羅氏Cobas8000 c701全自動(dòng)生化分析儀模塊性能驗(yàn)證

馮 磊，徐文波，張大蓮，張興鋒，代艷娟，毛星星，羅曼玲

(玉溪市人民醫(yī)院 檢驗(yàn)科，云南玉溪653100)

羅氏Cobas8000 c701全自動(dòng)生化分析儀模塊性能驗(yàn)證

馮 磊，徐文波，張大蓮，張興鋒，代艷娟，毛星星，羅曼玲

(玉溪市人民醫(yī)院 檢驗(yàn)科，云南玉溪653100)

目的：對(duì)羅氏Cobas8000 c701全自動(dòng)生化分析儀模塊進(jìn)行儀器性能驗(yàn)證。方法：依照YY/T 0654-2008標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)雜散光、吸光度線性范圍、吸光度準(zhǔn)確性、吸光度穩(wěn)定性、吸光度重復(fù)性、吸光度零點(diǎn)漂移、樣品針攜帶污染率、加樣系統(tǒng)準(zhǔn)確性與重復(fù)性、孵育池溫度準(zhǔn)確性及波動(dòng)、臨床項(xiàng)目的批內(nèi)精密度、試劑倉(cāng)溫度共計(jì)十一項(xiàng)性能進(jìn)行驗(yàn)證。結(jié)果：羅氏Cobas8000 c701全自動(dòng)生化分析儀模塊各項(xiàng)性能指標(biāo)與YY/T 0654-2008標(biāo)準(zhǔn)及廠商規(guī)定的分析性能基本一致,符合質(zhì)量目標(biāo)要求。結(jié)論：驗(yàn)證方案可操作性和實(shí)用性強(qiáng)，除可用于實(shí)驗(yàn)室管理機(jī)構(gòu)的相關(guān)認(rèn)證及認(rèn)可工作，還可為儀器故障的診斷及處理提供依據(jù)。

全自動(dòng)生化分析儀；性能驗(yàn)證；質(zhì)量

為配合實(shí)驗(yàn)室ISO15189質(zhì)量體系建設(shè)，同時(shí)也為了驗(yàn)證新購(gòu)入羅氏Cobas8000 c701全自動(dòng)生化分析儀模塊是否滿足國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局2008年頒布的中華人民共和國(guó)醫(yī)藥行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)(YY/T 0654-2008)中關(guān)于全自動(dòng)生化分析儀的性能要求，于2013年11月8日與羅氏診斷產(chǎn)品(上海)有限公司工程師共同對(duì)實(shí)驗(yàn)室羅氏Cobas8000 c701全自動(dòng)生化分析儀模塊按照YY/T 0654-2008標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行儀器性能驗(yàn)證。

1 材料和方法

1.1 儀器設(shè)備

德國(guó)羅氏診斷公司生產(chǎn)Cobas8000 c701全自動(dòng)生化分析儀模塊、經(jīng)過標(biāo)定的溫度計(jì)及加樣器各一支。

1.2 試劑

1.2.1 羅氏原裝ALT、Urea、TP試劑、校準(zhǔn)品cfas 、PCCC1質(zhì)控品(批號(hào)：168331)、PCCC2質(zhì)控品(批號(hào)：168411)、羅氏原裝配套離子補(bǔ)償液、羅氏原裝配套check試劑。

1.2.2 其他試劑：50g/L亞硝酸鈉溶液一套、國(guó)家一級(jí)線性標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(C1-C5共5個(gè)濃度)一套、吸光度值為5000±5%的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)溶液(準(zhǔn)物質(zhì)1)和吸光度值為10000±5%的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)溶液(準(zhǔn)物質(zhì)2)各一套、色素溶液Orange G原液一瓶。以上試劑購(gòu)自中國(guó)計(jì)量科學(xué)院北京分院，均為安培包裝一次性使用現(xiàn)成商品試劑。加樣系統(tǒng)準(zhǔn)確性與重復(fù)性檢定所用sample solution(特定吸光度的Orange G)與Instrument check試劑有羅氏公司提供。

1.3 方法

性能驗(yàn)證檢測(cè)工作開始前需更換新的比色杯及光源燈，檢測(cè)工作環(huán)境溫度(15～32℃)、相對(duì)濕度(45%～85% RH)、水質(zhì)(<1 μS/cm)、電壓(220V)達(dá)標(biāo)， UPS工作正常，確保孵育池已執(zhí)行換水，且溫度已達(dá)到37℃，光源燈已穩(wěn)定30min以上，并確認(rèn)儀器設(shè)備各組成機(jī)構(gòu)工作正常。

