茶多酚維E硒對(duì)小鼠抗氧化功能的影響

李小平+黃遠(yuǎn)英+殷光玲+蔣麗

摘要：茶多酚、維生素Ｅ和硒都是較強(qiáng)的抗氧化劑，對(duì)多種疾病具有預(yù)防和治療作用。試驗(yàn)選用５０只昆明清潔級(jí)小鼠，采用不同劑量茶多酚維Ｅ硒膠囊連續(xù)灌胃３０ ｄ，通過(guò)測(cè)定小鼠受試前后體重、血清超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活力及８Ｇｙ６０Ｃｏγ射線(xiàn)造模前后肝組織丙二醛（ＭＤＡ）含量、ＳＯＤ和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）活力，研究茶多酚維Ｅ硒膠囊對(duì)小鼠抗氧化系統(tǒng)的影響。結(jié)果顯示，與模型對(duì)照組相比，各劑量茶多酚維Ｅ硒膠囊對(duì)造模后小鼠肝組織ＳＯＤ活力無(wú)顯著影響；７５、１５０ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ茶多酚維E硒膠囊對(duì)造模后小鼠肝組織ＭＤＡ含量和ＧＳＨ－Ｐｘ活力也無(wú)顯著影響；３００ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ茶多酚維E硒膠囊劑量組可顯著降低造模后小鼠肝組織ＭＤＡ含量，提高其ＧＳＨ－Ｐｘ活力。以上結(jié)果為茶多酚、維生素Ｅ和硒在食品及保健品中的聯(lián)合應(yīng)用提供了理論依據(jù)。

關(guān)鍵詞：茶多酚；維生素Ｅ；硒；小鼠；抗氧化

中圖分類(lèi)號(hào)：Ｒ２８４；Ｑ９４６．８文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：Ａ文章編號(hào)：0439－８114（２０14）09－2114-03

Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ Ｔｅａ Ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌ，Ｖｉｔｍｉｎ Ｅ ａｎｄ Ｓｅｌｅｎｉｕｍ ｏｎ the Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ Ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｍｉｃｅ

ＬＩ Ｘｉａｏ－ｐｉｎｇ， ＨＵＡＮＧ Ｙｕａｎ－ｙｉｎｇ， ＹＩＮ Ｇｕａｎｇ－ｌｉｎｇ， ＪＩＡＮＧ Ｌｉ

（Ｂｙ－ｈｅａｌｔｈ Ｃｏ， Ｌｔｄ， Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ５１０６６３， Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｔｅａ ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌ， ＶＥ ａｎｄ ｓｅｌｅｎｉｕｍ are ｓｔｒｏｎｇ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｓ， useful ｆｏｒ ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｈｅｒａｐｙ ｏｆ ｍａｎｙ ｄｉｓｅａｓｅｓ． ５０ ＣＬ Ｋｕｎｍｉｎｇ ｍｉｃｅ ｗｅｒｅ ｒａｎｄｏｍｌｙ ａｌｌｏｃａｔｅｄ ｔｏ ５ ｇｒｏｕｐｓ ａｎｄ ｔｒｅａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｄｏｓｅ ｏｆ ｃａｐｓｕｌｅ ｗｉｔｈ ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌ， ＶＥ ａｎｄ ｓｅｌｅｎｉｕｍ for ３０ ｄａｙｓ． Ｔｈｅ ｉｎｄｉｃｅｓ ｆｏｒ ｅｖａｌｕａｔｉｎｇ ｅｆｆｅｃｔs ｏｆ ｔｈｅ ｃａｐｓｕｌｅｓ ｏｎ ｔｈｅ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ｓｙｓｔｅｍｓ ｏｆ ｍｉｃｅ ｉｎｃｌｕｄｅｄ ｗｅｉｇｈｔ ｃｈａｎｇｅ ｏｆ ｔｈｅ ｔｅｓｔ ｍｉｃｅ， ＳＯＤ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｂｌｏｏｄ ｒｅｄ ｃｅｌｌｓ， ａｎｄ ＭＤＡ ｃｏｎｔｅｎｔ， ＳＯＤ ａｎｄ ＧＳＨ－Ｐｘ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｆ ｌｉｖｅｒ ｂｅｆｏｒｅ ａｎｄ ａｆｔｅｒ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｗｉｔｈ ８Ｇｙ６０Ｃｏγｒａｙ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅｒｅ ｗｅｒｅ ｎｏ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ ｉｎ ｅｆｆｅｃｔs ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｄｏｓｅｓ ｃａｐｓｕｌｅ ｏｎ ｌｉｖｅｒ ＳＯＤ ａｃｔｉｖｉｔｙ． ７５ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ ａｎｄ １５０ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ ｃａｐｓｕｌｅ ｈａｄ ｎｏ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｎ ＭＤＡ ｃｏｎｔｅｎｔ ａｎｄ ＧＳＨ－Ｐｘ ａｃｔｉｖｉｔｙ of liver． Ｂｕｔ ３００ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ ｃａｐｓｕｌｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ＭＤＡ ｃｏｎｔｅｎｔ（１３２．９±１９．４ ＶＳ １７０．１±２２．９） ａｎｄ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ＧＳＨ－Ｐｘ ａｃｔｉｖｉｔｙ （２３．０±２．６４ ＶＳ １９．１±２．９７） ｏｆ ｌｉｖｅｒ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ control ｇｒｏｕｐ． Ｉｔ will provide ａ ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ ｆｏｒ comprehensive ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｅａ ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌ， ＶＥ ａｎｄ ｓｅｌｅｎｉｕｍ ｉｎ ｈｅａｌｔｈ ｆｏｏｄｓ．

Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： ｔｅａ ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌ； ｖｉｔａｍｉｎ Ｅ； ｓｅｌｅｎｉｕｍ； mice ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ

生理?xiàng)l件下機(jī)體的氧化與抗氧化系統(tǒng)處于動(dòng)態(tài)平衡，而在多種氧化應(yīng)激條件下（如低氧、中毒和輻照等），機(jī)體氧化與抗氧化平衡失調(diào)，從而誘導(dǎo)氧化應(yīng)激的產(chǎn)生。目前證實(shí)氧化應(yīng)激能誘發(fā)動(dòng)脈粥樣硬化、高血壓等多種慢性疾病，嚴(yán)重影響人類(lèi)健康。因此利用抗氧化劑清除氧化應(yīng)激產(chǎn)生的自由基成為化學(xué)、生物和醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。

茶葉中對(duì)人體健康最有益的物質(zhì)是具有強(qiáng)抗氧化能力的茶多酚，是茶葉中多酚類(lèi)物質(zhì)的總稱(chēng)。主要可分為兒茶素類(lèi)、黃酮及黃酮醇類(lèi)、花青素類(lèi)、酚酸及縮酚酸類(lèi)。茶多酚的抗氧化作用是由于兒茶素Ｂ環(huán)和Ｃ環(huán)上的酚羥基持有供氫體的活性，在氧化過(guò)程中生成鄰醌類(lèi)及聯(lián)苯酚醌。它可以有效清除氧自由基和脂類(lèi)自由基，防止脂質(zhì)過(guò)氧化，從而預(yù)防心血管疾病、腫瘤等疾病的發(fā)生［１］。已有研究表明抗氧化劑之間存在良好的協(xié)同效應(yīng)，這種效應(yīng)同樣適用于茶多酚。現(xiàn)有研究證實(shí)，茶多酚和維生素共同使用可增加茶多酚的抗氧化［２－４］、抑菌［５－７］、降低自由基損傷［８］和保鮮［９］等作用。而在動(dòng)物試驗(yàn)中，國(guó)內(nèi)外大量文獻(xiàn)證明了維生素Ｅ和硒聯(lián)合使用能起到協(xié)同增效的抗損傷［１０］、抗氧化作用［１１，１２］。因此本試驗(yàn)用茶多酚維Ｅ硒膠囊對(duì)小鼠進(jìn)行抗氧化功能研究，初步探討多種抗氧化劑的協(xié)同增效機(jī)理。

１材料與方法

１．１樣品

湯臣倍健茶多酚維Ｅ硒膠囊，批號(hào)：２０１０１００１，送檢品為粉末（膠囊內(nèi)容物），推薦成人服用量為０．９ ｇ／（人·ｄ）。試驗(yàn)時(shí)樣品均采用蒸餾水配制和稀釋。

１．２試驗(yàn)動(dòng)物

清潔級(jí)昆明種雌性小鼠共５０只，體重１８～２２ ｇ，由四川省中醫(yī)藥科學(xué)院提供［合格證號(hào)：ＳＣＸＫ（川）２００８－１９］。試驗(yàn)前檢疫１周，整個(gè)試驗(yàn)過(guò)程中，試驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)于屏障級(jí)動(dòng)物房（許可證號(hào)：四川省試驗(yàn)動(dòng)物管理委員會(huì)第００１號(hào)），動(dòng)物自由攝食和飲水，動(dòng)物房溫度２０～２３ ℃，相對(duì)濕度５５％～６５％。

１．３劑量分組

茶多酚維Ｅ硒膠囊按成人每日推薦服用量的５倍、１０倍、２０倍設(shè)３個(gè)劑量組，即７５、１５０和３００ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ，每天分別稱(chēng)?。罚?、１５０和３００ ｍｇ受試物，各加蒸餾水至２０ ｍＬ混懸，按每１００ ｇ體重２ ｍＬ給動(dòng)物灌胃。另設(shè)模型對(duì)照組和空白對(duì)照組。

