降糖類中藥制劑中添加化學藥品的檢測方法研究

周斌　吳萍　王元輝

【摘要】目的：對同時檢測降糖類中藥制劑中鹽酸二甲雙胍等6種化學藥品的高校液相色譜法（HPLC）進行探究。方法：色譜柱采用Hypersil BDS C18，其規(guī)格為（200mm×4.6mm，5um）；取1.4ml三乙胺加入到0.5g的庚烷磺酸鈉中，加水定容至1000ml，再用磷酸調節(jié)PH至3.5±0.05配成離子對試液；再以甲醇為流動相進行梯度洗脫，流速控制為1.0ml/min；檢測波長為233nm。結果：降糖類中藥制劑中的6種化學藥品分離良好，且在一定的進樣量范圍內呈現(xiàn)良好的現(xiàn)行。結論：本實驗采用的HPLC簡便快速，能夠對6種不同的化學藥品進行定量及定性的分析，因而，可作為降糖中藥制劑中是否添加化學藥品的鑒定方法。

【關鍵詞】降糖重要制劑；高校液相色譜法（HPLC）；化學藥品

大多數(shù)糖尿病患者認為，中藥降糖藥較為溫和且副作用小，因而大多選擇服用純中藥降糖制劑?？山陙?，不少不法商家暗自添加化學藥品以提高藥物品質，這種做法不僅嚴重違反了國家相關法律法規(guī)，還極易造成藥害事故，從而對糖尿病患者生命造成威脅[1]。因此，建立靈敏可靠的非法添加化學藥品的檢測方法顯得至關重要；本實驗利用DNA檢測器，采用高效液相色譜法，建立了降糖中藥制劑中6種常用化學藥品的檢測方法?，F(xiàn)報告如下。

試劑與儀器

試劑：格列喹酮、格列齊特、格列吡嗦、格列本脲對照品（批號分別為：100280-200301，100269-200402，100281-0001，100135-200404，且均由中國藥品生物制品檢定所提供）；鹽酸苯乙雙胍含量為99.4%，生產(chǎn)批號為：0606001，由山東科源制藥有限公司提供；鹽酸二甲雙胍由天津新新藥業(yè)集團有限公司提供，其濃度為99.1%，生產(chǎn)批號為：20040407；庚烷磺酸鈉及甲醇均為色譜純，其余試劑為分析純，水為重蒸水；樣品為市售降糖中藥制劑。

儀器設備：Agilent 1100型高效液相色譜儀；GI313A自動進樣器；GI311A泵；GI379A真空脫氣機；GI315BDAD檢測器；GI316A柱溫箱；Chem Station A.10.01色譜工作站；PHS-3C型精密酸度計；BP211D電子天平。

方法與結果

色譜條件：色譜柱采用Hypersil BDS C18，其規(guī)格為（200mm×4.6mm，5um）；取1.4ml三乙胺加入到0.5g的庚烷磺酸鈉中，加水定容至1000ml，再用磷酸調節(jié)PH至3.5±0.05配成離子對試液（以下同）；甲醇為流動相，梯度洗脫的時間與比例控制為（0～3min，70：30；3～6min，70：30～25：75；6～13min，25：75；13～17min，25：75～70：30；17～30min，70：30），流速控制為1.0ml·min-1。進樣量為20ul，柱溫為室溫，檢測波長為233nm，且理論板數(shù)按6個對照品峰計算均不低于2000。因此，6個對照品與樣品在該色譜條件下均能得到很好的分離，供試液色譜圖減去相應溶劑色譜圖所得峰圖表。

對照品溶液的制備[2]：精確稱取6種化學品各10mg于同一100ml容量瓶中，加入70ml甲醇，超聲溶解15min，之后再用甲醇定容，搖勻，作為對照品儲備液備用；精確吸取10ml對照品儲備液于25ml容量瓶中，甲醇定容搖勻，作為對照品溶液備用（6種化學藥品在1ml對照品溶液各占40μg）。

線性關系考察：精確吸取2、5、10、20、40、80、100ul對照品儲備液，按設定好的色譜條件進行測定，記錄峰面積。以6種化學品的進樣量（μg）為橫坐標，相應峰面積值為縱坐標，進行線性回歸。見表1。

樣品測定結果：對臨床上常使用的民間降糖中藥丸、麥冬消渴膠囊、消渴降糖片、糖尿樂膠囊（片）等16個品種24個樣品進行測定，每種樣品取2粒（片）于研缽中研細，分次加入10ml甲醇研磨，并轉移至25ml容量瓶中，超聲溶解15min后加離子對試液定容，搖勻并過濾，濾液為供試品溶液，分別在設定的色譜條件下進行測定。經(jīng)三維光譜圖、紫外光譜圖及液相色譜圖分析得出，20個樣品中均為檢出6中化學藥品；3個樣品中含有格列吡嗦，其濃度分別為134，21，78.9ug/ml，1個樣品中同時含有鹽酸苯乙雙胍和格列吡嗦，其濃度分別為117.1，27.3ug/ml）。

