川芎中阿魏酸超高壓提取工藝的優(yōu)化

侯麗麗+陳洪海+張守勤+

摘要：優(yōu)化川芎（Ｌｉｇｕｓｔｉｃｕｍ ｃｈｕａｎｘｉｏｎｇ Ｈｏｒｔ．）中阿魏酸的常溫超高壓提取條件，應(yīng)用高效液相色譜法測定提取液中的阿魏酸含量，以阿魏酸提取率為評價(jià)指標(biāo)進(jìn)行Ｌ９（３４）正交試驗(yàn)。結(jié)果表明，常溫超高壓提取川芎中阿魏酸的最優(yōu)工藝為乙醇體積分?jǐn)?shù)７０％，壓力３００ ＭＰａ，固液比１∶５０（ｍ∶Ｖ，ｇ∶ｍＬ），時(shí)間３．０ ｍｉｎ，提取１次。超高壓提取技術(shù)作為一種新的提取方法，提取川芎中阿魏酸穩(wěn)定、可行。

關(guān)鍵詞：川芎（Ｌｉｇｕｓｔｉｃｕｍ ｃｈｕａｎｘｉｏｎｇ Ｈｏｒｔ．）；阿魏酸；超高壓；提取

中圖分類號：Ｒ２８４．2；R282文獻(xiàn)標(biāo)識碼：Ａ文章編號：0439－８114（２０14）09－2133-03

Ｏｐｔｉｍｉｚing Ｐｒｏｃｅｓｓ ｏｆ Ｅｘｔｒａｃｔｉng Ｆｅｒｕｌｉｃ Ａｃｉｄ ｆｒｏｍ Ｌｉｇｕｓｔｉｃｕｍ ｃｈｕａｎｘｉｏｎｇ Ｈｏｒｔ．

ｂｙ Ｕｌｔｒａ－ｈｉｇｈ Ｐｒｅｓｓｕｒｅ

ＨＯＵ Ｌｉ－ｌｉ１，ＣＨＥＮ Ｈｏｎｇ－ｈａｉ２， ＺＨＡＮＧ Ｓｈｏｕ－ｑｉｎ３

（１．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｆｏｏｄ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ， Ｊｉｌｉｎ Ｂｕｓｉｎｅｓｓ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏｌｌｅｇｅ， Ｃｈａｎｇｃｈｕｎ １３００６２，Ｃｈｉｎａ； ２． Ｃｈａｎｇｃｈｕｎ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｅｑｕｉｐｍｅｎｔ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｃｈａｎｇｃｈｕｎ １３００１２， Ｃｈｉｎａ；３．Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ａｎｄ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｃｏｌｌｅｇｅ， Ｊｉｌｉｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｃｈａｎｇｃｈｕｎ １３００２５，Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｔｈｅ ｏｐｔｉｍal Ｕｌｔｒａ－ｈｉｇｈ Ｐｒｅｓｓｕｒｅ （ＵＰＥ） ｐｒｏｃｅｓｓ ｆｏｒ extracting ｆｅｒｕｌｉｃ ａｃｉｄ ｆｒｏｍ Lｉｇｕｓｔｉｃｕｍ ｃｈｕａｎｘｉｏｎｇ Ｈｏｒｔ. ｗａｓ ｓｔｕｄｉｅｄ． Ｔｈｅ ｐｒｏｃｅｓｓ ｗａｓ ｓｅｌｅｃｔｅｄ ｂｙ Ｌ９（３４） ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｄｅｓｉｇｎ using ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｆｅｒｕｌｉｃ ａｃｉｄ ａｓ ｉｎｄｅｘ． Ｔｈｅ ｏｐｔｉｍal ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｗａｓ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｓｏｌｖｅｎｔ with ７０％ ｅｔｈａｎｏｌ， ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｐｒｅｓｓｕｒｅ of ３００ ＭＰａ， ｓｏｌｉｄ／ｌｉｑｕｉｄ ｒａｔｉｏ of １∶５０（ｍ∶Ｖ， ｇ∶ｍＬ）， ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ for ３．０ ｍｉｎ ａｎｄ ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ ｆｏｒ １ ｔｉｍｅｓ． ＵＰＥ ｉｓ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍａｌ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｅｘｔｒａｃｔｉng ｆｅｒｕｌｉｃ ａｃｉｄ ｆｒｏｍ Lｉｇｕｓｔｉｃｕｍ ｃｈｕａｎｘｉｏｎｇ Ｈｏｒｔ．

Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： Ｌｉｇｕｓｔｉｃｕｍ ｃｈｕａｎｘｉｏｎｇ Ｈｏｒｔ．； ｆｅｒｕｌｉｃ ａｃｉｄ； uｌｔｒａ－ｈｉｇｈ ｐｒｅｓｓｕｒｅ； ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ

