牛病毒性腹瀉-黏膜病的研究進(jìn)展

胡德全，漆 英， 夏 磊，董靜珊 ，曾剛秀 ，范才良

（1.四川省榮縣農(nóng)牧業(yè)局，四川 榮縣 643100；2.云南省昭通市動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所，云南 昭通 657000；3.重慶市榮昌縣畜牧獸醫(yī)局，重慶 榮昌 （402460）

牛病毒性腹瀉-黏膜病是由牛病毒性腹瀉病毒（BVDV），又稱牛病毒性腹瀉-黏膜病病毒（BVD-MDV）引起的一種傳染病，臨床上以發(fā)熱、黏膜糜爛或潰瘍、白細(xì)胞減少、腹瀉、懷孕母牛流產(chǎn)或產(chǎn)畸型胎兒為主要特征。由于BVDV與同屬內(nèi)的豬瘟病毒（CSFV）和綿羊邊界病毒（BDV）存在抗原相關(guān)性，血清學(xué)上存在交叉反應(yīng)，而且能夠突破宿主特異性發(fā)生交叉感染，所以BVDV不僅能感染牛，也能感染綿羊、山羊、豬、鹿和其他反芻動(dòng)物。在我國，牛病毒性腹瀉-黏膜病被列為二類傳染病。近年來隨著奶牛進(jìn)口數(shù)量急劇增加，該病已成為當(dāng)前嚴(yán)重危害我國養(yǎng)牛業(yè)的傳染病之一。

1 病原學(xué)

牛病毒性腹瀉病毒（BVDV）屬黃病毒科、瘟病毒屬。病毒粒子略呈圓形，直徑40～60nm，具有脂蛋白囊膜，囊膜表面有10～20nm環(huán)形亞單位。病毒粒子在蔗糖密度梯度中的浮密度是1.13～1.14g/cm3，病毒粒子的沉淀系數(shù)是80～90s。

該病毒能在細(xì)胞培養(yǎng)中繁殖，實(shí)驗(yàn)室常用牛腎繼代細(xì)胞（MDBK二倍體細(xì)胞株）增殖病毒，另外，還可在牛胎肺、睪丸、子宮內(nèi)膜、氣管組織中生長(zhǎng)。有些毒株可在不同的組織培養(yǎng)系統(tǒng)中產(chǎn)生細(xì)胞病變，但多數(shù)毒株不產(chǎn)生細(xì)胞病變，例如紐約1株病毒在胎牛肌肉細(xì)胞或胎牛腎細(xì)胞中增殖時(shí)不產(chǎn)生病變，印第安納46株病毒和Saun ders株病毒在胎牛腎細(xì)胞中生長(zhǎng)也無病變。這些不出現(xiàn)細(xì)胞病變的毒株，可用已知的產(chǎn)細(xì)胞病變毒株進(jìn)行蝕斑干擾試驗(yàn)或者應(yīng)用新城疫病毒的強(qiáng)化法（END法）以及免疫熒光技術(shù)等進(jìn)行鑒定。俄勒岡C24V株病毒則有產(chǎn)生細(xì)胞病變的能力。某些毒株產(chǎn)生的細(xì)胞病變較快，且可完全毀壞細(xì)胞單層，主要表現(xiàn)為細(xì)胞變圓，細(xì)胞核固縮到邊緣，胞漿內(nèi)出現(xiàn)大量空泡，細(xì)胞逐漸脫落，細(xì)胞單層呈網(wǎng)狀，最后大部分或全部細(xì)胞從瓶壁脫落。

該病毒在26℃或37℃放置24h，大部分喪失感染力，56℃可使病毒滅活。在低溫下穩(wěn)定，真空凍干的病毒可在-60℃～-70℃下保存多年。pH值低于3時(shí)可致病毒死亡。病毒對(duì)乙醚、氯仿敏感。

2 流行病學(xué)

