通竅活血湯對(duì)腦梗死急性期大鼠MTL及GAS的調(diào)節(jié)作用*

安朋朋 李 紅 唐 明 楊秀麗 張 毅 徐偉俊 唐曉曉

（1.山東省青島市海慈醫(yī)療集團(tuán)，山東 青島 266033；2.山東省青島開發(fā)區(qū)第一人民醫(yī)院，山東 青島 266555）

通竅活血湯對(duì)腦梗死急性期大鼠MTL及GAS的調(diào)節(jié)作用*

安朋朋1李 紅1唐 明1楊秀麗1張 毅1徐偉俊1唐曉曉2

（1.山東省青島市海慈醫(yī)療集團(tuán)，山東 青島 266033；2.山東省青島開發(fā)區(qū)第一人民醫(yī)院，山東 青島 266555）

目的 研究通竅活血湯對(duì)腦梗死急性期大鼠胃動(dòng)素及胃泌素的影響。方法 制備大鼠大腦中動(dòng)脈梗死模型，隨機(jī)分為腦梗死組、通竅常規(guī)劑量組、通竅低劑量組、西咪替丁組、假手術(shù)組、并設(shè)正常組。分別給予生理鹽水、通竅活血湯常規(guī)劑量、通竅活血湯低劑量、西咪替丁、生理鹽水灌胃，并于4、7 d后測(cè)定胃動(dòng)素（MTL）、胃泌素（GAS）含量。結(jié)果 腦梗死組4、7 d時(shí)MTL、GAS含量較相應(yīng)正常組、假手術(shù)組及通竅常規(guī)劑量組大鼠有明顯升高（P＜0.01）；與通竅低劑量組相比，通竅常規(guī)劑量組更能明顯降低MTL、GAS水平（P＜0.01）。4 d時(shí)西咪替丁組、通竅常規(guī)劑量及低劑量MTL、GAS水平較7 d時(shí)明顯偏高（P＜0.05）。結(jié)論 通竅活血湯能有效調(diào)節(jié)腦梗死急性期胃動(dòng)素及胃泌素的表達(dá)，并且與劑量成正比關(guān)系，此可能為其治療腦梗死后胃腸功能障礙的機(jī)制。

通竅活血湯 腦梗死急性期 胃動(dòng)素 胃泌素 調(diào)節(jié)

腦梗死是嚴(yán)重威脅人類生命健康的臨床常見病之一，具有高發(fā)病率、高死亡率、高致殘率的特點(diǎn)［1-2］。腦梗塞死亡率及致殘率的高低往往取決于急性期治療是否得當(dāng)，尤其是常見并發(fā)癥的治療［3］。胃腸功能障礙是腦梗死急性期最常見的并發(fā)癥之一［4-5］。目前應(yīng)用常規(guī)H2受體阻滯劑及質(zhì)子泵抑制劑療效欠佳。本研究即從腦梗死血瘀致病的基本病機(jī)出發(fā)，觀察通竅活血湯對(duì)胃動(dòng)素（MTL）及胃泌素（GAS）的調(diào)節(jié)作用，驗(yàn)證活血化瘀中藥對(duì)腦梗死急性期胃腸損傷的保護(hù)性作用，并探討其可能的藥理機(jī)制?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 健康雄性清潔級(jí)Wistar大鼠，體質(zhì)量（200±20）g。由山東大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供，動(dòng)物合格證號(hào)：0009265。

1.2 試藥與儀器 通竅活血湯組方為桃仁9 g，紅花9 g，赤芍 3 g，川芎 3 g，生姜 9 g，大棗 21 g，老蔥 3 根，按照藥物比例為 3∶3∶1∶1∶3∶7∶10 配制，并加麝香 0.15 g，黃酒250 mL。以上藥物均由青島市海慈醫(yī)療集團(tuán)3級(jí)實(shí)驗(yàn)室提供并配制。西咪替丁片（規(guī)格為0.2 g/片。昆明振華制藥廠有限公司生產(chǎn)，批準(zhǔn)文號(hào)：國(guó)藥準(zhǔn)字H53020657）。0.9%氯化鈉注射液、10%水合氯醛、蒸餾水（青島市海慈醫(yī)療集團(tuán)提供）。DPC-GAMMA-C12型γ計(jì)數(shù)器 （美國(guó)德普公司）；MTL、VIP放射免疫分析藥盒（北方生物技術(shù)有限公司）。

