經(jīng)合組織14號專著有關(guān)體外研究的GLP的實(shí)施應(yīng)用原則概述

張 燕（譯） 黎 歌

（新疆維吾爾自治區(qū)實(shí)驗(yàn)動物研究中心，新疆烏魯木齊 830002）

1 前言

經(jīng)濟(jì)合作與發(fā)展組織（OECD）規(guī)范了良好實(shí)驗(yàn)室規(guī)范（GLP）以用于確定化學(xué)品和化工產(chǎn)品的安全及測試數(shù)據(jù)的質(zhì)量和有效性。14號原則闡述了1978年專家小組提出按質(zhì)量體系覆蓋測試設(shè)備（TF）應(yīng)用的組織過程和條件，在實(shí)驗(yàn)室研究計劃執(zhí)行、監(jiān)控記錄和報告的GLP。1981年以來經(jīng)合組織已經(jīng)起草有關(guān)GLP原則的標(biāo)準(zhǔn)。其中包括咨詢文檔“體外研究GLP原則的應(yīng)用程序”。在經(jīng)合組織咨詢文檔中，已經(jīng)明確解釋和解決一系列的驗(yàn)證中心的替代方法（備選方案）及變分方法（ICVAM）。其主要目標(biāo)是對備選方案的評估，促進(jìn)科學(xué)和監(jiān)管驗(yàn)收，替代生物科學(xué)方法，改進(jìn)和更換實(shí)驗(yàn)室合理的使用動物。

經(jīng)濟(jì)合作與發(fā)展組織（OECD）GLP要求的原則中包括國家當(dāng)局評估TFs（測試設(shè)備）提交進(jìn)行研究的化學(xué)物質(zhì)和對人與環(huán)境的保護(hù)。最初，主要編寫動物性毒理學(xué)研究。然而，近年來越來越多的使用體外方法作為替代或補(bǔ)充體內(nèi)的安全測試。這種方法是為了更好地評估化學(xué)物質(zhì)的毒性作用。體外方法主要應(yīng)用領(lǐng)域是遺傳毒性測試，在很大程度上風(fēng)險評估的數(shù)據(jù)來自研究使用體外測試系統(tǒng)。毫無疑問，應(yīng)用毒理基因組學(xué)、毒理蛋白質(zhì)組學(xué)、毒理學(xué)基礎(chǔ)和各種篩查技術(shù)將提高體外方法的測試安全。例如著名的體外測試艾姆斯測試（細(xì)菌突變測試）、小鼠淋巴瘤試驗(yàn)（哺乳動物細(xì)胞突變測試）和染色體畸變測試。幾乎所有的誘變劑都在體外基因毒性測試中起到積極的作用。然而，動物的許多物質(zhì)在體外研究中有活性但基因毒性效應(yīng)弱。

在經(jīng)合組織GLP原則的概念涉及4個重要方面：贊助商（保證人、法人）、監(jiān)管局（RA）、監(jiān)控權(quán)威及TFs（測試設(shè)備）。因此，對體外研究人員而言，GLP是非常重要的標(biāo)準(zhǔn)原則，為應(yīng)用程序組織、管理和解釋提供指導(dǎo)。

2 經(jīng)合組織GLP原則的范圍

經(jīng)合組織GLP原則應(yīng)該被應(yīng)用于醫(yī)藥產(chǎn)品、農(nóng)藥產(chǎn)品、化妝品、獸藥等食品添加劑、飼料添加劑和工業(yè)化學(xué)品等非臨床安全性實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目。這些原則適用于醫(yī)藥、農(nóng)藥、食品和飼料添加劑、美容產(chǎn)品、獸藥產(chǎn)品、工業(yè)的監(jiān)管化學(xué)物質(zhì)及類似產(chǎn)品以獲得注冊或許可證的實(shí)驗(yàn)。測試項(xiàng)目的目的是獲得屬性數(shù)據(jù)或他們對人類健康或環(huán)境的影響。這些測試項(xiàng)目經(jīng)常是合成化學(xué)物質(zhì)，但也可能是自然或生物起源的某些生物體。

