟹樣本量為2，重復(fù)數(shù)3。所有處理按照隨機(jī)化區(qū)組設(shè)計(jì)。

1.1.3 試驗(yàn)方法 每缸放曝氣自來(lái)水0.01 m3，水溫18 ℃±0.5 ℃，光照周期14 L：10 D，光照強(qiáng)度800 lx。每缸隨機(jī)放入健壯螃蟹2只。馴化養(yǎng)殖24 h后再進(jìn)行藥浸試驗(yàn)。馴化和試驗(yàn)養(yǎng)殖過(guò)程中每天10：00和15：00各投餌一次。以藥品包裝上建議的0.15 mg/L噴灑用量為參考，分別稱取0.0、0.001 5、0.002、0.003、0.004 5 g的清苔靈各三份，分別用10 mL的水溶解均勻后，按照隨機(jī)編號(hào)分別噴灑到缸內(nèi)。正式試驗(yàn)開始后每天7：00、19：00觀察螃蟹活動(dòng)、存活狀況。試驗(yàn)期3 d（72 h）。

1.2 試驗(yàn)結(jié)果

第一天，所有處理和對(duì)照組一樣，沒(méi)有死亡，攝食、活動(dòng)狀況正常。河蟹幼蟹活力在各組間沒(méi)有明顯差異。

第二天，所有處理和對(duì)照組一樣，沒(méi)有死亡，攝食、活動(dòng)狀況正常。河蟹幼蟹活力在各組間沒(méi)有明顯差異。

第三天，所有處理和對(duì)照組一樣，沒(méi)有死亡，攝食、活動(dòng)狀況正常。河蟹幼蟹活力在各組間沒(méi)有明顯差異。

1.3 試驗(yàn)結(jié)論

清苔靈在上述不同使用濃度范圍內(nèi)，對(duì)河蟹沒(méi)有直接致死作用；甚至超過(guò)推薦濃度三倍的濃度也未見(jiàn)死亡?？梢?jiàn)，在推薦使用濃度誤差范圍內(nèi)，清苔靈對(duì)河蟹幼蟹沒(méi)有直接致死作用。

2 清苔靈對(duì)水草和河蟹養(yǎng)殖的影響

2.1 材料和方法

2.1.1 試驗(yàn)材料 中華絨螯蟹；清苔靈；養(yǎng)殖試驗(yàn)水族箱；鮮活水草：金魚藻、黑葉輪藻、紅葉草、水綿（青苔）等，各種水草分別成束栽植在沉水的小花托內(nèi)，用小石子壓置；“正大”螃蟹用顆粒配合餌料；1/10 000電子天平；電子秤；溫度計(jì)；水質(zhì)溶氧儀；日光燈照光源等。

2.1.2 試驗(yàn)方法 水溫、光照周期、光照強(qiáng)度等試驗(yàn)條件同1.1。

試驗(yàn)對(duì)照組（D組）：共4個(gè)水族箱，每水族箱放入兩只螃蟹，對(duì)照組的前2個(gè)水族箱（D1、D1′）水量控制在0.02 m3，后2個(gè)水族箱（D2、D2′）水量增加到0.08 m3，水位較前者增加3倍，每個(gè)水族箱均放入高15～20 cm左右的上述水草、青苔（水綿）各一束。

噴灑清苔靈藥物組（Y組）：藥物濃度為0.15 mg/L，分為3組，每組3個(gè)水族箱。第一組（Y1、Y1′、Y1"）水量控制在0.02 m3；第二組（Y2、Y2′、Y2"） 水量控制在0.08 m3；第三組（Y3、Y3′、Y3"）水量也控制在0.08 m3，但水中添加磚瓦附著物和漂浮物供螃蟹浮出水面或臨時(shí)逃逸和躲避。每個(gè)水族箱水草和青苔量投放同對(duì)照組。

每個(gè)試驗(yàn)水族箱放2只螃蟹。所有處理按照隨機(jī)化區(qū)組設(shè)計(jì)。

4月23日開始馴化養(yǎng)殖，1 d后進(jìn)行藥物試驗(yàn)，馴化和養(yǎng)殖試驗(yàn)中每天10：00和15：00各投餌一次，投餌量為每水族箱20粒，觀測(cè)溶氧、pH等水質(zhì)因子，對(duì)水草、河蟹的反應(yīng)和存活狀況進(jìn)行記錄。

日常管理和記錄：每天定時(shí)、定量投餌。4月25日、4月30、5月4日、5月8日測(cè)量水體溶氧和pH的變化，記錄水綿、水草的生長(zhǎng)狀況情況和河蟹的反應(yīng)情況，試驗(yàn)結(jié)束后解剖觀察河蟹內(nèi)臟特點(diǎn)。

2.2 試驗(yàn)結(jié)果

2.2.1 水草、青苔的變化狀況 試驗(yàn)開始2 d內(nèi)，各試驗(yàn)缸內(nèi)的不同水草外觀癥狀相似，用藥的和沒(méi)有用藥的對(duì)照組的水草都沒(méi)有明顯變化。感覺(jué)好像藥物對(duì)水草的影響不太明顯。

3～4 d后，用藥缸的紅葉草和黑葉輪藻的葉邊緣稍有褪色，其它水草和水綿變化不大。

6～7 d左右，用藥缸的紅葉草的葉片基本褪色開始軟化腐敗，并逐漸集聚成絮狀沉入水底。黑葉輪藻開始部分葉片出現(xiàn)軟化和腐爛。（青苔）水綿開始由綠色變黃，有的變成黑綠色，逐漸開始死亡。金魚藻的顏色也開始變淡。