川芎（Ｌｉｇｕｓｔｉｃｕｍ ｃｈｕａｎｘｉｏｎｇ Ｈｏｒｔ．） 為傘形科植物，其干燥根莖為常用的活血化瘀中藥，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，味辛、微苦、性溫，有活血化瘀、理氣止痛、降壓、擴(kuò)張血管、抗血栓、鎮(zhèn)靜及解痙等作用。常用于頭痛、肋痛、脹痛、風(fēng)濕痹痛及心腦血管等疾病的治療［１，２］。由于其獨(dú)特的藥用價(jià)值，引起了藥學(xué)研究者的廣泛關(guān)注，成為中草藥研究的熱點(diǎn)。對川芎化學(xué)成分的研究始于２０世紀(jì)３０年代［３］。隨著現(xiàn)代分析手段的進(jìn)步以及波譜學(xué)的發(fā)展，對川芎的化學(xué)成分有了較為完善的了解。川芎主要含有內(nèi)酯、酚（酸）性成分及含氮化合物。

超高壓常溫提取技術(shù)是新興的提取技術(shù)，具有高效、節(jié)能、保護(hù)提取物生物活性等優(yōu)點(diǎn)。目前已經(jīng)被應(yīng)用于提取多種中藥的有效成分，如人參［４，５］、西洋參［６］、荔枝皮［７］、龍眼皮［８］、蜂膠［９］、綠茶［１０－１２］等。本試驗(yàn)主要研究川芎中阿魏酸的超高壓最優(yōu)提取工藝，為川芎有效成分的研究提供一定的依據(jù)。

１材料與方法

１．１試驗(yàn)材料與儀器

川芎（吉林修正藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司）；阿魏酸標(biāo)準(zhǔn)品（江西本草天工科技有限責(zé)任公司）；甲醇、冰乙酸均為色譜純；其他試劑均為分析純。

ＬＣ２０型高效液相色譜儀［島津國際貿(mào)易（上海）有限公司］；ＤＬ７００型超高壓設(shè)備（上海大隆機(jī)器廠）。

１．２試驗(yàn)方法

１．２．１色譜條件色譜柱，Ｃ１８（１５０ ｍｍ×４．６ ｍｍ）；流動相，冰醋酸－甲醇－水（１∶６５∶３４）；檢測波長，３１３ ｎｍ；流速，０．４ ｍＬ／ｍｉｎ；柱溫，４０ ℃。

１．２．２標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制精確稱取阿魏酸標(biāo)準(zhǔn)品３．８ ｇ置于１００ ｍＬ容量瓶中，加甲醇定容至刻度，搖勻，即得阿魏酸標(biāo)準(zhǔn)溶液（０．０３８ ｍｇ／ｍＬ）。吸取該對照品溶液２、４、６、８、１０ μＬ，分別注入高效液相色譜儀，測得峰面積，以對照品為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線（圖１）。得到的回歸方程為Ｙ＝７５２ １８５．３Ｘ－３７５ ９，ｒ２＝ ０．９９９ ９。阿魏酸標(biāo)準(zhǔn)品液相色譜圖見圖２。

１．２．３超高壓提取方法將處理好的原料與溶劑混合后，用塑料袋封好放入高壓容器內(nèi)，在常溫、適當(dāng)壓力下保持一定時(shí)間后卸壓取出，離心，取上清液備用。

１．２．４回流提取方法參照文獻(xiàn)［１３］精確稱取川芎樣品２．０ ｇ，按１∶８（m∶V，g∶ｍＬ）的固液比加入７０％乙醇，提取２次，每次１．５ ｈ，提取液離心，取上清液備用。

１．２．５測定方法精確吸取待測液１０ μＬ，注入高效液相色譜儀測定峰面積，由標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算其含量。

阿魏酸提取率（ｍｇ／ｇ）＝■×■

式中，Ｓ為峰面積；Ｖ為定容體積（ｍＬ）；ｖ為進(jìn)樣量（μＬ）；ｗ為樣品質(zhì)量（ｇ）。

１．３單因素試驗(yàn)

通過試驗(yàn)分別確定常溫超高壓提取的溶媒乙醇體積分?jǐn)?shù)、提取壓力、溶劑用量、提取時(shí)間對川芎阿魏酸提取率的影響。①精確稱?。保?ｇ樣品粉末６份，按固液比１∶５０，分別加入體積分?jǐn)?shù)為２０％、４０％、６０％、７０％、８０％、９５％的乙醇溶液，在２００ ＭＰａ壓力下保壓２．０ ｍｉｎ，取出后離心，取上清液；②精確稱?。保?ｇ樣品粉末４份，按固液比１∶４０加入體積分?jǐn)?shù)６０％的乙醇溶液，分別在１００、２００、３００、４００ ＭＰａ下保壓２．０ ｍｉｎ，取出后離心，取上清液；③精確稱?。保?ｇ樣品粉末４份，分別按固液比１∶２０、１∶４０、１∶６０、１∶８０加入體積分?jǐn)?shù)６０％的乙醇溶液，在２００ ＭＰａ壓力下保壓２．０ ｍｉｎ，取出后離心，取上清液；④精確稱?。保?ｇ樣品粉末４份，按固液比１∶４０加入體積分?jǐn)?shù)６０％的乙醇溶液，在２００ ＭＰａ下分別保壓１．０、２．０、３．０、４．０ ｍｉｎ，取出后離心，取上清液。