加樣回收率試驗：①供試品溶液的制備：糖尿樂膠囊20粒，去除膠囊殼，研細內容物，精密稱量10粒量于50ml容量瓶中，加入適量甲醇后超聲溶解15min，冷卻后用甲醇溶液定容，搖勻并過濾；精確量取10ml濾液于25ml量瓶中，在分別加入事先已量取好的1、2、5、10ml對照品儲備液，并用離子對試液稀釋至刻度線，搖勻即可。消渴降糖片20片，制備方法同上。②測定法：精確吸取對照品溶液與供試品溶液各20ul，按上述色譜條件測定，記錄馮面積，見表2。

討論

本實驗中鹽酸二甲雙胍出峰早，受中藥制劑中的中極性成分干擾大，因而無法檢出，有待其他學者進一步研究測定。

本實驗中由于6種成分的極性相差較大，且中藥成分頗為復雜，故利用梯度洗脫的方法進行測定，從本實驗的結果可知，6種降糖成分與中藥能夠較好分離。

參考文獻

[1]李雪靖，潘穎.降糖中成藥中非法添加化學藥品的HPLC法快速檢測[J].河北醫(yī)藥，2008，30（6）.

[2]許奇，繆剛.HPLC法快速篩選降糖類中成藥及保健品中非法加入的化學藥品[J].中國現(xiàn)代醫(yī)藥應用，2010，4（9）.

【摘要】目的：對同時檢測降糖類中藥制劑中鹽酸二甲雙胍等6種化學藥品的高校液相色譜法（HPLC）進行探究。方法：色譜柱采用Hypersil BDS C18，其規(guī)格為（200mm×4.6mm，5um）；取1.4ml三乙胺加入到0.5g的庚烷磺酸鈉中，加水定容至1000ml，再用磷酸調節(jié)PH至3.5±0.05配成離子對試液；再以甲醇為流動相進行梯度洗脫，流速控制為1.0ml/min；檢測波長為233nm。結果：降糖類中藥制劑中的6種化學藥品分離良好，且在一定的進樣量范圍內呈現(xiàn)良好的現(xiàn)行。結論：本實驗采用的HPLC簡便快速，能夠對6種不同的化學藥品進行定量及定性的分析，因而，可作為降糖中藥制劑中是否添加化學藥品的鑒定方法。

【關鍵詞】降糖重要制劑；高校液相色譜法（HPLC）；化學藥品

大多數(shù)糖尿病患者認為，中藥降糖藥較為溫和且副作用小，因而大多選擇服用純中藥降糖制劑?？山陙?，不少不法商家暗自添加化學藥品以提高藥物品質，這種做法不僅嚴重違反了國家相關法律法規(guī)，還極易造成藥害事故，從而對糖尿病患者生命造成威脅[1]。因此，建立靈敏可靠的非法添加化學藥品的檢測方法顯得至關重要；本實驗利用DNA檢測器，采用高效液相色譜法，建立了降糖中藥制劑中6種常用化學藥品的檢測方法?，F(xiàn)報告如下。

試劑與儀器

試劑：格列喹酮、格列齊特、格列吡嗦、格列本脲對照品（批號分別為：100280-200301，100269-200402，100281-0001，100135-200404，且均由中國藥品生物制品檢定所提供）；鹽酸苯乙雙胍含量為99.4%，生產(chǎn)批號為：0606001，由山東科源制藥有限公司提供；鹽酸二甲雙胍由天津新新藥業(yè)集團有限公司提供，其濃度為99.1%，生產(chǎn)批號為：20040407；庚烷磺酸鈉及甲醇均為色譜純，其余試劑為分析純，水為重蒸水；樣品為市售降糖中藥制劑。

儀器設備：Agilent 1100型高效液相色譜儀；GI313A自動進樣器；GI311A泵；GI379A真空脫氣機；GI315BDAD檢測器；GI316A柱溫箱；Chem Station A.10.01色譜工作站；PHS-3C型精密酸度計；BP211D電子天平。

方法與結果

色譜條件：色譜柱采用Hypersil BDS C18，其規(guī)格為（200mm×4.6mm，5um）；取1.4ml三乙胺加入到0.5g的庚烷磺酸鈉中，加水定容至1000ml，再用磷酸調節(jié)PH至3.5±0.05配成離子對試液（以下同）；甲醇為流動相，梯度洗脫的時間與比例控制為（0～3min，70：30；3～6min，70：30～25：75；6～13min，25：75；13～17min，25：75～70：30；17～30min，70：30），流速控制為1.0ml·min-1。進樣量為20ul，柱溫為室溫，檢測波長為233nm，且理論板數(shù)按6個對照品峰計算均不低于2000。因此，6個對照品與樣品在該色譜條件下均能得到很好的分離，供試液色譜圖減去相應溶劑色譜圖所得峰圖表。

