黑地黃丸對5/6腎切除大鼠腎衰模型血液流變學(xué)的影響

孫響波，于妮娜，張法榮

(1.山東中醫(yī)藥大學(xué)，濟南 250011；2.山東中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院，濟南 250011)

慢性腎衰竭(CRF)患者存在著嚴(yán)重的血液流變異常，由于腎衰時紅細(xì)胞減少,導(dǎo)致全血黏度下降，血漿黏度與血BUN、Scr呈正相關(guān)，高脂血癥可致血漿黏度增高，血漿黏度的增高可致血液流動減慢、腎血流減少，加速腎功能惡化，可見血液流變學(xué)異?？蓪?dǎo)致腎功能衰竭進一步加劇，突出的臨床特點是呈低全血黏度、高血漿黏度綜合征。張法榮等[1]黑地黃丸治療慢性腎衰竭的臨床觀察中發(fā)現(xiàn)，黑地黃丸治療慢性腎衰竭總有效率為80.56%，黑地黃丸可降低Scr水平，升高Ccr水平。在臨床工作中，筆者也觀察到古方黑地黃丸能具有有效改善CRF患者臨床癥狀，延緩病情發(fā)展，保護腎臟功能的作用。因此建立5/6腎切除腎衰大鼠模型，通過血液流變學(xué)相關(guān)指標(biāo)進一步探討該方對CRF腎功能的保護機制。

1 實驗材料

黑地黃丸以熟地黃、蒼術(shù)、干姜、大棗為原料用泛制法制成水丸(300丸/瓶)，由本院藥劑科制得；尿毒清(5g/袋，批號：20120314，廣州康臣藥業(yè)有限責(zé)任公司)；洛丁新(10 mg/片，批號:x0264，北京諾華制藥有限公司)；全自動血液流變快測儀(FASCO系列-3010D，重大維多科技有限公司)；水合氯醛(50 mL/瓶，批號：20120304，山東大學(xué)齊魯醫(yī)院)。SPF級Wistar雄性大鼠[許可證號：SCXK(魯)20090001]，體質(zhì)量(200±20)g，由山東大學(xué)實驗動物中心提供。

2 實驗方法

2.1 分組與給藥 參照文獻[2]建立模型。隨機將造模成功的大鼠分為模型組,尿毒清組,洛丁新組，黑地黃丸高、中、低劑量組，正常組共7組，每組大鼠10只。黑地黃丸高、中、低劑量組分別給予黑地黃丸(0.648、0.324、0.162 g/100 g·d),尿毒清組給予尿毒清顆粒(0.225 g/100 g·d)，洛丁新組灌胃給予洛丁新片(0.09 mg/100 g·d)，于造模成功后溫水溶解灌胃給藥(1 mL/100 g)，正常組與模型組給予等量生理鹽水灌胃，1次/d,共12周。

2.2 取材與檢測方法 實驗從第12周的最后一天21：00禁食不禁水12 h，次日全部大鼠稱體質(zhì)量，用水合氯醛腹腔注射麻醉1 mL/100 g，打開腹腔，經(jīng)腹主動脈采血，取血置于肝素抗凝管中，緩慢搖勻后快速送檢,采用FASCO系列-3010D型全自動血液流變快測儀測定HS、LS、PV、FIB、PCV、ESR的變化，檢測工作由山東中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院檢驗科完成。

3 實驗結(jié)果

3.1 黑地黃丸對腎衰模型大鼠HS、LS、PV、FIB的影響 與模型組比,尿毒清組、黑地黃丸高、中、低劑量組大鼠HS顯著升高；與尿毒清組比，洛丁新組、黑地黃丸低劑量組大鼠HS明顯降低，黑地黃丸高劑量組大鼠HS顯著升高；與洛丁新組比，黑地黃丸高劑量組大鼠HS顯著升高。與模型組比，尿毒清組、洛丁新組、黑地黃丸高、中、低劑量組大鼠LS顯著升高；與尿毒清組比，黑地黃丸高劑量組大鼠LS明顯升高，洛丁新組、黑地黃丸中、低劑量組大鼠LS顯著降低，與洛丁新組比，黑地黃丸高劑量組大鼠LS顯著升高。與模型組比，尿毒清組、洛丁新組、黑地黃丸高、中、低劑量組大鼠PV顯著降低；與尿毒清組比，洛丁新組、黑地黃丸中、低劑量組大鼠PV顯著升高，黑地黃丸高劑量組大鼠PV明顯升高；與洛丁新組比，黑地黃丸高劑量組大鼠PV顯著降低，黑地黃丸低劑量組大鼠PV明顯升高。與模型組比，尿毒清組、洛丁新組、黑地黃丸高、中、低劑量組大鼠FIB含量顯著降低;與尿毒清組比，洛丁新組、黑地黃丸中、低劑量組大鼠FIB含量明顯升高；黑地黃丸高劑量組大鼠FIB含量顯著降低；與洛丁新組比，黑地黃丸高劑量組大鼠FIB含量顯著降低，黑地黃丸中、低劑量組大鼠FIB含量明顯升高。見表1。