(1)雜散光檢測(cè)。以蒸餾水為參比，340nm波長(zhǎng)測(cè)50g/L亞硝酸鈉溶液吸光度，要求吸光度不小于23000。

(2)吸光度線性范圍檢測(cè)。測(cè)定505nm波長(zhǎng)處線性范圍。以國(guó)家一級(jí)線性標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)C1-C5為色素液分別在各模塊上測(cè)定吸光度，D模塊應(yīng)測(cè)定內(nèi)圈和外圈，每個(gè)濃度測(cè)定5次，計(jì)算算術(shù)平均數(shù)及線性相關(guān)系數(shù)，要求相關(guān)系數(shù)大于0.995。

(3)吸光度準(zhǔn)確性檢測(cè)。以蒸餾水為參比，340nm波長(zhǎng)分別測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)1和標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)2溶液吸光度，重復(fù)5次，計(jì)算算術(shù)平均數(shù)與標(biāo)準(zhǔn)值之差，要求標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)1和標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)2溶液吸光度的允許誤差分別為±250 、±700，即4870±250、9750±700。

(4)吸光度穩(wěn)定性檢測(cè)。340nm波長(zhǎng)測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)1，10min內(nèi)連續(xù)測(cè)定20個(gè)讀數(shù)，測(cè)定間隔為儀器讀數(shù)間隔，要求最大值與最小值之差小于100。

(5)吸光度重復(fù)性檢測(cè)。340nm波長(zhǎng)測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)2，10min內(nèi)連續(xù)測(cè)定20個(gè)讀數(shù)，測(cè)定間隔為儀器讀數(shù)間隔，最小反應(yīng)體積為180μL，計(jì)算20個(gè)測(cè)定值的CV，要求CV<1.5%。

(6)吸光度零點(diǎn)漂移檢測(cè)。執(zhí)行Cell Blank后，檢查后續(xù)比色杯和第一個(gè)比色杯的吸光度值，最大差值不大于±800。

(7)樣品針攜帶污染率檢測(cè)。以蒸餾水為試劑，色素溶液Orange G原液與蒸餾水為樣品，反應(yīng)體積為儀器規(guī)定最大(380μL)，按照原液、原液、原液、蒸餾水、蒸餾水、蒸餾水的順序?yàn)橐唤M，測(cè)定吸光度，共測(cè)定5組。要求攜帶污染率不大于0.5%。攜帶污染率計(jì)算公式如下：

其中，Vs：樣品加入量，Vr：試劑加入量。

(8)加樣系統(tǒng)準(zhǔn)確性與重復(fù)性檢測(cè)。運(yùn)用羅氏公司提供的專用程序Instrument Check，對(duì)樣品針A/B、試劑針A/B加樣的準(zhǔn)確性及重復(fù)性進(jìn)行檢定，采用sample solution與蒸餾水為樣本，instrument check為試劑，進(jìn)行Instrument Check 檢測(cè)。其中每根加樣系統(tǒng)針加樣21次，拋棄第一次結(jié)果計(jì)算后20次吸光度值的均值、SD及CV。要求樣品針、試劑1針和試劑2針吸光度均值位于儀器規(guī)定范圍內(nèi)，即：278～326、694～767、351～387，CV值應(yīng)分別小于1.5%、0.5%、1%。

(9)孵育池溫度準(zhǔn)確性及波動(dòng)檢測(cè)。將經(jīng)過標(biāo)定的精度為0.1℃的溫度檢測(cè)儀探頭放入孵育池中，在溫度顯示穩(wěn)定后，每隔30s測(cè)溫一次，檢測(cè)10min。要求溫度值在37±0.3℃內(nèi)，波動(dòng)度不大于±0.2℃。

(10)試劑倉(cāng)溫度檢測(cè)。將經(jīng)過標(biāo)定的精度為0.1℃的溫度檢測(cè)儀探頭放入試劑倉(cāng)中，在溫度顯示穩(wěn)定后，每隔1min測(cè)溫一次，檢測(cè)10min。要求溫度值在4～15±0.3℃內(nèi)，波動(dòng)度不大于±0.2℃。

(11)臨床項(xiàng)目批內(nèi)精密度檢測(cè)。使用羅氏配套試劑、校準(zhǔn)品及相應(yīng)測(cè)定程序，定標(biāo)通過后以PCCC1、PCCC2為標(biāo)本重復(fù)進(jìn)行20次測(cè)定，測(cè)定項(xiàng)目為ALT、Urea、TP，計(jì)算CV值，要求ALT、Urea、TP三個(gè)項(xiàng)目CV值應(yīng)分別≤5%、≤2.5%、≤2.5%。