1.3 動(dòng)物分組及模型制備 采用線栓法制備大鼠大腦中動(dòng)脈梗死模型。將大鼠分為通竅常規(guī)劑量組、通竅低劑量組、腦梗死組、假手術(shù)組、西咪替丁組，并設(shè)正常組。共計(jì)6組，每組各8只。各組大鼠每日給予灌胃1次，通竅常規(guī)劑量組給予2 mL質(zhì)量濃度為1.3 g/mL通竅活血湯灌胃；通竅低劑量組給予1 mL 0.9%氯化鈉注射液加質(zhì)量濃度為1.3 g/mL通竅活血湯1 mL稀釋后灌胃；西咪替丁組按照0.1 g/kg標(biāo)準(zhǔn)灌胃。其余各組給予2 mL 0.9%氯化鈉注射液灌胃。

1.4 指標(biāo)測(cè)定 空腹采下腔靜脈取血4 mL，2 mL注入含7.5%2Na-EDTA和抑肽酶各40 μL的試管中，混勻，4℃，3000 r/min離心 10 min，取血漿，置-70℃保存待測(cè)MTL；另2 mL注入非抗凝試管，置4℃，3000 r/min離心10 min，取血清，-70℃保存待測(cè)GAS。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料以（±s）表示，組間比較采用方差分析和F檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 各組MTL含量比較 各組同一時(shí)間MTL水平的比較見表1。4 d與7 d時(shí)正常組與假手術(shù)組大鼠各組血清MTL水平相比均無差異（P＞0.05）。西咪替丁組與通竅低劑量組血清MTL水平相比無明顯差異 （P＞0.05）；通竅活血湯常規(guī)、低劑量、西咪替丁組MTL水平較同一時(shí)間正常及假手術(shù)組亦均有升高（P＜0.01）；4 d時(shí)腦梗死組MTL水平較正常組、假手術(shù)組及通竅常規(guī)劑量組均有明顯升高（P＜0.01），比通竅低劑量組略有升高（P＜0.01），與西咪替丁組相近；通竅常規(guī)量組較低劑量組、西咪替丁組更能降低MTL水平 （P＜0.01）；7 d時(shí)腦梗死組較其余各組均明顯升高 （P＜0.01），通竅常規(guī)劑量組較西咪替丁組MTL水平降低（P＜0.05），較通竅低劑量組則明顯降低（P＜0.01）。

各組不同時(shí)間MTL水平比較見表1。4 d時(shí)西咪替丁組、通竅常規(guī)劑量及低劑量組MTL水平較7 d時(shí)明顯偏高（P＜0.05）；腦梗死組、正常對(duì)照組及假手術(shù)組不同時(shí)間前后對(duì)比MTL含量變化無差異 （P＞0.05）。

表1 各組大鼠MTL含量比較（pg/mL，±s）

表1 各組大鼠MTL含量比較（pg/mL，±s）

與正常對(duì)照組比較，▲P＜0.05，▲▲P＜0.01；與假手術(shù)組比較，▼P＜0.05，▼▼P＜0.01；與腦梗死組比較，■P＜0.05，■■P＜0.01； 與西咪替丁組比較，★P＜0.05，★★P＜0.01；與通竅常規(guī)劑量比較，☆P＜0.05，☆☆P＜0.01；與通竅低劑量組比較，*P＜0.05，**P＜0.01；與同組 4 d 比較，◇P＜0.05，◇◇P＜0.01。 下同。

組 別 n正常組 8假手術(shù)組 8腦梗死組 8西咪替丁組 8通竅常規(guī)劑量組 8通竅低劑量組 8 4 d 117.01±11.38▼▼■■★★☆☆**117.67±12.73▲▲■■★★☆☆**189.51±13.48▲▲▼▼☆☆*7 d 119.79±10.61▼▼■■★★☆☆**120.27±11.48▲▲■■★★☆☆**183.05±14.49▲▲▼▼★★☆☆**177.45±13.64▲▲▼▼☆☆ 152.16±12.66▲▲▼▼■■☆◇151.23±7.46▲▲▼▼■■★★ 138.72±8.02▲▲▼▼■■★**◇174.21±14.25▲▲▼▼■☆☆** 156.60±11.87▲▲▼▼■■☆☆◇

