參芪益心湯對(duì)CHF大鼠心肌代謝重構(gòu)的影響

劉莉，劉麗麗，隋艷波，金娟，馬寶柱

(黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第一醫(yī)院，黑龍江 哈爾濱 150040)

慢性心力衰竭(congestive heart failure，CHF)是臨床極為嚴(yán)重而常見(jiàn)的綜合征，研究證實(shí)心肌代謝重構(gòu)是CHF的重要機(jī)制。中醫(yī)學(xué)對(duì)CHF有獨(dú)特認(rèn)識(shí)并積累了豐富臨床經(jīng)驗(yàn)［1］，參芪益心湯是以益氣溫陽(yáng)、活血利水為主要治則，前期大量基礎(chǔ)和臨床研究證實(shí)該方是治療CHF的有效方劑，本研究擬探討參芪益心湯對(duì)CHF大鼠心肌代謝重構(gòu)的影響，闡明其治療CHF的作用機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 模型制備及分組

健康Wistar雄性大鼠50只，體質(zhì)量(200±20)g，購(gòu)于黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，隨機(jī)分為空白組、模型組、對(duì)照組(鹽酸曲美他嗪)、中藥(參芪益心湯)高、低劑量組，室溫飼養(yǎng)，自由進(jìn)食飲水。參照徐叔云《藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)》，將鹽酸阿霉素用滅菌注射用水及0.9%生理鹽水配成濃度為0.8mg/ml的溶液。對(duì)除正常對(duì)照組外的其他4組大鼠進(jìn)行腹腔注射，對(duì)照組同時(shí)腹腔注射等量的生理鹽水，每周1次，共注射6周。

1.2 藥物及制備

參芪益心湯由太子參20g，黃芪20g，桂枝10g，丹參 15g，白術(shù) 15g，葶藶子 15g，茯苓 20g，淫羊藿 20g，仙鶴草30g，甘草10g等組成，購(gòu)于黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第一醫(yī)院。上述藥物分別濃縮制成濃度為2.6g/ml和1.3g/ml的水煎劑備用。阿霉素(深圳萬(wàn)樂(lè)藥業(yè)有限公司，批號(hào)0403E1)。萬(wàn)爽力［施維雅(天津)制藥有限公司，批號(hào)H20055465］。

1.3 主要試劑與儀器

空腹血清、血糖及游離脂肪酸測(cè)定試劑盒(南京建成生物工程研究所);10%水合氯醛(揚(yáng)州市奧鑫助劑廠);ATP標(biāo)準(zhǔn)品(Sigma公司);高速低溫離心機(jī)BECKMAN(日本);AL204型電子天平(美國(guó));VIVID7心臟超聲儀(探頭頻率為11.4 MHz，美國(guó));島津LC－10A型高效液相色譜儀(CBM－10主機(jī)、LC－10AD雙泵、SPD－10AUV－VIS雙波長(zhǎng)分光光度計(jì)、DGU脫氣機(jī))。

1.4 給藥劑量及途徑

參照《人和動(dòng)物間按體表面積折算的等效劑量比值表》確定參芪益心湯低劑量組灌服劑量為12.9g/(kg·d);高劑量組灌服劑量為 25.8g/(kg·d)，模型組灌服生理鹽水10ml/(kg·d);對(duì)照組灌服鹽酸曲美他嗪10mg/(kg·d);每日1次，連續(xù)4周。

1.5 檢測(cè)項(xiàng)目及方法

超聲心動(dòng)圖儀測(cè)定心功能，包括左室收縮末期內(nèi)徑(LVEDD)、左室舒張末期內(nèi)徑(LVESD);高效液相色譜法(HPLC)檢測(cè)ATP;ELISA法測(cè)定FFA;比色法測(cè)定SDH;氧化酶法測(cè)定FBG。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 參芪益心湯對(duì)CHF大鼠心功能指標(biāo)的影響

空白組大鼠中 LVEDD、LVESD低于其他各組，F(xiàn)S、LVEF高于其他各組;中藥治療組中 FS、LVEF高于模型組與對(duì)照組，LVESD低于模型組與對(duì)照組，LVEDD低于模型組(P＜0.05)。提示參芪益心湯能改善CHF大鼠的心功能，并優(yōu)于鹽酸曲美他嗪。見(jiàn)表1。

表1 各組CHF大鼠心功能指標(biāo)比較(s)

表1 各組CHF大鼠心功能指標(biāo)比較(s)

注:與模型組比較，#P ＜0.05;與空白組比較，△P ＜0.05;與對(duì)照組比較，▲P ＜0.05。

組別 n LVEDD(mm)LVESD(mm)FS(%)EF(%)空白組9 8.1 ±1.3 4.9 ±0.7 56.8 ±5.2 79.9 ±7.4模型組 8 12.1 ±1.9△ 9.9±1.6△ 15.1 ±2.0△ 30.8±5.2△對(duì)照組 8 11.2 ±2.3△ 9.6±1.2△ 16.4 ±3.0△ 36.9±6.3△中藥低劑量組 7 10.7 ±1.4#△ 8.5 ±1.1#▲△ 19.6 ±3.6#▲△ 39.2 ±6.2#▲△中藥高劑量組 8 10.1 ±1.5#△ 8.4 ±0.7#▲△ 19.8 ±3.7#▲△ 40.2 ±6.0#▲△