(12)電解質(zhì)項(xiàng)目精密度檢測(cè)。使用電解質(zhì)配套試劑、校準(zhǔn)品及相應(yīng)測(cè)定程序，定標(biāo)通過后對(duì)PCCC1、PCCC2分別進(jìn)行20次重復(fù)測(cè)定，計(jì)算均值及測(cè)定值與靶值的偏差，要求電解質(zhì)三個(gè)項(xiàng)目偏差均≤3.0%。

以上各檢測(cè)內(nèi)容以YY/T 0654-2008標(biāo)準(zhǔn)設(shè)計(jì)，出具的檢測(cè)報(bào)告可用于實(shí)驗(yàn)室管理機(jī)構(gòu)對(duì)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行的相關(guān)認(rèn)證及認(rèn)可工作(如ISO15189和CAP認(rèn)證等)。

2 結(jié)果

(1)雜散光：吸光度結(jié)果為46089，符合要求(>23000)。

(2)吸光度線性范圍：相關(guān)系數(shù)為1，符合要求(>0.9950)。

(3)吸光度準(zhǔn)確性：檢測(cè)結(jié)果見表1。均在規(guī)定范圍內(nèi)。

表1 吸光度準(zhǔn)確性檢測(cè)結(jié)果

(4)吸光度穩(wěn)定性：最大值(4790)與最小值(4762)之差為28，小于100。

(5)吸光度重復(fù)性： CV值為0.303%，小于1.5%。

(6)吸光度零點(diǎn)漂移：最大值(7820)與最小值(7710)之差為110，小于800。

(7)樣品針攜帶污染率：樣品針A和樣品針B的5次平均樣品攜帶污染率分別為0.46%、0.28%，均小于0.5%。

(8)加樣系統(tǒng)準(zhǔn)確性與重復(fù)性：檢測(cè)結(jié)果見表2。按照標(biāo)準(zhǔn)均符合要求。

表2 加樣系統(tǒng)準(zhǔn)確性與重復(fù)性檢測(cè)結(jié)果

(9)孵育池溫度準(zhǔn)確性及波動(dòng)：所有時(shí)間位點(diǎn)溫度測(cè)定值均為37.0℃，均符合規(guī)定要求。

(10)試劑倉(cāng)溫度檢測(cè)：所有時(shí)間位點(diǎn)溫度測(cè)定值均符合規(guī)定要求。

(11)臨床項(xiàng)目的批內(nèi)精密度：檢測(cè)結(jié)果見表3，ALT、TP和Urea測(cè)定結(jié)果單位分別為U/L、g/L和mmol/L。按照標(biāo)準(zhǔn)均符合要求。

表3 臨床項(xiàng)目批內(nèi)精密度檢測(cè)結(jié)果

(12)電解質(zhì)項(xiàng)目精密度檢測(cè)：結(jié)果見表4，K+、Na+、Cl-測(cè)定結(jié)果單位均為mmol/L。按照標(biāo)準(zhǔn)均符合要求。

表4 電解質(zhì)項(xiàng)目精密度檢測(cè)結(jié)果

3 討論

醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可是目前檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)界討論和關(guān)注的熱點(diǎn)?！夺t(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力的專用要求》(ISO 15189)和美國(guó)病理家學(xué)會(huì)(CAP)要求參加其認(rèn)可的實(shí)驗(yàn)室,在開展某一檢測(cè)項(xiàng)目前,需提供并保留相關(guān)的方法學(xué)驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。但在進(jìn)行檢測(cè)項(xiàng)目性能驗(yàn)證之前需了解檢測(cè)儀器的各項(xiàng)性能指標(biāo)是否達(dá)到要求，只有檢測(cè)儀器達(dá)標(biāo)了，其所檢測(cè)的項(xiàng)目才有可能達(dá)標(biāo)，也才能達(dá)到實(shí)驗(yàn)室管理的最終目標(biāo)，即：為臨床提供準(zhǔn)確可靠的檢驗(yàn)結(jié)果。但如何合理選擇、系統(tǒng)設(shè)計(jì)檢測(cè)系統(tǒng)性能驗(yàn)證方案,檢測(cè)系統(tǒng)的分析性能達(dá)到什么樣的標(biāo)準(zhǔn)才能滿足臨床要求,國(guó)內(nèi)報(bào)道甚少,是一個(gè)急需解決的現(xiàn)實(shí)問題。國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局2008年4月25日頒布2009年6月1日開始實(shí)施的中華人民共和國(guó)醫(yī)藥行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)(YY/T 0654-2008)中對(duì)全自動(dòng)生化分析儀的性能要求及驗(yàn)證方法做了全面規(guī)范，使各實(shí)驗(yàn)室有了可依照的標(biāo)準(zhǔn)，但該規(guī)范存在某些方法可操作性不強(qiáng)、某些評(píng)價(jià)內(nèi)容不全及評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)偏低的現(xiàn)象。故本實(shí)驗(yàn)室在依照該標(biāo)準(zhǔn)的同時(shí)，參考已通過ISO 15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可實(shí)驗(yàn)室的經(jīng)驗(yàn)并結(jié)合儀器實(shí)際性能,探討并制定了該套針對(duì)羅氏全自動(dòng)生化分析儀儀器性能驗(yàn)證方案，供同行參考。