１．４主要儀器和試劑

７２００型分光光度計(jì)，恒溫水浴箱，微量可調(diào)加樣器，高速離心機(jī)和低速離心機(jī)，漩渦混運(yùn)器，ＤＹ８９－１型電動(dòng)玻璃勻漿機(jī)；丙二醛（ＭＤＡ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）測(cè)定試劑盒（購(gòu)于南京建成生物工程研究所，４ ℃冰箱保存）；三氯甲烷、無(wú)水乙醇、冰乙酸等均為分析純。

１．５試驗(yàn)方法

５０只小鼠隨機(jī)分為５個(gè)組，每組１０只。茶多酚維E硒膠囊各劑量組小鼠每天灌胃給予不同劑量的茶多酚維E硒膠囊；模型對(duì)照組和空白對(duì)照組小鼠灌胃給予等體積蒸餾水，連續(xù)３０ ｄ。試驗(yàn)開(kāi)始前、試驗(yàn)中期及試驗(yàn)結(jié)束時(shí)對(duì)各組小鼠稱(chēng)重。３０ ｄ后，尾部取血測(cè)超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活力。同時(shí)，除空白對(duì)照組外，各組給予８Ｇｙ６０Ｃｏγ射線(xiàn)全身一次性照射，照射后第四天處死全部動(dòng)物，?。埃病埃?ｇ肝組織，用冷生理鹽水制成１０％的肝勻漿，４ ０００ ｒ／ｍｉｎ離心５ ｍｉｎ。直接取１０％肝勻漿上清液１００ μＬ測(cè)定ＭＤＡ含量，１０％肝勻漿上清液稀釋?zhuān)保氨逗笕。保?μＬ測(cè)定ＳＯＤ活力，１０％肝勻漿上清液稀釋?zhuān)矗氨逗笕。玻埃?μＬ測(cè)定ＧＳＨ－Ｐｘ活力。測(cè)定的具體方法按照南京建成生物工程研究所購(gòu)買(mǎi)的ＭＤＡ、ＳＯＤ和ＧＳＨ－Ｐｘ試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

１．６數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

試驗(yàn)數(shù)據(jù)均以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。采用ＰＥＭＳ３．０《中國(guó)醫(yī)學(xué)百科全書(shū)·醫(yī)學(xué)統(tǒng)計(jì)學(xué)》統(tǒng)計(jì)軟件包（第三版）對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。

２結(jié)果與分析

２．１茶多酚維Ｅ硒膠囊對(duì)小鼠體重的影響

由表１可見(jiàn)，在試驗(yàn)期間，各組小鼠體重差異不顯著（Ｐ＞０．０５），表明茶多酚維Ｅ硒膠囊對(duì)小鼠體重?zé)o顯著影響。

２．２茶多酚維Ｅ硒膠囊對(duì)造模前小鼠血清ＳＯＤ活力的影響

由表２可見(jiàn)，造模前各組小鼠血清中ＳＯＤ活力差異不顯著（Ｐ＞０．０５）。表明茶多酚維Ｅ硒膠囊對(duì)小鼠血清ＳＯＤ活力無(wú)顯著影響。

２．３茶多酚維Ｅ硒膠囊對(duì)小鼠肝組織ＭＤＡ含量的影響

由表３可見(jiàn)，模型對(duì)照組小鼠肝組織中ＭＤＡ含量顯著（Ｐ＜０．０５）高于空白對(duì)照組，茶多酚維Ｅ硒膠囊３００ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ劑量組小鼠的ＭＤＡ含量與模型對(duì)照組相比顯著（Ｐ＜０．０５）降低，茶多酚維Ｅ硒膠囊７５和１５０ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ劑量組與模型對(duì)照組相比差異均不顯著（Ｐ＞０．０５）。

２．４茶多酚維Ｅ硒膠囊對(duì)小鼠肝組織ＳＯＤ活力的影響

由表４可見(jiàn)，模型對(duì)照組小鼠肝組織中ＳＯＤ活力顯著（Ｐ＜０．０５）低于空白對(duì)照組，茶多酚維Ｅ硒膠囊各劑量組小鼠的ＳＯＤ活力與模型對(duì)照組相比差異均不顯著（Ｐ＞０．０５）。