各試驗(yàn)根據(jù)提取液的不同，稀釋到一定的體積，超濾膜過濾后測定阿魏酸提取率。

１．４正交試驗(yàn)

根據(jù)單因素試驗(yàn)結(jié)果，正交試驗(yàn)主要考察提取壓力、乙醇體積分?jǐn)?shù)、提取時(shí)間、固液比４個因素對超高壓提取工藝的影響，每個因素?。硞€水平，以阿魏酸提取率為考察指標(biāo)，采用Ｌ９（３４）進(jìn)行正交試驗(yàn)，篩選最佳工藝。正交試驗(yàn)因素和水平見表1。

２結(jié)果與分析

２．１單因素試驗(yàn)結(jié)果

２．１．１乙醇體積分?jǐn)?shù)對川芎阿魏酸提取率的影響從圖３可以看出，乙醇體積分?jǐn)?shù)對川芎阿魏酸提取率的影響比較明顯，隨著乙醇體積分?jǐn)?shù)的增加阿魏酸提取率增加，在乙醇體積分?jǐn)?shù)為７０％、８０％時(shí)提取率較高，當(dāng)乙醇體積分?jǐn)?shù)高于８０％時(shí)阿魏酸提取率下降。因此，選擇乙醇體積分?jǐn)?shù)為６０％～８０％作為阿魏酸的提取溶劑。

２．１．２提取壓力對川芎阿魏酸提取率的影響從圖４可以看出，在１００～３００ ＭＰａ下，隨著提取壓力的增大川芎阿魏酸提取率也隨之升高，當(dāng)提取壓力超過３００ ＭＰａ后，阿魏酸的提取率變化不明顯。可能在３００ ＭＰａ壓力下川芎細(xì)胞壁已被破壞，溶劑在壓力作用下已完全進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，并將有效成分基本溶出，所以加大壓力提取率變化不大。因此，選擇壓力２００～４００ ＭＰａ為宜。

２．１．３固液比對川芎阿魏酸提取率的影響從圖５可以看出，隨著固液比的變化，川芎阿魏酸提取率逐漸升高，在固液比為１∶４０后，阿魏酸提取率變化緩慢，基本影響不大，說明在４０倍乙醇用量時(shí)，阿魏酸已經(jīng)基本被溶解出來。因此，選擇固液比為１∶４０為最佳。

２．１．４提取時(shí)間對川芎阿魏酸提取率的影響通過試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，隨著提取時(shí)間的延長，阿魏酸的提取率基本沒有變化，提取時(shí)間對其基本無影響。高壓提取過程中當(dāng)壓力升高，溶劑在壓力下進(jìn)入到細(xì)胞內(nèi)部，溶解有效成分，當(dāng)壓力在瞬間消失后，在壓力差的作用下細(xì)胞膨脹爆炸，有效成分被溶出，因此提取時(shí)間長短對阿魏酸提取率影響不大。

２．２正交試驗(yàn)結(jié)果

由表２可以看出，根據(jù)極差分析，影響川芎阿魏酸提取率的主次因素為Ｂ、Ａ、Ｄ、Ｃ，乙醇體積分?jǐn)?shù)對川芎阿魏酸提取率的影響最大，其次是提取壓力和固液比，提取時(shí)間的影響最小，得到的最優(yōu)組合為Ａ２Ｂ２Ｃ３Ｄ２，即高壓提取最優(yōu)條件為提取壓力３００ ＭＰａ、體積分?jǐn)?shù)７０％乙醇溶液、提取時(shí)間３．０ ｍｉｎ、固液比１∶５０。

２．３驗(yàn)證試驗(yàn)

按正交試驗(yàn)最優(yōu)工藝條件重復(fù)驗(yàn)證提?。?次，川芎阿魏酸的提取率依次為０．５２０、０．５２４、０．５２６ ｍｇ／ｇ，平均為０．５２３ ｍｇ／ｇ。說明最優(yōu)工藝穩(wěn)定、可行。

２．４與回流提取方法對比試驗(yàn)

取相同重量的川芎樣品，分別按回流提取和超高壓提取的最優(yōu)工藝，得到２種提取液。通過測定２種提取方法所得到的阿魏酸含量基本相同，無顯著差異（表４）。從表４可以看出，超高壓提取與回流提取相比，具有提取時(shí)間短、提取次數(shù)少、不需要加熱，節(jié)省能源并避免加熱對成分的破壞。但是從溶劑用量上超高壓提取方法較回流提取要多。

３小結(jié)

根據(jù)正交試驗(yàn)結(jié)果，結(jié)合節(jié)約能源等綜合考慮，確定常溫超高壓提取川芎阿魏酸的最優(yōu)工藝為提取溶劑體積分?jǐn)?shù)７０％乙醇溶液、提取壓力３００ ＭＰａ、固液比１∶５０、提取時(shí)間３．０ ｍｉｎ。在最優(yōu)工藝下，通過測定阿魏酸提取率為０．５２３ ｍｇ／ｇ。與回流提取方法相比較，超高壓提取技術(shù)具有常溫不加熱、提取時(shí)間短、雜質(zhì)少、穩(wěn)定性高、節(jié)約能源等優(yōu)點(diǎn)，作為一種新型的提取工藝，其應(yīng)用前景廣闊。