該驗(yàn)證方案主要有以下幾點(diǎn)與YY/T 0654-2008稍有出入或改進(jìn)，說明如下：(1)驗(yàn)證中所用試劑如50g/L亞硝酸鈉溶液、C1-C5共5個(gè)濃度的國(guó)家一級(jí)線性標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、吸光度值為5000和10000的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)溶液、色素溶液Orange G原液等，無須自己配制，可自中國(guó)計(jì)量科學(xué)院北京分院購(gòu)買，為安培包裝一次性使用現(xiàn)成商品試劑，既保證質(zhì)量又方便使用。(2)吸光度線性范圍驗(yàn)證方法中，使用國(guó)家一級(jí)線性標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)C1-C5共5個(gè)濃度梯度的物質(zhì)為色素液，而非如標(biāo)準(zhǔn)上所說用Orange G自配11個(gè)濃度梯度色素液。同時(shí)，改用相關(guān)系數(shù)大于0.995為評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，而非標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的相對(duì)偏倚在±5%范圍內(nèi)的最大吸光度應(yīng)不小于20000。通過以上改進(jìn)，既避免了手工配制色素液時(shí)帶來的誤差，又避免了計(jì)算相對(duì)偏倚的繁瑣，使評(píng)價(jià)更加簡(jiǎn)單易行且有效。(3)在加樣系統(tǒng)準(zhǔn)確性與重復(fù)性驗(yàn)證中，本方案使用羅氏公司提供的專用試劑sample solution 和instrument check運(yùn)用專門編制的Instrument Check程序進(jìn)行驗(yàn)證，與標(biāo)準(zhǔn)所推薦的比色法在方法學(xué)上是一樣的，但避免了推薦方法中手工配制色素液的繁雜與誤差。另外，在評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)上對(duì)CV值的要求也嚴(yán)于標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的2%，對(duì)儀器的性能要求更高。(4)除了標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定項(xiàng)目外，本方案還增加了電解質(zhì)項(xiàng)目精密度檢測(cè)，對(duì)儀器各部件性能的驗(yàn)證更全面。

驗(yàn)證結(jié)果顯示本實(shí)驗(yàn)室羅氏Cobas8000 c701全自動(dòng)生化分析儀模塊各項(xiàng)性能指標(biāo)與YY/T 0654-2008標(biāo)準(zhǔn)及廠商規(guī)定的分析性能基本一致,符合質(zhì)量目標(biāo)要求。本研究選用的驗(yàn)證方案可操作性和實(shí)用性較強(qiáng)，能夠滿足ISO 15189相關(guān)要求，為全自動(dòng)生化分析儀性能驗(yàn)證提供了一套較標(biāo)準(zhǔn)的方案,對(duì)臨床實(shí)驗(yàn)室的標(biāo)準(zhǔn)化和認(rèn)可具有重要意義，可用于實(shí)驗(yàn)室管理機(jī)構(gòu)的相關(guān)認(rèn)證及認(rèn)可工作中。另外，該驗(yàn)證方案還可用于全自動(dòng)生化分析儀日常運(yùn)行情況性能檢測(cè)，如遇到原因不明的儀器故障、對(duì)儀器進(jìn)行全面維護(hù)保養(yǎng)后、對(duì)儀器主要部件進(jìn)行維修或更換后等情況，相關(guān)檢測(cè)結(jié)果可為儀器故障的診斷及處理提供依據(jù)。如雜散光檢測(cè)不達(dá)標(biāo)，提示可能存在沖洗站工作不正常、光源老化、光路臟或光度計(jì)和電路連接不良等，為故障確定提供了線索，意義顯著。

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2014-05-14

TH773

A

1002-2376(2014)09-0005-03