埃博拉病毒感染豬的研究進展

史子學(xué)，趙曉明，丁曉東，朱冬冬，曹傳閨，張國平

（1.上海市嘉定區(qū)農(nóng)業(yè)委員會，上海 201800；2.上海市嘉定區(qū)動物疫病預(yù)防控制中心，上海 201800；3.廣東省汕尾市畜牧獸醫(yī)局，廣東 汕尾 516600）

埃博拉出血熱（ebola hemorrhagic fever， EHF）1976年首次發(fā)生于埃博拉河流域的剛果民主共和國（前扎伊爾），因其引起感染者全身出血癥狀，故命名為埃博拉出血熱。埃博拉的病原埃博拉病毒屬于絲狀病毒科（Filoviridae）絲狀病毒屬（Filovirus）成員，是非分節(jié)段的單股負(fù)鏈RNA病毒。目前已鑒定的埃博拉病毒有扎伊爾、蘇丹、科特迪瓦、本迪布焦和萊斯頓5種基因型。除萊斯頓埃博拉病毒對人呈無癥狀感染外，其余4個型病毒都對人有致死性，其中扎伊爾埃博拉病毒對人致死率達到90%，國際上把埃博拉列為生物安全第4級病毒，而炭疽、H5N1也只是列為生物安全第3級病毒[1]。雖然我國尚無發(fā)現(xiàn)任何基因型的埃博拉病毒，但對外交往的擴大發(fā)展面臨著埃博拉傳入的威脅；而且國外最近研究發(fā)現(xiàn)2種基因型的埃博拉病毒都能感染豬，并在豬之間傳播。面對這潛在的風(fēng)險，如何做好埃博拉外來病的防控及保護國內(nèi)養(yǎng)豬業(yè)健康發(fā)展，值得我們重點關(guān)注。

1 感染豬的埃博拉病毒基因型

1.1 萊斯頓埃博拉病毒

萊斯頓埃博拉病毒是唯一非洲之外發(fā)現(xiàn)的埃博拉病毒[2]。1989—1996年間美國弗吉尼亞、德克薩斯、賓夕法尼亞從菲律賓進口用于醫(yī)學(xué)研究的食蟹猴暴發(fā)埃博拉，分離到的毒株命名為萊斯頓埃博拉病毒。疫情致1 000只猴子死亡或被實行安樂死，隨后進一步檢測發(fā)現(xiàn)菲律賓動物出口部門21位接觸過這些動物及4名雇傭工人都呈病毒抗體陽性，表明他們曾感染過該病毒。溯源研究表明這些感染病毒的食蟹猴都來源于菲律賓卡蘭巴一個養(yǎng)殖場，1997年關(guān)閉該場后一直未有萊斯頓埃博拉病毒感染病例報道，因而當(dāng)時認(rèn)為僅非人靈長類動物是萊斯頓埃博拉病毒的易感動物。但是，2008年菲律賓農(nóng)業(yè)部請美國農(nóng)業(yè)部外來動物疫病診斷實驗室?guī)椭鷻z測一些疑似豬高致病性藍耳病臨床樣品過程中，不但確診豬感染了藍耳病、圓環(huán)病毒2型，一些樣品檢測到萊斯頓埃博拉病毒L基因，后經(jīng)亞特蘭大美國疾病控制與預(yù)防中心（Centers for Disease Control and Prevention，CDC） 確診存在埃博拉病毒核酸。隨后從菲律賓的這幾個豬場也都分離到了病毒，豬場工人中存在萊斯頓埃博拉病毒抗體，表明他們受到豬的傳染。雖然萊斯頓埃博拉能引起食蟹猴發(fā)病和死亡，還沒有人感染致發(fā)病的報道，但病毒可從豬傳播到人的途徑是確定的[3]。

1.2 扎伊爾埃博拉病毒

扎伊爾埃博拉病毒感染豬的數(shù)據(jù)來源于人工感染實驗[4]，結(jié)果表明高致病性扎伊爾埃博拉病毒能引起豬發(fā)熱、呼吸困難、腹式呼吸，食欲不振和嗜睡，病毒能在豬群間發(fā)生同群感染。

2 埃博拉病毒對豬的致病性

2.1 萊斯頓埃博拉病毒對豬的致病性

2.1.1 臨床癥狀

2008年菲律賓發(fā)生的豬感染萊斯頓埃博拉存在共感染高致病性藍耳病，所以難以確定萊斯頓埃博拉病毒感染豬的臨床癥狀。后經(jīng)人工感染豬實驗證明[5]，萊斯頓埃博拉病毒感染的豬無明顯臨床癥狀；病毒靶向豬呼吸系統(tǒng)，能在豬肺臟組織中復(fù)制；被感染豬能從鼻咽排毒。