參考文獻(xiàn)：

［１］ 范宋玲，張建軍，熊帶水，等．川芎微波提取工藝優(yōu)選［Ｊ］．中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，２０１１，１７（１８）：４６－４８．

［２］ 王玥，杜守穎，吳清，等.川芎中阿魏酸的閃式提取工藝研究［Ｊ］． 北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，２０１２，３５（８）： ５５９－５６２．

［３］ 余昕，朱燁，張春，等．不同干燥方法對川芎不同部位阿魏酸含量的影響［Ｊ］．中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，２０１２，１８（６）：１００－１０３．

［４］ ＣＨＥＮ Ｒ Ｚ， ＭＥＮＧ Ｆ Ｌ， ＺＨＡＮＧ Ｓ Ｑ， ｅｔ ａｌ． Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｕｌｔｒａｈｉｇｈ ｐｒｅｓｓｕｒｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｏｎ ｙｉｅｌｄｓ ａｎｄ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅ ｆｒｏｍ ｇｉｎｓｅｎｇ［Ｊ］． Ｓｅｐ Ｐｕｒｉｆｉｃ Ｔｅｃｈｎｏｌ， ２００９，６６（2）：３４０－３４６．

［５］ 陳瑞戰(zhàn)，張守勤，王長征．常溫超高壓提取人參皂苷［Ｊ］．化工學(xué)報(bào)，２００５，５６（５）：９１１－９１４．

［６］ 陳瑞戰(zhàn)，張守勤，王長征，等．超高壓提取西洋參皂苷工藝研究［Ｊ］．農(nóng)業(yè)工程學(xué)報(bào)，２００５，２１（５）：１５０－１５４．

［７］ ＰＲＡＳＡＤ Ｋ Ｎ， ＹＡＮＧ Ｂ， ＺＨＡＯ Ｍ Ｍ， ｅｔ ａｌ． Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ uｌｔｒａｓｏｎｉｃａｔｉｏｎ ｏｒ hｉｇｈ－ｐｒｅｓｓｕｒｅ eｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ fｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｆｒｏｍ Lｉｔｃｈｉ ｆｒｕｉｔ ｐｅｒｉｃａｒｐ［Ｊ］． Ｊ Ｆｏｏｄ Ｐｒｏｃｅｓｓ Ｅｎｇ，２００９，３２（6）：８２８－８４３．

［８］ ＰＲＡＳＡＤ Ｋ Ｎ， ＹＡＮＧ Ｅ， ＹＩ Ｃ， ｅｔ ａｌ． Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｈｉｇｈ ｐｒｅｓｓｕｒｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｏｎ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｍ ｙｉｅｌｄ， ｔｏｔａｌ ｐｈｅｎｏｌｉｃ ｃｏｎｔｅｎｔ ａｎｄ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｌｏｎｇａｎ ｆｒｕｉｔ ｐｅｒｉｃａｒｐ［Ｊ］． Innovative Food Science & Emerging Technologies，２００９，１０（2）：１５５－１５９．

［９］ ＺＨＡＮＧ Ｓ Ｑ， ＸＩ Ｊ， ＷＡＮＧ Ｃ Ｚ． Ｈｉｇｈ ｈｙｄｒｏｓｔａｔｉｃ ｐｒｅｓｓｕｒｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ flａｖｏｎｏｉｄｓ ｆｒｏｍ ｐｒｏｐｏｌｉｓ［Ｊ］． Ｊ Ｃｈｅｍ Ｔｅｃｈｎｏｌ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ，２００５，８０（1）：５０－５４．

［１０］ ＸＩ Ｊ．Ｃａｆｆｅｉｎｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｆｒｏｍ ｇｒｅｅｎ ｔｅａ ｌｅａｖｅｓ ａｓｓｉｓｔｅｄ ｂｙ ｈｉｇｈ ｐｒｅｓｓｕｒｅ ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｆｏｏｄ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ， ２００９，９４（1）：１０５－１０９．

［１１］ ＸＩ Ｊ， ＳＨＥＮ Ｄ Ｊ，ＺＨＡＯ Ｓ，ｅｔ ａｌ． Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ ｆｒｏｍ ｇｒｅｅｎ ｔｅａ ｌｅａｖｅｓ ｕｓｉｎｇ ａ ｈｉｇｈ ｈｙｄｒｏｓｔａｔｉｃ ｐｒｅｓｓｕｒｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ［Ｊ］． Ｉｎｔｅｒ Ｊ Ｐｈａｒｍ，２００９，３８２（1-2）：１３９－１４３．

［１２］ ＸＩ Ｊ， ＺＨＡＯ Ｓ， ＬＵ Ｂ Ｂ， ｅｔ ａｌ． Ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｍａｊｏｒ ｃａｔｅｃｈｉｎｓ ｆｒｏｍ ｇｒｅｅｎ ｔｅａ ｂｙ ｕｌｔｒａｈｉｇｈ ｐｒｅｓｓｕｒｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｉｎｔｅｒ Ｊ Ｐｈａｒｍ，２０１０，386（1-２）：２２９－２３１．