BVD病毒在自然條件下可染牛、水牛和奶牛。2月齡至2歲的牛最易感染。有報(bào)道鹿也可感染，在綿羊、山羊、羚羊以及豬體內(nèi)可檢出該病毒的抗體。在實(shí)驗(yàn)條件下可感染綿羊、山羊、豬及兔，但并不引起發(fā)病，可從豬體內(nèi)分離出病毒。BVDV可引起病毒性腹瀉和黏膜病兩種癥狀。黏膜病主要侵害6～18月齡的犢牛，潛伏期為7～9d，發(fā)病突然。病牛體溫上升到40～42℃，食欲喪失，沉郁，并有漿液性鼻液，白細(xì)胞減少。2～3d后，黏膜上出現(xiàn)淺表性潰瘍斑，病牛大量流涎，呼吸有惡臭，在口腔出現(xiàn)病變后迅速發(fā)生腹瀉，最初呈水樣，病后期含血液和黏液，并伴隨排出成片的腸黏膜。病程約幾天，也可能遷延至1個(gè)月左右。發(fā)病率為2%～50%，犢牛中的死亡率可達(dá)90%，也常見非顯性感染。病毒性腹瀉具有高度傳染性，癥狀和病變較輕，發(fā)病率高而死亡率低。孕?；疾《拘愿篂a病時(shí)，可能發(fā)生流產(chǎn)，但流產(chǎn)胎兒常無特異性病變，懷孕100～200 d發(fā)生感染的牛，經(jīng)常產(chǎn)出腦發(fā)育不全的犢牛。常見的病變主要出現(xiàn)在消化系統(tǒng)，整個(gè)消化道充血、出血、水腫，并有糜爛和潰瘍；腸管淋巴結(jié)腫大和潰瘍；心肌損害嚴(yán)重，特別是沿冠狀溝處及心室內(nèi)膜上常有出血斑，鼻孔、唇和頰腔黏膜充血，鼻鏡、口腔（有時(shí)在食管）內(nèi)有潰瘍。

3 致病機(jī)理

BVDV急性感染多為N-CPE型BVDV。急性或持續(xù)感染的牛是病毒的主要宿主。病毒入侵牛的上呼吸道和消化道后，在鼻、鼻竇、口、咽、喉、皺胃和腸黏膜的上皮細(xì)胞復(fù)制和聚集，然后進(jìn)入血液，引起病毒血癥。經(jīng)心淋巴管和血液進(jìn)入淋巴組織，在淋巴結(jié)、脾和集合淋巴小結(jié)增殖，發(fā)生綜合性白細(xì)胞減少癥。病毒在黏膜上皮內(nèi)增殖，使其變性壞死，引起黏膜糜爛。急性感染后，臨床癥狀較溫和，通常表現(xiàn)出低燒、腹瀉和白細(xì)胞減少癥，一般與BVDV急性感染造成的免疫系統(tǒng)紊亂，其他病原造成的繼發(fā)感染有關(guān)。

BVDV可通過胎盤感染子宮內(nèi)胎兒，故急性感染對(duì)妊娠牛的影響很大。妊娠早期的感染可導(dǎo)致胎兒死亡、流產(chǎn)、先天性畸形及胎兒的持續(xù)性BVDV感染等。妊娠后期的感染，新生犢牛通常無癥狀，但體內(nèi)常排出病毒或有較高水平的抗體。妊娠母牛在懷孕早期感染N-CPE型BVDV，會(huì)引起新生犢牛的持續(xù)性感染，當(dāng)持續(xù)性感染的動(dòng)物再次感染抗原性相似的CPE型BVDV時(shí)，就會(huì)發(fā)生致死性的黏膜?。∕D）。

4 流行現(xiàn)狀

BVDV最早于1953年發(fā)生在美國，現(xiàn)在已經(jīng)遍布于世界各國。自1980年李佑民[1]首次報(bào)道BVDV在中國存在以來，許多學(xué)者就該病在中國不同省份的流行狀況進(jìn)行了大規(guī)模的調(diào)查，目前新疆、內(nèi)蒙古、陜西、四川、甘肅、寧夏、青海、河南、安徽、江蘇、廣西、河北、福建、黑龍江、吉林、遼寧、浙江、湖南、江西、上海和重慶等20多個(gè)省市區(qū)均有本病的發(fā)生。

BVDV感染的宿主譜較廣，除牛之外還能感染羊、鹿、豬及許多野生動(dòng)物。一般情況下豬感染BVDV不表現(xiàn)BVD的典型癥狀而呈現(xiàn)亞臨床感染，其癥狀和病理變化類似于溫和型豬瘟。2008年宋永峰等[9]利用PCR方法對(duì)來自浙江、安徽、湖南、江西、廣西、遼寧等省的43份豬病料進(jìn)行了檢測(cè)，結(jié)果陽性檢測(cè)率為16.3%，序列分析發(fā)現(xiàn)該分離株均為BVDV-1，可見該病毒在豬群內(nèi)已經(jīng)廣泛存在。在生產(chǎn)豬瘟疫苗時(shí)禁止檢測(cè)出該病毒。2000年邱昌慶等[11]用微量細(xì)胞中和試驗(yàn)對(duì)安徽省、江蘇省和廣西省部分水牛群的血清樣品進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果檢出BVDV抗體平均陽性率分別為24.2%、8.4%和10.0%，說明BVDV在中國水牛群中流行的地域分布較廣。

5 防治措施

歐美國家已經(jīng)制定并實(shí)施了控制和根除BVDV的計(jì)劃，主要采用疫苗接種、加強(qiáng)監(jiān)測(cè)、淘汰持續(xù)感染動(dòng)物和免疫耐受動(dòng)物等綜合措施。目前，我國對(duì)BVDV危害的重視程度不足，也沒有系統(tǒng)開展全國范圍的BVDV分子流行病學(xué)調(diào)查，對(duì)BVDV流行規(guī)律和主要基因型或基因亞型還不清楚，導(dǎo)致沒有行之有效的BVDV疫苗投入畜牧業(yè)生產(chǎn)，最終致使該病在我國的流行呈擴(kuò)大趨勢(shì)。