對照品溶液的制備[2]：精確稱取6種化學品各10mg于同一100ml容量瓶中，加入70ml甲醇，超聲溶解15min，之后再用甲醇定容，搖勻，作為對照品儲備液備用；精確吸取10ml對照品儲備液于25ml容量瓶中，甲醇定容搖勻，作為對照品溶液備用（6種化學藥品在1ml對照品溶液各占40μg）。

線性關系考察：精確吸取2、5、10、20、40、80、100ul對照品儲備液，按設定好的色譜條件進行測定，記錄峰面積。以6種化學品的進樣量（μg）為橫坐標，相應峰面積值為縱坐標，進行線性回歸。見表1。

樣品測定結果：對臨床上常使用的民間降糖中藥丸、麥冬消渴膠囊、消渴降糖片、糖尿樂膠囊（片）等16個品種24個樣品進行測定，每種樣品取2粒（片）于研缽中研細，分次加入10ml甲醇研磨，并轉移至25ml容量瓶中，超聲溶解15min后加離子對試液定容，搖勻并過濾，濾液為供試品溶液，分別在設定的色譜條件下進行測定。經(jīng)三維光譜圖、紫外光譜圖及液相色譜圖分析得出，20個樣品中均為檢出6中化學藥品；3個樣品中含有格列吡嗦，其濃度分別為134，21，78.9ug/ml，1個樣品中同時含有鹽酸苯乙雙胍和格列吡嗦，其濃度分別為117.1，27.3ug/ml）。

加樣回收率試驗：①供試品溶液的制備：糖尿樂膠囊20粒，去除膠囊殼，研細內容物，精密稱量10粒量于50ml容量瓶中，加入適量甲醇后超聲溶解15min，冷卻后用甲醇溶液定容，搖勻并過濾；精確量取10ml濾液于25ml量瓶中，在分別加入事先已量取好的1、2、5、10ml對照品儲備液，并用離子對試液稀釋至刻度線，搖勻即可。消渴降糖片20片，制備方法同上。②測定法：精確吸取對照品溶液與供試品溶液各20ul，按上述色譜條件測定，記錄馮面積，見表2。

討論

本實驗中鹽酸二甲雙胍出峰早，受中藥制劑中的中極性成分干擾大，因而無法檢出，有待其他學者進一步研究測定。

本實驗中由于6種成分的極性相差較大，且中藥成分頗為復雜，故利用梯度洗脫的方法進行測定，從本實驗的結果可知，6種降糖成分與中藥能夠較好分離。

參考文獻

[1]李雪靖，潘穎.降糖中成藥中非法添加化學藥品的HPLC法快速檢測[J].河北醫(yī)藥，2008，30（6）.

[2]許奇，繆剛.HPLC法快速篩選降糖類中成藥及保健品中非法加入的化學藥品[J].中國現(xiàn)代醫(yī)藥應用，2010，4（9）.

【摘要】目的：對同時檢測降糖類中藥制劑中鹽酸二甲雙胍等6種化學藥品的高校液相色譜法（HPLC）進行探究。方法：色譜柱采用Hypersil BDS C18，其規(guī)格為（200mm×4.6mm，5um）；取1.4ml三乙胺加入到0.5g的庚烷磺酸鈉中，加水定容至1000ml，再用磷酸調節(jié)PH至3.5±0.05配成離子對試液；再以甲醇為流動相進行梯度洗脫，流速控制為1.0ml/min；檢測波長為233nm。結果：降糖類中藥制劑中的6種化學藥品分離良好，且在一定的進樣量范圍內呈現(xiàn)良好的現(xiàn)行。結論：本實驗采用的HPLC簡便快速，能夠對6種不同的化學藥品進行定量及定性的分析，因而，可作為降糖中藥制劑中是否添加化學藥品的鑒定方法。

【關鍵詞】降糖重要制劑；高校液相色譜法（HPLC）；化學藥品

大多數(shù)糖尿病患者認為，中藥降糖藥較為溫和且副作用小，因而大多選擇服用純中藥降糖制劑。可近年來，不少不法商家暗自添加化學藥品以提高藥物品質，這種做法不僅嚴重違反了國家相關法律法規(guī)，還極易造成藥害事故，從而對糖尿病患者生命造成威脅[1]。因此，建立靈敏可靠的非法添加化學藥品的檢測方法顯得至關重要；本實驗利用DNA檢測器，采用高效液相色譜法，建立了降糖中藥制劑中6種常用化學藥品的檢測方法?，F(xiàn)報告如下。