［１３］ 崔麗娟，劉玉明．正交試驗(yàn)法優(yōu)選川芎中阿魏酸的提取工藝［Ｊ］． 齊魯藥事，２００５，２４（１９）：５６０－５６１．

２結(jié)果與分析

２．１單因素試驗(yàn)結(jié)果

２．１．１乙醇體積分?jǐn)?shù)對川芎阿魏酸提取率的影響從圖３可以看出，乙醇體積分?jǐn)?shù)對川芎阿魏酸提取率的影響比較明顯，隨著乙醇體積分?jǐn)?shù)的增加阿魏酸提取率增加，在乙醇體積分?jǐn)?shù)為７０％、８０％時(shí)提取率較高，當(dāng)乙醇體積分?jǐn)?shù)高于８０％時(shí)阿魏酸提取率下降。因此，選擇乙醇體積分?jǐn)?shù)為６０％～８０％作為阿魏酸的提取溶劑。

２．１．２提取壓力對川芎阿魏酸提取率的影響從圖４可以看出，在１００～３００ ＭＰａ下，隨著提取壓力的增大川芎阿魏酸提取率也隨之升高，當(dāng)提取壓力超過３００ ＭＰａ后，阿魏酸的提取率變化不明顯?？赡茉冢常埃?ＭＰａ壓力下川芎細(xì)胞壁已被破壞，溶劑在壓力作用下已完全進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，并將有效成分基本溶出，所以加大壓力提取率變化不大。因此，選擇壓力２００～４００ ＭＰａ為宜。

２．１．３固液比對川芎阿魏酸提取率的影響從圖５可以看出，隨著固液比的變化，川芎阿魏酸提取率逐漸升高，在固液比為１∶４０后，阿魏酸提取率變化緩慢，基本影響不大，說明在４０倍乙醇用量時(shí)，阿魏酸已經(jīng)基本被溶解出來。因此，選擇固液比為１∶４０為最佳。

２．１．４提取時(shí)間對川芎阿魏酸提取率的影響通過試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，隨著提取時(shí)間的延長，阿魏酸的提取率基本沒有變化，提取時(shí)間對其基本無影響。高壓提取過程中當(dāng)壓力升高，溶劑在壓力下進(jìn)入到細(xì)胞內(nèi)部，溶解有效成分，當(dāng)壓力在瞬間消失后，在壓力差的作用下細(xì)胞膨脹爆炸，有效成分被溶出，因此提取時(shí)間長短對阿魏酸提取率影響不大。

２．２正交試驗(yàn)結(jié)果

由表２可以看出，根據(jù)極差分析，影響川芎阿魏酸提取率的主次因素為Ｂ、Ａ、Ｄ、Ｃ，乙醇體積分?jǐn)?shù)對川芎阿魏酸提取率的影響最大，其次是提取壓力和固液比，提取時(shí)間的影響最小，得到的最優(yōu)組合為Ａ２Ｂ２Ｃ３Ｄ２，即高壓提取最優(yōu)條件為提取壓力３００ ＭＰａ、體積分?jǐn)?shù)７０％乙醇溶液、提取時(shí)間３．０ ｍｉｎ、固液比１∶５０。

２．３驗(yàn)證試驗(yàn)

按正交試驗(yàn)最優(yōu)工藝條件重復(fù)驗(yàn)證提?。?次，川芎阿魏酸的提取率依次為０．５２０、０．５２４、０．５２６ ｍｇ／ｇ，平均為０．５２３ ｍｇ／ｇ。說明最優(yōu)工藝穩(wěn)定、可行。

２．４與回流提取方法對比試驗(yàn)

取相同重量的川芎樣品，分別按回流提取和超高壓提取的最優(yōu)工藝，得到２種提取液。通過測定２種提取方法所得到的阿魏酸含量基本相同，無顯著差異（表４）。從表４可以看出，超高壓提取與回流提取相比，具有提取時(shí)間短、提取次數(shù)少、不需要加熱，節(jié)省能源并避免加熱對成分的破壞。但是從溶劑用量上超高壓提取方法較回流提取要多。

３小結(jié)

根據(jù)正交試驗(yàn)結(jié)果，結(jié)合節(jié)約能源等綜合考慮，確定常溫超高壓提取川芎阿魏酸的最優(yōu)工藝為提取溶劑體積分?jǐn)?shù)７０％乙醇溶液、提取壓力３００ ＭＰａ、固液比１∶５０、提取時(shí)間３．０ ｍｉｎ。在最優(yōu)工藝下，通過測定阿魏酸提取率為０．５２３ ｍｇ／ｇ。與回流提取方法相比較，超高壓提取技術(shù)具有常溫不加熱、提取時(shí)間短、雜質(zhì)少、穩(wěn)定性高、節(jié)約能源等優(yōu)點(diǎn)，作為一種新型的提取工藝，其應(yīng)用前景廣闊。