2.2 各組GAS含量比較 各組同一時(shí)間GAS水平比較見表2。4 d與7 d時(shí)正常組與假手術(shù)組大鼠GAS水平相比均無明顯差異（P＞0.05）。西咪替丁組與通竅低劑量組GAS水平相比無明顯差異（P＞0.05）；通竅常規(guī)劑量、低劑量、西咪替丁組GAS水平較相應(yīng)正常及假手術(shù)組亦均有升高（P＜0.01）；腦梗死組GAS水平較其余各組均明顯偏高 （P＜0.01）；4 d時(shí)通竅常規(guī)劑量組GAS水平比低劑量組偏低（P＜0.05），比西咪替丁組降低更明顯 （P＜0.01）；7 d時(shí)通竅常規(guī)劑量組較西咪替丁組、通竅低劑量組GAS水平明顯降低（P＜0.01）。

表2 各組大鼠GAS含量比較（pg/mL，±s）

表2 各組大鼠GAS含量比較（pg/mL，±s）

組 別 n正常組 8假手術(shù)組 8腦梗死組 8西咪替丁組 8通竅常規(guī)劑量組 8通竅低劑量組 8 4 d 130.51±8.03▼▼■■★★☆☆**136.93±13.48▲▲■■★★☆☆**216.28±12.12 ▲▲▼▼★★☆☆**7 d 135.29±6.97▼▼■■★★☆☆**132.12±10.39▲▲■■★★☆☆**209.02±6.38▲▲▼▼★★☆☆**184.10±9.45▲▲▼▼■■☆☆ 173.11±10.65▲▲▼▼■■☆☆◇166.64±11.48▲▲▼▼■■★★* 152.14±8.54▲▲▼▼■■★★**◇180.42±10.08▲▲▼▼■■☆ 168.48±8.01▲▲▼▼■■☆☆◇

各組不同時(shí)間GAS水平的對(duì)比見表2。4 d時(shí)西咪替丁組、通竅常規(guī)及低劑量GAS水平較7 d時(shí)明顯偏高（P＜0.05）；腦梗死組、正常組及假手術(shù)組不同時(shí)間前后對(duì)比血清GAS含量變化無差異（P＞0.05）。

3 討 論

腦梗死急性期胃腸功能障礙多被認(rèn)為與胃酸分泌過多及胃腸動(dòng)力異常引起［6-7］。胃泌素是最強(qiáng)的促胃酸分泌的激素，可使壁細(xì)胞最大限度分泌胃酸［8］。急性腦梗死后在應(yīng)激等因素刺激下腦組織及胃腸組織缺血缺氧，迷走神經(jīng)及胃腸黏膜神經(jīng)叢高度興奮，刺激胃泌素分泌，血清胃泌素水平升高，胃酸分泌增多，增強(qiáng)了胃酸對(duì)胃腸黏膜的損害，引起胃黏膜糜爛、潰瘍出血［9］。MTL則能強(qiáng)烈刺激上消化道機(jī)械運(yùn)動(dòng)和生理肌電活動(dòng)，引起胃腸周期性收縮運(yùn)動(dòng)［10］。同時(shí)MTL作為腦腸肽，也是中樞促進(jìn)胃腸運(yùn)動(dòng)的主要調(diào)控因素之一，其調(diào)控機(jī)制與下丘腦—腦垂體功能軸密切相關(guān)［11］。急性腦梗死后腦組織破壞，顱內(nèi)壓升高，直接或間接壓迫下丘腦等結(jié)構(gòu)，促使血漿MTL濃度升高。MTL的釋放量與胃腸活動(dòng)成正比，MTL釋放增多，胃腸蠕動(dòng)增快，MTL釋放減少，胃腸蠕動(dòng)減慢［12］。胃腸的異常運(yùn)動(dòng)破壞了胃腸黏膜的屏障功能，從而引起胃腸的相關(guān)癥狀。