試劑與儀器

試劑：格列喹酮、格列齊特、格列吡嗦、格列本脲對照品（批號分別為：100280-200301，100269-200402，100281-0001，100135-200404，且均由中國藥品生物制品檢定所提供）；鹽酸苯乙雙胍含量為99.4%，生產(chǎn)批號為：0606001，由山東科源制藥有限公司提供；鹽酸二甲雙胍由天津新新藥業(yè)集團有限公司提供，其濃度為99.1%，生產(chǎn)批號為：20040407；庚烷磺酸鈉及甲醇均為色譜純，其余試劑為分析純，水為重蒸水；樣品為市售降糖中藥制劑。

儀器設備：Agilent 1100型高效液相色譜儀；GI313A自動進樣器；GI311A泵；GI379A真空脫氣機；GI315BDAD檢測器；GI316A柱溫箱；Chem Station A.10.01色譜工作站；PHS-3C型精密酸度計；BP211D電子天平。

方法與結果

色譜條件：色譜柱采用Hypersil BDS C18，其規(guī)格為（200mm×4.6mm，5um）；取1.4ml三乙胺加入到0.5g的庚烷磺酸鈉中，加水定容至1000ml，再用磷酸調節(jié)PH至3.5±0.05配成離子對試液（以下同）；甲醇為流動相，梯度洗脫的時間與比例控制為（0～3min，70：30；3～6min，70：30～25：75；6～13min，25：75；13～17min，25：75～70：30；17～30min，70：30），流速控制為1.0ml·min-1。進樣量為20ul，柱溫為室溫，檢測波長為233nm，且理論板數(shù)按6個對照品峰計算均不低于2000。因此，6個對照品與樣品在該色譜條件下均能得到很好的分離，供試液色譜圖減去相應溶劑色譜圖所得峰圖表。

對照品溶液的制備[2]：精確稱取6種化學品各10mg于同一100ml容量瓶中，加入70ml甲醇，超聲溶解15min，之后再用甲醇定容，搖勻，作為對照品儲備液備用；精確吸取10ml對照品儲備液于25ml容量瓶中，甲醇定容搖勻，作為對照品溶液備用（6種化學藥品在1ml對照品溶液各占40μg）。

線性關系考察：精確吸取2、5、10、20、40、80、100ul對照品儲備液，按設定好的色譜條件進行測定，記錄峰面積。以6種化學品的進樣量（μg）為橫坐標，相應峰面積值為縱坐標，進行線性回歸。見表1。

樣品測定結果：對臨床上常使用的民間降糖中藥丸、麥冬消渴膠囊、消渴降糖片、糖尿樂膠囊（片）等16個品種24個樣品進行測定，每種樣品取2粒（片）于研缽中研細，分次加入10ml甲醇研磨，并轉移至25ml容量瓶中，超聲溶解15min后加離子對試液定容，搖勻并過濾，濾液為供試品溶液，分別在設定的色譜條件下進行測定。經(jīng)三維光譜圖、紫外光譜圖及液相色譜圖分析得出，20個樣品中均為檢出6中化學藥品；3個樣品中含有格列吡嗦，其濃度分別為134，21，78.9ug/ml，1個樣品中同時含有鹽酸苯乙雙胍和格列吡嗦，其濃度分別為117.1，27.3ug/ml）。

加樣回收率試驗：①供試品溶液的制備：糖尿樂膠囊20粒，去除膠囊殼，研細內容物，精密稱量10粒量于50ml容量瓶中，加入適量甲醇后超聲溶解15min，冷卻后用甲醇溶液定容，搖勻并過濾；精確量取10ml濾液于25ml量瓶中，在分別加入事先已量取好的1、2、5、10ml對照品儲備液，并用離子對試液稀釋至刻度線，搖勻即可。消渴降糖片20片，制備方法同上。②測定法：精確吸取對照品溶液與供試品溶液各20ul，按上述色譜條件測定，記錄馮面積，見表2。

討論

本實驗中鹽酸二甲雙胍出峰早，受中藥制劑中的中極性成分干擾大，因而無法檢出，有待其他學者進一步研究測定。

本實驗中由于6種成分的極性相差較大，且中藥成分頗為復雜，故利用梯度洗脫的方法進行測定，從本實驗的結果可知，6種降糖成分與中藥能夠較好分離。

參考文獻

[1]李雪靖，潘穎.降糖中成藥中非法添加化學藥品的HPLC法快速檢測[J].河北醫(yī)藥，2008，30（6）.

[2]許奇，繆剛.HPLC法快速篩選降糖類中成藥及保健品中非法加入的化學藥品[J].中國現(xiàn)代醫(yī)藥應用，2010，4（9）.