針對(duì)我國現(xiàn)階段BVDV的防控國情，筆者提出以下建議：

（1）在規(guī)?；B(yǎng)殖場(chǎng)和優(yōu)良品種繁育基地，開展BVDV分子流行病學(xué)調(diào)查，全面掌握疫病的流行規(guī)律，分析病毒株的基因型和生物型，建立系統(tǒng)的病毒遺傳譜系，分析和研究各毒株的致病性及其危害。在此基礎(chǔ)上，篩選出疫苗毒株，研制安全高效的疫苗，盡快投入到畜牧業(yè)生產(chǎn)中。

（2）由于BVDV基因存在區(qū)域差異性，為避免外來BVDV的感染威脅，我國必須加強(qiáng)進(jìn)出口動(dòng)物檢疫，對(duì)進(jìn)口的牛、羊、兔等胚胎、凍精、種畜、肉制品、生物制品、奶制品及皮毛等都要進(jìn)行嚴(yán)格的檢疫。加強(qiáng)國內(nèi)獸用生物制品BVDV污染監(jiān)測(cè)，實(shí)施優(yōu)良品種繁育基地內(nèi)畜群的BVDV凈化工作，對(duì)購買的動(dòng)物或生物制品實(shí)行嚴(yán)格的追溯管理，嚴(yán)格控制BVDV的外來傳播渠道。

（3）建立、健全并完善BVDV檢測(cè)體系，尤其要建立針對(duì)畜群BVDV持續(xù)性感染的定期監(jiān)測(cè)制度。對(duì)BVDV流行區(qū)域及畜群進(jìn)行有針對(duì)性的疫苗接種，務(wù)必建立并實(shí)施嚴(yán)格的飼養(yǎng)管理及獸醫(yī)防疫制度。

（4）根據(jù)我國BVDV的流行特點(diǎn)，設(shè)立國家級(jí)和區(qū)域性BVDV參考實(shí)驗(yàn)室或者專家咨詢委員會(huì)，為牛病毒性腹瀉的防控提供專業(yè)咨詢與服務(wù)。

[1] 李佑民，劉振潤(rùn)，武銀蓮，等.牛病毒性腹瀉-黏膜病病毒株（長(zhǎng)春184）的分離和鑒定[J].中國人民解放軍獸醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)，1983，3（2）：113-121.

[2] 孔德繁，陸承平.牛病毒性腹瀉-黏膜病的最新研究進(jìn)展[J].福建畜牧獸醫(yī)，2005（3）：9-13.

[3] 任曙光，高振同，趙月蘭，等.牛病毒性腹瀉-黏膜病病例[J].中國獸醫(yī)雜志，2006，42（12）：59.

[4] 王治才，劉祟向，趙澤森，等.牛腹瀉病病毒感染羔羊的調(diào)查[J].中國畜禽傳染病，1992（3）：41-42.

[5] 張寧，秦建華，趙博偉.牛病毒性腹瀉-黏膜病診斷方法研究進(jìn)展[J].動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2008，29（2）：93-97.

[6] 王麗榮，董永軍，梁美蘭.牛病毒性腹瀉病毒的病原學(xué)與診治[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2005，33（12）：2348-2349.

[7] 賈玉堂，湯繼順，李立冰.牛病毒性腹瀉的發(fā)病機(jī)理與診治[J].畜牧與飼料科學(xué)，2009，30（2）：187-188.

[8] 王新平，涂長(zhǎng)春，李紅衛(wèi)，等.從疑似豬瘟病料中檢出牛病毒性腹瀉病毒[J].中國獸醫(yī)學(xué)報(bào)，1996，16（4）：341-345.

[9] 宋永峰，張志，張燕霞，等.豬源牛病毒性腹瀉病毒的流行初探[J].中國動(dòng)物檢疫，2008，25（7）：25-27.

[10]朱禮倩，周艷君，于海，等.牛病毒性腹瀉在中國的流行現(xiàn)狀分析[J].中國動(dòng)物傳染病學(xué)報(bào)，2011，19（5）：83-86.

[11]邱昌慶，郭慧琛，程淑敏，等.安徽、江蘇、廣西部分地區(qū)水牛牛病毒性腹瀉-黏膜病血清學(xué)監(jiān)測(cè)[J].中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2000，22（6）：453-454.

[12]郝寶成，梁劍平，王學(xué)紅，等.牛病毒性腹瀉病研究進(jìn)展及防控建議[J].中國奶牛，2012（2）：45-48.