參考文獻(xiàn)：

［１］ 范宋玲，張建軍，熊帶水，等．川芎微波提取工藝優(yōu)選［Ｊ］．中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，２０１１，１７（１８）：４６－４８．

［２］ 王玥，杜守穎，吳清，等.川芎中阿魏酸的閃式提取工藝研究［Ｊ］． 北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，２０１２，３５（８）： ５５９－５６２．

［３］ 余昕，朱燁，張春，等．不同干燥方法對川芎不同部位阿魏酸含量的影響［Ｊ］．中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，２０１２，１８（６）：１００－１０３．

［４］ ＣＨＥＮ Ｒ Ｚ， ＭＥＮＧ Ｆ Ｌ， ＺＨＡＮＧ Ｓ Ｑ， ｅｔ ａｌ． Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｕｌｔｒａｈｉｇｈ ｐｒｅｓｓｕｒｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｏｎ ｙｉｅｌｄｓ ａｎｄ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅ ｆｒｏｍ ｇｉｎｓｅｎｇ［Ｊ］． Ｓｅｐ Ｐｕｒｉｆｉｃ Ｔｅｃｈｎｏｌ， ２００９，６６（2）：３４０－３４６．

［５］ 陳瑞戰(zhàn)，張守勤，王長征．常溫超高壓提取人參皂苷［Ｊ］．化工學(xué)報(bào)，２００５，５６（５）：９１１－９１４．

［６］ 陳瑞戰(zhàn)，張守勤，王長征，等．超高壓提取西洋參皂苷工藝研究［Ｊ］．農(nóng)業(yè)工程學(xué)報(bào)，２００５，２１（５）：１５０－１５４．

［７］ ＰＲＡＳＡＤ Ｋ Ｎ， ＹＡＮＧ Ｂ， ＺＨＡＯ Ｍ Ｍ， ｅｔ ａｌ． Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ uｌｔｒａｓｏｎｉｃａｔｉｏｎ ｏｒ hｉｇｈ－ｐｒｅｓｓｕｒｅ eｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ fｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｆｒｏｍ Lｉｔｃｈｉ ｆｒｕｉｔ ｐｅｒｉｃａｒｐ［Ｊ］． Ｊ Ｆｏｏｄ Ｐｒｏｃｅｓｓ Ｅｎｇ，２００９，３２（6）：８２８－８４３．

［８］ ＰＲＡＳＡＤ Ｋ Ｎ， ＹＡＮＧ Ｅ， ＹＩ Ｃ， ｅｔ ａｌ． Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｈｉｇｈ ｐｒｅｓｓｕｒｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｏｎ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｍ ｙｉｅｌｄ， ｔｏｔａｌ ｐｈｅｎｏｌｉｃ ｃｏｎｔｅｎｔ ａｎｄ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｌｏｎｇａｎ ｆｒｕｉｔ ｐｅｒｉｃａｒｐ［Ｊ］． Innovative Food Science & Emerging Technologies，２００９，１０（2）：１５５－１５９．

［９］ ＺＨＡＮＧ Ｓ Ｑ， ＸＩ Ｊ， ＷＡＮＧ Ｃ Ｚ． Ｈｉｇｈ ｈｙｄｒｏｓｔａｔｉｃ ｐｒｅｓｓｕｒｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ flａｖｏｎｏｉｄｓ ｆｒｏｍ ｐｒｏｐｏｌｉｓ［Ｊ］． Ｊ Ｃｈｅｍ Ｔｅｃｈｎｏｌ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ，２００５，８０（1）：５０－５４．

［１０］ ＸＩ Ｊ．Ｃａｆｆｅｉｎｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｆｒｏｍ ｇｒｅｅｎ ｔｅａ ｌｅａｖｅｓ ａｓｓｉｓｔｅｄ ｂｙ ｈｉｇｈ ｐｒｅｓｓｕｒｅ ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｆｏｏｄ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ， ２００９，９４（1）：１０５－１０９．

［１１］ ＸＩ Ｊ， ＳＨＥＮ Ｄ Ｊ，ＺＨＡＯ Ｓ，ｅｔ ａｌ． Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ ｆｒｏｍ ｇｒｅｅｎ ｔｅａ ｌｅａｖｅｓ ｕｓｉｎｇ ａ ｈｉｇｈ ｈｙｄｒｏｓｔａｔｉｃ ｐｒｅｓｓｕｒｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ［Ｊ］． Ｉｎｔｅｒ Ｊ Ｐｈａｒｍ，２００９，３８２（1-2）：１３９－１４３．

［１２］ ＸＩ Ｊ， ＺＨＡＯ Ｓ， ＬＵ Ｂ Ｂ， ｅｔ ａｌ． Ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｍａｊｏｒ ｃａｔｅｃｈｉｎｓ ｆｒｏｍ ｇｒｅｅｎ ｔｅａ ｂｙ ｕｌｔｒａｈｉｇｈ ｐｒｅｓｓｕｒｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｉｎｔｅｒ Ｊ Ｐｈａｒｍ，２０１０，386（1-２）：２２９－２３１．