8～9 d左右，很多黑葉輪藻的葉片開始發(fā)暗變軟腐爛，部分葉片從莖上落下。此時(shí)，用藥缸的缸底都可以發(fā)現(xiàn)有許多腐敗的水草葉片以絮狀沉在水底。同時(shí)，伴隨著腐敗物發(fā)臭氣味出現(xiàn)（見(jiàn)表3）。

對(duì)照組的缸內(nèi)水草在前6 d表現(xiàn)正常。但到第7～8 d，淺水（0.02 m3）對(duì)照的兩個(gè)缸內(nèi)也有部分紅葉草、黑藻的葉片發(fā)暗并出現(xiàn)壞死，水中和用藥缸一樣，有點(diǎn)難聞氣味出現(xiàn)。對(duì)照組出現(xiàn)這種情況，可能與水量較少有關(guān)。因?yàn)樗w較淺，水生植物不能全部沉浮在水中，相互黏粘、疊摞在一起，影響了他們的光合作用和新陳代謝，從而導(dǎo)致部分葉片壞死、腐敗。

2.2.2 用藥后水草死亡及對(duì)養(yǎng)殖環(huán)境的影響 試驗(yàn)證明，噴灑清苔靈后，對(duì)不同水草的殺滅作用是有選擇性的。紅葉草最敏感，葉片死亡和腐爛相對(duì)時(shí)間較短，5 d左右就可出現(xiàn)明顯癥狀。其次是黑葉輪藻。在7 d以后，青苔（水綿）和金魚藻才表現(xiàn)出壞死。水草死亡后開始腐爛，并在水底聚集成絮狀，腐爛發(fā)酵后產(chǎn)生毒害物質(zhì)，同時(shí)消耗水中溶氧量。由表1可以看出，在沒(méi)有換水的情況下，藥物處理組的水溶氧量隨著時(shí)間的延長(zhǎng)顯著降低，明顯低于對(duì)照組的。同時(shí)，水的pH值也隨著時(shí)間的延長(zhǎng)而逐漸降低（見(jiàn)表2 ）。溶氧降低和水體的酸化，與水草死亡后腐敗有直接的關(guān)系。腐敗水草產(chǎn)生有毒有害物質(zhì)一方面消耗溶氧，從而損害河蟹的正常生理機(jī)能，另一方面直接對(duì)河蟹的鰓等器官產(chǎn)生毒害作用。在沒(méi)有附著物使河蟹不能爬出水面的情況下，在有毒有害物質(zhì)存在的情況下，低于3 mg/L左右的溶氧，河蟹會(huì)出現(xiàn)呼吸障礙，嚴(yán)重的會(huì)死亡。解剖看到的死蟹的鰓呈灰白色，說(shuō)明是因?yàn)槿毖踉斐裳捍罅考杏邛w部，以進(jìn)行補(bǔ)償氣體交換；由于血液的沉積，河蟹血液中的Cu2+也隨著其死亡而沉積在那里。所以河蟹因缺氧死后鰓一般呈灰色。如果水中有附著物，或者能爬出水面上岸呼吸，河蟹是可以生存的；Y3處理組有部分存活，可能跟放入磚瓦供河蟹暫時(shí)逃離惡劣水質(zhì)和缺氧環(huán)境有關(guān)。如果發(fā)現(xiàn)部分螃蟹開始死亡時(shí)候，及時(shí)換水和充氧，及時(shí)改善水質(zhì)后是可以挽救部分螃蟹的。

2.2.3 河蟹死亡情況

對(duì)照組：在養(yǎng)殖過(guò)程中，D1組死亡一只，其它各對(duì)照缸均正常成活。該只死亡原因可能跟對(duì)照一組的水體較少較淺，導(dǎo)致少部分水草葉片腐敗有關(guān)。因?yàn)樗w較淺時(shí)，水草不能正常沉浮，影響其光合代謝作用，使部分葉片枯萎、腐爛。導(dǎo)致水質(zhì)變差，腐敗產(chǎn)生的有害物質(zhì)增加，溶氧減少。

藥物組：Y1組用藥第6 d以后，開始逐漸死亡。到試驗(yàn)結(jié)束，除了Y1有一只存活外，其它兩缸全部死亡。

Y2組第6 d左右也開始逐漸死亡，除了Y2′有一只存活外，試驗(yàn)結(jié)束后，全部死亡。

Y3組在試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，Y3、Y3′ 各有一只存活，Y3"仍然有兩只全部存活（見(jiàn)表3）。

對(duì)死亡蟹立即解剖觀察，發(fā)現(xiàn)死亡蟹的鰓絲全部發(fā)灰白色；有的鰓囊后背部的三角囊還腫大腹水，呈黑褐色。而沒(méi)有用藥物處理的對(duì)照組河蟹及從市場(chǎng)買回來(lái)的新鮮活蟹，解剖觀察鰓呈淡黃色。另外發(fā)現(xiàn)，死亡后的部分雌性蟹的卵巢發(fā)黑褐色，而不是正常雌性河蟹的黃紅色。

2.3 結(jié)論

0.15 mg/L清苔靈可以緩慢引起部分水草和（青苔）水綿的死亡，一般在6 d后開始出現(xiàn)明顯癥狀。

用藥處理后，逐漸死亡后的青苔（水綿）及水草葉片腐爛聚集成絮狀物并沉入水底，發(fā)酵后產(chǎn)生有害物質(zhì)，并酸化水質(zhì)，嚴(yán)重降低水中溶氧。

用藥處理后的養(yǎng)殖水體后期由于腐敗水草產(chǎn)生有毒有害物質(zhì)，可以造成河蟹中毒，在低溶氧情況下造成呼吸困難，鰓組織壞死，從而導(dǎo)致河蟹死亡。鰓部解剖特征也驗(yàn)證了這一結(jié)果。