2.1.2 病理變化

萊斯頓埃博拉病毒感染豬肺臟病理變化不嚴(yán)重；血液中檢測不到病毒。病毒感染豬10 d后IgG抗體轉(zhuǎn)陽。

2.1.3 病毒在豬體內(nèi)分布

在豬肺臟、脾臟、扁桃體、細支氣管、頜下淋巴結(jié)和鼻甲都能檢測到萊斯頓埃博拉病毒粒子和基因，心臟、腎臟和腸道中病毒含量較低，骨骼肌中也能檢測到病毒RNA。

2.2 扎伊爾埃博拉病毒對豬的致病性

2.2.1 臨床癥狀

豬自然感染非洲源埃博拉病毒未見報道，然而人工感染實驗表明扎伊爾埃博拉病毒比萊斯頓埃博拉病毒對豬致病性強。家豬（長白）口鼻或皮下接種1x106PFU 扎伊爾埃博拉病毒，能導(dǎo)致嚴(yán)重呼吸困難而不得不采取安樂死。實驗豬的臨床癥狀與周齡相關(guān)，當(dāng)4周齡豬接種病毒后表現(xiàn)輕微至中等程度臨床癥狀，而6周齡豬發(fā)展為嚴(yán)重的呼吸困難癥狀，產(chǎn)生癥狀差別的原因還需進一步研究。將健康豬與感染豬同舍飼養(yǎng)能引起感染，而且將食蟹猴與感染豬同舍飼養(yǎng)也會被感染。豬感染后5～7 d首次檢測到IgM抗體，中和抗體在感染14 d左右才能檢測到。

2.2.2 病理變化

扎伊爾埃博拉病毒感染豬肺部實變，肺相關(guān)淋巴結(jié)腫大、有時出血。組織病理學(xué)病變包括肺泡出血、纖維蛋白滲出、肺泡巨噬細胞和中性粒細胞滲出及炎性細胞浸潤肺泡壁增厚。免疫組化可見細支氣管內(nèi)肺泡上皮細胞、內(nèi)皮細胞、巨噬細胞聚集。與扎伊爾埃博拉病毒感染獼猴或萊斯頓埃博拉病毒感染豬后肺泡無免疫細胞浸潤相比，扎伊爾埃博拉病毒感染6周齡豬肺泡中大量中性粒細胞和淋巴細胞滲出，感染后5～7 d達到高峰。其他變化還包括外周血單核細胞/樹突狀細胞及外周血B細胞比例下降。

2.2.3 病毒在豬體內(nèi)分布

扎伊爾埃博拉病毒感染豬后呼吸系統(tǒng)組織中病毒滴度最高達107TCID50，鼻咽排毒持續(xù)到感染后14 d。機體內(nèi)病毒分布規(guī)律類似萊斯頓埃博拉病毒，只是骨骼肌中未檢測到病毒RNA。

3 豬源埃博拉病毒溯源

3.1 萊斯頓埃博拉病毒的自然宿主

對獲得的萊斯頓埃博拉病毒分離株全基因組測序，各分離株間基因差異4%左右。豬源分離株間基因差異表明毒株可能來源于不同的傳染源或病毒已在豬群中流行多年。研究表明[6]蝙蝠在非洲是絲狀病毒的貯存宿主，菲律賓被感染豬場附近森林中果蝠存在萊斯頓埃博拉病毒抗體陽性個體，果蝠是否是其自然貯存宿主還需病毒分離等數(shù)據(jù)支持。

3.2 扎伊爾埃博拉病毒的自然宿主

已確定果蝠是扎伊爾埃博拉病毒的自然貯存宿主[7]，3個種類果蝠(hypsi gnathusmonstrosus，epomopsfranqueti，myonycteristorquata）體內(nèi)同時檢測到扎伊爾埃博拉病毒基因組和抗體，這3種果蝠可以隱性帶毒；其他至少還有4個種類果蝠（epomophorusgambianus，nanonycterisveldkampii，epomopsbuettikoferi，eidolon helvum）血清中檢測到扎伊爾埃博拉病毒抗體。其他蝙蝠品種是否攜帶病毒或抗體陽性還需更多的調(diào)查。

3.3 埃博拉病毒感染豬的可能途徑

豬是絲狀病毒最新發(fā)現(xiàn)的哺乳動物宿主[8]，埃博拉病毒在蝙蝠、非人靈長類和豬之間的傳播途徑還有很多未知問題，埃博拉（萊斯頓型）病毒自然貯存宿主還不完全確定。已證明埃博拉病毒可以通過氣溶膠傳播，盡快調(diào)查清楚埃博拉病毒自然界貯存宿主、易感動物種類及對養(yǎng)豬業(yè)的風(fēng)險評估是一項重要工作。

4 我國防控埃博拉從中獲得的啟示

做好埃博拉病毒易感動物流行病學(xué)調(diào)查工作。雖然目前發(fā)現(xiàn)的埃博拉病例局限于赤道非洲地區(qū)或菲律賓，但是蝙蝠作為現(xiàn)有的基因型埃博拉病毒的自然宿主，其大量群居、遷徙特性等生態(tài)特點增加了埃博拉流行病學(xué)復(fù)雜性[9]。有報道指出一些種類的果蝠遷徙距離超過2500km，所以埃博拉病毒經(jīng)國外蝙蝠遷徙擴散到我國豬群的風(fēng)險不容忽視。開展我國邊境地區(qū)家畜和蝙蝠等埃博拉病毒流行病學(xué)調(diào)查為科學(xué)制定埃博拉傳入我國風(fēng)險評估分析提供技術(shù)支撐。

做好埃博拉病毒防控的技術(shù)儲備研究。埃博拉一旦傳入我國，僅對養(yǎng)豬業(yè)的危害不低于高致病性藍耳病等烈性傳染病，再加上埃博拉病毒人畜共患帶來的公共衛(wèi)生安全問題，影響難以想象。為此我們獸醫(yī)主管部門應(yīng)聯(lián)合衛(wèi)生部門加緊進行埃博拉診斷技術(shù)研究、疫苗研究并制定相應(yīng)的防控技術(shù)規(guī)范，做好埃博拉傳入我國的應(yīng)急預(yù)案，以充分的準(zhǔn)備應(yīng)對潛在的疫病威脅。

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