本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明，MTL及GAS在腦梗死急性期的含量均顯著升高。無論4 d還是7 d腦梗死組兩種胃腸激素含量遠(yuǎn)高于正常組及假手術(shù)組。由此可以推測(cè)，MTL、GAS的升高與腦梗死急性期胃腸功能障礙發(fā)生有密切聯(lián)系。同時(shí)MTL及GAS將有可能成為急性腦梗死早期胃腸功能障礙的判斷標(biāo)準(zhǔn)之一。

血瘀是急性腦梗死的致病因素，同樣也是腦梗死發(fā)生的病機(jī)的關(guān)鍵［13］。血瘀貫穿于急性腦梗死的各個(gè)部位及階段，因此腦梗死胃腸功能障礙的發(fā)生與血瘀密切相關(guān)［14］?；鐾ńj(luò)不僅是治療急性腦梗死的有效法則，同樣對(duì)防治急性期胃腸功能障礙有積極意義。通竅活血湯是清代王清任《醫(yī)林改錯(cuò)》中活血化瘀的代表方劑之一，該方具有活血、通竅、行瘀、通經(jīng)之效［15］。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)通竅活血湯和西藥干預(yù)后兩種激素水平均較腦梗死組有所降低，且常規(guī)劑量組較低劑量組激素水平調(diào)節(jié)更為明顯。也從側(cè)面反映了MTL、GAS降低可能有助于胃腸功能的恢復(fù)。結(jié)合實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，通竅活血湯通過降低MTL、GAS水平，減少因腦梗死而出現(xiàn)的胃酸過度分泌及胃腸運(yùn)動(dòng)異常，減輕了胃腸功能障礙的癥狀，且通竅活血湯的療效與劑量成正比。

本實(shí)驗(yàn)研究提示MTL及GAS的升高可作為腦梗塞胃腸功能障礙早期判斷要點(diǎn)，證實(shí)了通竅活血湯對(duì)腦梗死急性MTL及GAS具有較好的調(diào)節(jié)作用，充分說明了活血化瘀法對(duì)急性腦梗死胃腸損傷具有良好的保護(hù)性作用，也為臨床應(yīng)用提供了有效方藥。

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The Regulatory Effect of Tongqiaohuoxue Decoction on MTL and GAS of Rats with Cerebral Infarction in Acute Period

AN Pengpeng，LI Hong，TANG Ming，et al.Haici Medical Center of Qingdao City，Shandong Province，Shandong，Qingdao266033，China

Objective:To observe effect ofTongqiaohuoxue Decoctionon changes of motilin （MTL） and gastrin（GAS） of rats with cerebral infarction in acute period.Methods:Cerebral infarction models were made and randomly divided into cerebral infarction group，Tongqiaohuoxue Decoctionroutine dose group，low dose group，Cimetidine group，sham operation group，and control group.The rats were given Saline，Tongqiaohuoxue Decoctionroutine dose，Tongqiaohuoxue Decoctionlow dose，Cimetidine，and Saline enema separately.At 4th day and 7th day，inferior vena venous blood samples were collected to detect the MTL and GAS concentrations by radioimmunoassay.Results:At 4th and 7th day the MTL and GAS of cerebral infarction group were still higher than those of normal group，sham operation group andTongqiaohuoxue Decoctionroutine dose group （P＜0.01）；Compared withTongqiaohuoxue Decoctionlow dose group，MTL and GAS inTongqiaohuoxue Decoctionroutine dose group decreased （P＜0.01） significantly.In 4th day，MTL and GAS in Cimetidine group，Tongqiaohuoxue Decoctionroutine dose group andTongqiaohuoxue Decoctionlow dose group were higher than those in 7 th day （P＜0.05）.Conculsion:Tongqiaohuoxue Decoctioncan effectively regulate the expression of motilin （MTL） and vasoactive intestinal peptide（GAS），which is proportional to dose.It may be the mechanism treating gastrointestinal dysfunction after cerebral infarction.

Tongqiaohuoxue Decoction；Acute period of cerebral infarction；Motilin；Gastrin；Regulating

R285.5

A

1004-745X（2014）07-1276-03

10.3969/j.issn.1004-745X.2014.07.025

山東省中醫(yī)藥科技發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目（2009-203）

2014-04-02）