2.2 對(duì) CHF大鼠FBG、FFA、SDH、ATP的影響

模型組大鼠FBG、FFA高于空白組，SDH、ATP低于空白組;與模型組比較，對(duì)照組及中藥高劑量組降低FBG和FFA，增加ATP含量，可提高SDH活性;中藥低劑量組中SDH與模型組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;中藥低劑量組FBG、ATP含量與模型組比較，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，F(xiàn)FA含量低于模型組。提示參芪益心湯能夠改善心肌能量代謝。結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 各組CHF大鼠FBG、FFA、SDH、ATP指標(biāo)的比較(s)

表2 各組CHF大鼠FBG、FFA、SDH、ATP指標(biāo)的比較(s)

注:與模型組比較，#P ＜0.05，##P ＜0.01;與空白組比較，△P ＜0.05，△△P ＜0.01;與對(duì)照組比較，▲P ＜0.05。

組別 n FBG(mmol/L)FFA(umol/L)SDH(U/g)ATP空白組 9 4.75 ±0.63## 161.88 ±78.80# 5.8 ±1.9# 4.35 ±0.78##模型組 8 8.46 ±1.02 266.71 ±80.12 4.4 ±0.5 1.33 ±0.42對(duì)照組 8 6.48 ±1.05#△ 174.89 ±80.79# 5.3 ±0.6# 3.01 ±0.74△△##中藥低劑量組 7 8.11±1.53▲△ 183.20±85.11# 4.7±1.2△ 1.98±0.78△△中藥高劑量組 8 6.63 ±0.94#△ 175.69 ±80.89# 5.0 ±0.9# 2.80 ±0.57△△#

3 討論

心力衰竭是大多數(shù)心血管疾病的最終歸宿，已成為21世紀(jì)最重要的心血管病癥［2］。自 Van Bilsen等［3］提出代謝重構(gòu)的概念，心肌力能學(xué)的改變［4］，即能量缺乏及能量代謝障礙［5］日益受到重視。心衰早期心肌細(xì)胞中葡萄糖氧化降低，F(xiàn)FA增加，脂肪酸氧化增加，線粒體功能下降，SDH活性降低，心肌產(chǎn)生ATP的效率下降了16%～26%，進(jìn)而影響左心室的舒縮功能，心肌肥厚是重要的適應(yīng)過(guò)程，并向心衰發(fā)展。目前西醫(yī)已有幾種營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充藥物作為改善心肌能量代謝被提議用于心衰的臨床治療［6］，使能量代謝由優(yōu)先利用脂肪酸而向更多的利用碳水化合物轉(zhuǎn)換，從而改善心臟收縮功能，減慢泵衰竭的進(jìn)展［7］。

CHF屬中醫(yī)學(xué)中“心悸”、“水腫”、“喘證”等范疇，其基本病機(jī)為心氣(陽(yáng))虛，瘀血水飲停留。參芪益心湯為治療CHF的多年經(jīng)驗(yàn)方，具有益氣溫陽(yáng)、活血利水之功效。該方以太子參、黃芪為君，大補(bǔ)元?dú)猓尹S芪又可溫陽(yáng)利水，與淫羊藿、桂枝相配伍，發(fā)揮益氣溫陽(yáng)之功效。佐以丹參活血通脈，葶藶子、茯苓利水消腫，仙鶴草補(bǔ)虛健脾，且桂枝、白術(shù)與茯苓合用可達(dá)有益氣消腫化痰飲之效，諸藥相伍，共奏益氣溫陽(yáng)、活血利水之功。

本研究發(fā)現(xiàn)，中藥治療組中FS、LVEF高于模型組及對(duì)照組，LVESD低于模型組與對(duì)照組，LVEDD低于模型組。與模型組比較，對(duì)照組及中藥高劑量組FBG和FFA降低，SDH活性增加，ATP含量增加;中藥低劑量組FBG、ATP含量與模型組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，F(xiàn)FA含量低于模型組。這與既往研究相一致，研究表明益氣溫陽(yáng)藥是治療心衰的有效藥物，能增強(qiáng)心肌收縮力，并具有一定的抑制心肌肥厚作用，能夠抑制壓力負(fù)荷動(dòng)物模型的左心室肥厚，減輕心室增重的程度［8］。于忠學(xué)［9］等發(fā)現(xiàn)，黃芪對(duì)心衰的心肌，具有保護(hù)心肌線粒體結(jié)構(gòu)、提高生物氧化相關(guān)的多種酶的活性，從而改善心肌能量代謝。太子參能夠增強(qiáng)心肌收縮力，降低外周血管阻力及心肌耗氧量，抑制脂質(zhì)過(guò)氧化物，保護(hù)心肌。SDH是線粒體內(nèi)三羧酸循環(huán)中關(guān)鍵酶，其活性增高標(biāo)志著細(xì)胞內(nèi)ATP生成增強(qiáng)。黃麗萍等［10］研究發(fā)現(xiàn)，熱性中藥均能升高SDH活性，不同程度地促進(jìn)了體內(nèi)三羧酸循環(huán)，使機(jī)體ATP的產(chǎn)生增加。丹參可以明顯降低血FFA水平，改善微循環(huán)，影響血流動(dòng)力學(xué)。葶藶子含有強(qiáng)心苷，能增強(qiáng)心肌收縮力。LiaoR等［11］證實(shí)，增加糖利用可保護(hù)肥大心臟收縮功能的惡化和左室的擴(kuò)張。

綜上所述，參芪益心湯是治療CHF的有效方劑，能改善CHF大鼠心功能，降低FBG和FFA，增加ATP含量，抑制CHF大鼠心肌代謝重構(gòu)。以心肌能量代謝為切入點(diǎn)開(kāi)展中藥特別是益氣溫陽(yáng)、活血利水中藥治療心衰的研究，將可能尋找到改善心肌能量代謝障礙及心衰預(yù)后的新方法。

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