［１３］ 崔麗娟，劉玉明．正交試驗(yàn)法優(yōu)選川芎中阿魏酸的提取工藝［Ｊ］． 齊魯藥事，２００５，２４（１９）：５６０－５６１．

２結(jié)果與分析

２．１單因素試驗(yàn)結(jié)果

２．１．１乙醇體積分?jǐn)?shù)對川芎阿魏酸提取率的影響從圖３可以看出，乙醇體積分?jǐn)?shù)對川芎阿魏酸提取率的影響比較明顯，隨著乙醇體積分?jǐn)?shù)的增加阿魏酸提取率增加，在乙醇體積分?jǐn)?shù)為７０％、８０％時(shí)提取率較高，當(dāng)乙醇體積分?jǐn)?shù)高于８０％時(shí)阿魏酸提取率下降。因此，選擇乙醇體積分?jǐn)?shù)為６０％～８０％作為阿魏酸的提取溶劑。

２．１．２提取壓力對川芎阿魏酸提取率的影響從圖４可以看出，在１００～３００ ＭＰａ下，隨著提取壓力的增大川芎阿魏酸提取率也隨之升高，當(dāng)提取壓力超過３００ ＭＰａ后，阿魏酸的提取率變化不明顯。可能在３００ ＭＰａ壓力下川芎細(xì)胞壁已被破壞，溶劑在壓力作用下已完全進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，并將有效成分基本溶出，所以加大壓力提取率變化不大。因此，選擇壓力２００～４００ ＭＰａ為宜。

２．１．３固液比對川芎阿魏酸提取率的影響從圖５可以看出，隨著固液比的變化，川芎阿魏酸提取率逐漸升高，在固液比為１∶４０后，阿魏酸提取率變化緩慢，基本影響不大，說明在４０倍乙醇用量時(shí)，阿魏酸已經(jīng)基本被溶解出來。因此，選擇固液比為１∶４０為最佳。

２．１．４提取時(shí)間對川芎阿魏酸提取率的影響通過試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，隨著提取時(shí)間的延長，阿魏酸的提取率基本沒有變化，提取時(shí)間對其基本無影響。高壓提取過程中當(dāng)壓力升高，溶劑在壓力下進(jìn)入到細(xì)胞內(nèi)部，溶解有效成分，當(dāng)壓力在瞬間消失后，在壓力差的作用下細(xì)胞膨脹爆炸，有效成分被溶出，因此提取時(shí)間長短對阿魏酸提取率影響不大。

２．２正交試驗(yàn)結(jié)果

由表２可以看出，根據(jù)極差分析，影響川芎阿魏酸提取率的主次因素為Ｂ、Ａ、Ｄ、Ｃ，乙醇體積分?jǐn)?shù)對川芎阿魏酸提取率的影響最大，其次是提取壓力和固液比，提取時(shí)間的影響最小，得到的最優(yōu)組合為Ａ２Ｂ２Ｃ３Ｄ２，即高壓提取最優(yōu)條件為提取壓力３００ ＭＰａ、體積分?jǐn)?shù)７０％乙醇溶液、提取時(shí)間３．０ ｍｉｎ、固液比１∶５０。

２．３驗(yàn)證試驗(yàn)

按正交試驗(yàn)最優(yōu)工藝條件重復(fù)驗(yàn)證提?。?次，川芎阿魏酸的提取率依次為０．５２０、０．５２４、０．５２６ ｍｇ／ｇ，平均為０．５２３ ｍｇ／ｇ。說明最優(yōu)工藝穩(wěn)定、可行。

２．４與回流提取方法對比試驗(yàn)

取相同重量的川芎樣品，分別按回流提取和超高壓提取的最優(yōu)工藝，得到２種提取液。通過測定２種提取方法所得到的阿魏酸含量基本相同，無顯著差異（表４）。從表４可以看出，超高壓提取與回流提取相比，具有提取時(shí)間短、提取次數(shù)少、不需要加熱，節(jié)省能源并避免加熱對成分的破壞。但是從溶劑用量上超高壓提取方法較回流提取要多。

３小結(jié)

根據(jù)正交試驗(yàn)結(jié)果，結(jié)合節(jié)約能源等綜合考慮，確定常溫超高壓提取川芎阿魏酸的最優(yōu)工藝為提取溶劑體積分?jǐn)?shù)７０％乙醇溶液、提取壓力３００ ＭＰａ、固液比１∶５０、提取時(shí)間３．０ ｍｉｎ。在最優(yōu)工藝下，通過測定阿魏酸提取率為０．５２３ ｍｇ／ｇ。與回流提取方法相比較，超高壓提取技術(shù)具有常溫不加熱、提取時(shí)間短、雜質(zhì)少、穩(wěn)定性高、節(jié)約能源等優(yōu)點(diǎn)，作為一種新型的提取工藝，其應(yīng)用前景廣闊。

參考文獻(xiàn)：

［１］ 范宋玲，張建軍，熊帶水，等．川芎微波提取工藝優(yōu)選［Ｊ］．中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，２０１１，１７（１８）：４６－４８．