OECD理事會的決定，在測試的化學(xué)物質(zhì)時，OECD成員國家按照OECD測試指南和OECD良好實(shí)驗(yàn)室規(guī)范的原則有關(guān)評估化學(xué)物質(zhì)的數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)得出的結(jié)論，其他成員國應(yīng)當(dāng)互相接受。因此，它們要求體外毒理學(xué)研究必須符合OECD驗(yàn)證原則和GLP以方便其他OECD成員國的驗(yàn)收。然而，一些國家通過立法，使這個范圍擴(kuò)展到其他產(chǎn)品（如醫(yī)療設(shè)備）或類型的測試（如生物利用度、臨床試驗(yàn)），可以使得監(jiān)測系統(tǒng)平衡失調(diào)的和創(chuàng)造貿(mào)易壁壘。因此，建議贊助商和TF在研究初始就按照全國GLP MAs操作。相同的測試設(shè)備在監(jiān)管或非監(jiān)管研究均可執(zhí)行，但必須以提交給RA科學(xué)評估為前提。

3 責(zé)任

在1981年發(fā)行出版的經(jīng)合組織GLP原則單點(diǎn)研究意味著組織和所有的實(shí)驗(yàn)工作研究的問題只有一個定位。在這樣的研究中都是重要的角色和責(zé)任被定義為法人、實(shí)驗(yàn)機(jī)構(gòu)管理者、項(xiàng)目負(fù)責(zé)人、質(zhì)量負(fù)責(zé)人和檔案管理員。這些人員均應(yīng)由實(shí)驗(yàn)機(jī)構(gòu)管理者指定，并向管理者遞交報告。

過去10年，越來越多的研究在不同階段委托于不同的地址進(jìn)行。他們被定義為多站點(diǎn)研究。這樣的研究其組織和管理必須保證有非常復(fù)雜的和明確的通信線路以確保完整的研究。在研究中，多站點(diǎn)研究只有一個項(xiàng)目負(fù)責(zé)人SD，一項(xiàng)研究計劃和最后一個研究報告。在多站點(diǎn)的研究中，SD的負(fù)責(zé)人溝通是非常重要的，確保研究開始之前一個主體，委托執(zhí)行階段和科學(xué)的限定均按經(jīng)合組織的應(yīng)用原則處理。

體外研究的另一個關(guān)鍵方面是確保在不同階段獲得合適的區(qū)域，設(shè)備和材料等最好的條件。還需要確保避免測試系統(tǒng)的污染。供應(yīng)商交付的材料應(yīng)滿足實(shí)驗(yàn)設(shè)計的要求。建議出具指定材料特點(diǎn)的證書。即使供應(yīng)商保證質(zhì)量的材料和產(chǎn)品，仍然要進(jìn)行必要的檢查，評估驗(yàn)證供應(yīng)商實(shí)現(xiàn)他們的規(guī)范、實(shí)踐、程序和政策。

多站點(diǎn)的體外研究實(shí)驗(yàn)是委托實(shí)驗(yàn)，SD、PI（s）、QA和研究人員應(yīng)該研究之前溝通好。這同樣適用于責(zé)任有關(guān)的性能實(shí)驗(yàn)。制定和記錄會議記錄或?qū)W習(xí)計劃。經(jīng)合組織GLP原則也適用于體外研究。SD在單站點(diǎn)的研究以及在多站點(diǎn)研究功能一致。測試方法應(yīng)通過驗(yàn)證或在結(jié)構(gòu)上、功能上和或條理類證明使用類似于參考測試方法。測試系統(tǒng)的第2個重要的問題是它的鑒定。如果有必要，應(yīng)可追溯。檢查員應(yīng)驗(yàn)證SD可以確保這些材料的性能和包裝符合規(guī)范，滿足實(shí)驗(yàn)設(shè)計的需求。SD應(yīng)該能夠提供完整的和可接受性的質(zhì)量控制文件，用以對供應(yīng)商進(jìn)行檢查和批判性評估。GLP檢查員還應(yīng)該驗(yàn)證SD制定的研究計劃、修改學(xué)習(xí)計劃和最終報告的簽署和日期確定。PI是必須監(jiān)察，及監(jiān)察每個偏差是否及時解決。

[1]Hedwig Beernaert，Anne-Marie Vanherle and Sophie Bertrand.Critical aspects in implementing the OECD monograph No. 14“The application of the principles of GLP to in vitro studies”[J]. Ann Ist Super Sanità，2008，44（4）：348-356.