表1 黑地黃丸對腎衰模型大鼠全血黏度、PV、FIB的影響

注：與模型組比較，##P<0.01；與尿毒清組比較，▲P<0.05，▲▲P<0.01;與洛丁新組比較，△P<0.05，△△P<0.01。

3.2 黑地黃丸對腎衰模型大鼠PCV、ESR的影響 與模型組比，尿毒清組(P<0.01)、洛丁新組(P<0.01)、黑地黃丸高劑量組(P<0.01)、黑地黃丸中劑量組(P<0.05)大鼠PCV明顯升高；與尿毒清組比，洛丁新組、黑地黃丸高劑量組大鼠PCV顯著升高(P<0.01)，黑地黃丸低劑量組大鼠PCV明顯降低(P<0.05);與洛丁新組比，黑地黃丸高劑量組大鼠PCV明顯升高(P<0.05)，黑地黃丸中、低劑量組大鼠PCV顯著降低(P<0.01)。與模型組比,尿毒清組、洛丁新組、黑地黃丸高、中、低劑量組大鼠ESR顯著降低(P<0.01)；與尿毒清組比,洛丁新組、黑地黃丸中、低劑量組大鼠ESR顯著升高(P<0.01)，黑地黃丸高劑量組大鼠ESR明顯降低(P<0.05)；與洛丁新組比,黑地黃丸高劑量組大鼠ESR顯著降低(P<0.01)，黑地黃丸低劑量組大鼠ESR顯著升高(P<0.01)。見表2。

表2 黑地黃丸對腎衰模型大鼠PCV、ESR的影響

注：與模型組比較，#P<0.05，##P<0.01；與尿毒清組比較，▲P<0.05，▲▲P<0.01；與洛丁新組比較，△P<0.05，△△P<0.01。

4 討論

黑地黃丸出自《素問病機氣宜保命集》。全方由蒼術(shù)一斤(米泔浸)，熟地黃一斤，川姜冬一兩、夏五錢，春七錢組成。喻嘉言曰：“治脾腎兩臟之虛，而去脾濕，除腎燥，兩擅其長，超超元箸?！惫τ醚a脾益腎，主治脾腎不足，房室虛損，形瘦無力，面多青黃而無常色，舌質(zhì)淡胖，脈虛細(xì)弱及血虛久痔。黃仁發(fā)等[3]觀察了以黑地黃湯為基礎(chǔ)的怡腎湯對慢性腎衰竭患者的臨床療效及對免疫功能的影響，證明怡腎湯能有效減少蛋白尿、改善腎功能、提高機體免疫功能，從而延緩腎衰竭進程。CRF時,由于毒素對紅細(xì)胞膜的損害，使紅細(xì)胞的變形能力降低，紅細(xì)胞聚集性增強，難以通過微血管，造成腎臟微循環(huán)障礙，腎組織缺血缺氧，加速腎功能惡化。吳開慧等[4]在血流變學(xué)的測定中,發(fā)現(xiàn)慢性腎衰患者其紅細(xì)胞壓積和全血黏度均明顯減低，患者群的血漿黏度大致正常，紅細(xì)胞指數(shù)下降，血漿黏度與血漿成分有關(guān)，慢性腎衰患者的代謝產(chǎn)物潴留，導(dǎo)致了血漿成份的變化，紅細(xì)胞免疫功能與之呈高度的負(fù)相關(guān)，說明了血漿中的某些成份可能對紅細(xì)胞免疫功能有抑制作用。CRF時血液流變學(xué)的異常主要表現(xiàn)為紅細(xì)胞壓積及全血黏度降低,血漿黏度及血液還原黏度增高，突出特點是呈低全血黏度、高血漿黏度綜合征，血液流變學(xué)異常是多種因素相互作用的結(jié)果[5]。王吉永[6]研究發(fā)現(xiàn)CRF患者由于血液黏滯促使腎小球內(nèi)高壓,從而造成基底膜破裂，致使腎小球受損。同時，紅細(xì)胞蛋白糖基化，其形態(tài)發(fā)生改變，易在狹窄的血管內(nèi)聚集，從而加重血液瘀滯，隨著腎功能的逐漸衰退形成惡性循環(huán)，致使血液流變學(xué)指標(biāo)變化更加異常。纖維蛋白原沉積是腎臟疾病進展的重要原因，纖維蛋白原刺激上皮細(xì)胞增殖，是形成新月體病變的基礎(chǔ)，易導(dǎo)致腎小球硬化,進而失去功能[7]。王勇[8]認(rèn)為脾腎陽衰，氣化不利、尿毒內(nèi)停，氣血瘀滯生化失常,臟腑功能失養(yǎng)而衰竭，尿毒不能排出體外聚積體內(nèi)而發(fā)病。臨床以脾腎陽衰，毒積血瘀較為常見，血瘀證占標(biāo)證之首。黑地黃丸治脾腎兩臟之虛，燥脾濕，復(fù)脾之統(tǒng)攝、胃之化源；除腎燥，令腎之開合，使?jié)穸净鰸嵯?，全方集補、潤、溫、養(yǎng)于一方，且“丸者緩也”，吸收慢，作用持久。通過實驗發(fā)現(xiàn)，與尿毒清組比，黑地黃丸高劑量組大鼠HS、LS明顯升高(P>0.05)黑地黃丸高劑量組大鼠PV明顯升高(P>0.05),黑地黃丸高(P<0.01)、中(P<0.05)劑量組大鼠PCV明顯升高，黑地黃丸高劑量組大鼠FIB(P<0.01)、ESR(P<0.05)明顯降低；與洛丁新組比，黑地黃丸高劑量組大鼠HS(P<0.01)、LS(P<0.01)、PCV(P<0.05)明顯升高，且大鼠PV、FIB、ESR顯著降低(P<0.01),由此可見黑地黃丸高劑量組效果最佳，其對腎功能的保護機制可能與調(diào)節(jié)HS、LS、PVC，下調(diào)PV，抑制FIB合成，降低ESR水平，從而改善腎衰大鼠血液流變學(xué)相關(guān)。

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