［２］ 王玥，杜守穎，吳清，等.川芎中阿魏酸的閃式提取工藝研究［Ｊ］． 北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，２０１２，３５（８）： ５５９－５６２．

［３］ 余昕，朱燁，張春，等．不同干燥方法對川芎不同部位阿魏酸含量的影響［Ｊ］．中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，２０１２，１８（６）：１００－１０３．

［４］ ＣＨＥＮ Ｒ Ｚ， ＭＥＮＧ Ｆ Ｌ， ＺＨＡＮＧ Ｓ Ｑ， ｅｔ ａｌ． Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｕｌｔｒａｈｉｇｈ ｐｒｅｓｓｕｒｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｏｎ ｙｉｅｌｄｓ ａｎｄ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅ ｆｒｏｍ ｇｉｎｓｅｎｇ［Ｊ］． Ｓｅｐ Ｐｕｒｉｆｉｃ Ｔｅｃｈｎｏｌ， ２００９，６６（2）：３４０－３４６．

［５］ 陳瑞戰(zhàn)，張守勤，王長征．常溫超高壓提取人參皂苷［Ｊ］．化工學(xué)報(bào)，２００５，５６（５）：９１１－９１４．

［６］ 陳瑞戰(zhàn)，張守勤，王長征，等．超高壓提取西洋參皂苷工藝研究［Ｊ］．農(nóng)業(yè)工程學(xué)報(bào)，２００５，２１（５）：１５０－１５４．

［７］ ＰＲＡＳＡＤ Ｋ Ｎ， ＹＡＮＧ Ｂ， ＺＨＡＯ Ｍ Ｍ， ｅｔ ａｌ． Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ uｌｔｒａｓｏｎｉｃａｔｉｏｎ ｏｒ hｉｇｈ－ｐｒｅｓｓｕｒｅ eｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ fｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｆｒｏｍ Lｉｔｃｈｉ ｆｒｕｉｔ ｐｅｒｉｃａｒｐ［Ｊ］． Ｊ Ｆｏｏｄ Ｐｒｏｃｅｓｓ Ｅｎｇ，２００９，３２（6）：８２８－８４３．

［８］ ＰＲＡＳＡＤ Ｋ Ｎ， ＹＡＮＧ Ｅ， ＹＩ Ｃ， ｅｔ ａｌ． Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｈｉｇｈ ｐｒｅｓｓｕｒｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｏｎ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｍ ｙｉｅｌｄ， ｔｏｔａｌ ｐｈｅｎｏｌｉｃ ｃｏｎｔｅｎｔ ａｎｄ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｌｏｎｇａｎ ｆｒｕｉｔ ｐｅｒｉｃａｒｐ［Ｊ］． Innovative Food Science & Emerging Technologies，２００９，１０（2）：１５５－１５９．

［９］ ＺＨＡＮＧ Ｓ Ｑ， ＸＩ Ｊ， ＷＡＮＧ Ｃ Ｚ． Ｈｉｇｈ ｈｙｄｒｏｓｔａｔｉｃ ｐｒｅｓｓｕｒｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ flａｖｏｎｏｉｄｓ ｆｒｏｍ ｐｒｏｐｏｌｉｓ［Ｊ］． Ｊ Ｃｈｅｍ Ｔｅｃｈｎｏｌ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ，２００５，８０（1）：５０－５４．

［１０］ ＸＩ Ｊ．Ｃａｆｆｅｉｎｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｆｒｏｍ ｇｒｅｅｎ ｔｅａ ｌｅａｖｅｓ ａｓｓｉｓｔｅｄ ｂｙ ｈｉｇｈ ｐｒｅｓｓｕｒｅ ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｆｏｏｄ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ， ２００９，９４（1）：１０５－１０９．

［１１］ ＸＩ Ｊ， ＳＨＥＮ Ｄ Ｊ，ＺＨＡＯ Ｓ，ｅｔ ａｌ． Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ ｆｒｏｍ ｇｒｅｅｎ ｔｅａ ｌｅａｖｅｓ ｕｓｉｎｇ ａ ｈｉｇｈ ｈｙｄｒｏｓｔａｔｉｃ ｐｒｅｓｓｕｒｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ［Ｊ］． Ｉｎｔｅｒ Ｊ Ｐｈａｒｍ，２００９，３８２（1-2）：１３９－１４３．

［１２］ ＸＩ Ｊ， ＺＨＡＯ Ｓ， ＬＵ Ｂ Ｂ， ｅｔ ａｌ． Ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｍａｊｏｒ ｃａｔｅｃｈｉｎｓ ｆｒｏｍ ｇｒｅｅｎ ｔｅａ ｂｙ ｕｌｔｒａｈｉｇｈ ｐｒｅｓｓｕｒｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｉｎｔｅｒ Ｊ Ｐｈａｒｍ，２０１０，386（1-２）：２２９－２３１．

［１３］ 崔麗娟，劉玉明．正交試驗(yàn)法優(yōu)選川芎中阿魏酸的提取工藝［Ｊ］． 齊魯藥事，２００５，２４（１９）：５６０－５６１．