２．５茶多酚維Ｅ硒膠囊對(duì)小鼠肝組織ＧＳＨ－Ｐｘ活力的影響

由表５可見(jiàn)，模型對(duì)照組小鼠肝組織中ＧＳＨ－Ｐｘ活力顯著（Ｐ＜０．０５）低于空白對(duì)照組，茶多酚維Ｅ硒膠囊３００ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ劑量組小鼠的ＧＳＨ－Ｐｘ活力與模型對(duì)照組相比顯著（Ｐ＜０．０５）升高，茶多酚維Ｅ硒膠囊７５和１５０ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ劑量組與模型對(duì)照組相比差異均不顯著（Ｐ＞０．０５）。

３小結(jié)與討論

自由基是機(jī)體正常代謝過(guò)程中的產(chǎn)物，具有強(qiáng)氧化性，機(jī)體內(nèi)自由基過(guò)?？梢鹬|(zhì)過(guò)氧化及生物膜損壞，導(dǎo)致腫瘤及心血管疾病等［１３］。茶多酚具有吸收放射性物質(zhì)毒素的能力，口服和外用茶多酚能抵抗輻射產(chǎn)生的輕度放射病及治療血細(xì)胞減少癥。王岳飛等［１４］的研究表明，茶多酚對(duì)輻照損傷引起的ＮＩＨ小白鼠及荷瘤小鼠紅細(xì)胞與白細(xì)胞減少均有明顯抑制作用，表明茶多酚對(duì)輻照所致的血象損傷有明顯的防護(hù)作用?，F(xiàn)有研究表明，茶多酚和維生素Ｃ、維生素Ｅ之間都存在協(xié)同抗氧化作用［１，１５］。維生素Ｅ和硒都是人和動(dòng)物體內(nèi)的必需營(yíng)養(yǎng)素，除發(fā)揮重要的生理功能外，同時(shí)使用能互補(bǔ)、協(xié)同、增效［１６－１８］。

本試驗(yàn)應(yīng)用茶多酚、維生素Ｅ和硒的混合物對(duì)小鼠進(jìn)行抗氧化研究，而肝臟作為機(jī)體的生化代謝中心也是對(duì)脂質(zhì)過(guò)氧化最敏感的器官，肝臟損傷與氧化應(yīng)激有明顯關(guān)系，因此本研究選擇肝組織ＭＤＡ、ＳＯＤ和 ＧＳＨ－Ｐｘ作為研究指標(biāo)，初步探討茶多酚維Ｅ硒膠囊的抗氧化活性。結(jié)果表明，茶多酚維Ｅ硒膠囊各劑量對(duì)試驗(yàn)小鼠體重和造模前血清ＳＯＤ活力均無(wú)影響，提示茶多酚維Ｅ硒膠囊在７５～３００ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ劑量范圍內(nèi)對(duì)小鼠無(wú)毒副作用。在本研究范圍內(nèi)，低、中濃度（７５、１５０ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ）茶多酚維Ｅ硒膠囊劑量組與模型對(duì)照組相比沒(méi)有顯著增強(qiáng)小鼠的自由基清除能力，而高濃度（３００ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ）可明顯降低小鼠肝組織ＭＤＡ含量、升高ＧＳＨ－Ｐｘ活力。王岳飛等［１９］研究顯示，茶多酚與幾種天然抗氧化物質(zhì)的協(xié)同抗氧化作用與抗氧化物質(zhì)本身的抗氧化能力、抗氧化物的有效濃度等因素有關(guān)?？寡趸镏g的協(xié)同作用在抗氧化物本身有效濃度較低時(shí)協(xié)同作用也較低，隨著有效濃度增加，協(xié)同抗氧化作用增加，達(dá)到峰值后繼續(xù)增加有效濃度，協(xié)同作用減弱。協(xié)同作用的機(jī)理都是通過(guò)基于氧化還原電位差的偶聯(lián)氧化。偶聯(lián)作用一方面降低了直接反應(yīng)的兩種物質(zhì)間的點(diǎn)位落差，使反應(yīng)易于進(jìn)行；另一方面，偶聯(lián)的抗氧化劑油水分配系數(shù)互為補(bǔ)充，在某一體系中合理分布，充分發(fā)揮每一種抗氧化劑的功能，因而茶多酚與多種抗氧化劑聯(lián)合應(yīng)用后，其抗氧化效果大大增強(qiáng)［１５］，這也為茶多酚與其他抗氧化物配伍作為食品或保健品的原料或添加劑提供了理論依據(jù)。

４結(jié)論

本研究結(jié)果顯示，輻照后，模型對(duì)照組小鼠的肝組織ＳＯＤ活力和ＧＳＨ－Ｐｘ活力與空白對(duì)照組相比均顯著（Ｐ＜０．０５）降低、ＭＤＡ含量與空白對(duì)照組相比顯著（Ｐ＜０．０５）升高，說(shuō)明造模成功。茶多酚維Ｅ硒膠囊３００ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ劑量組小鼠的肝組織ＧＳＨ－Ｐｘ活力與模型對(duì)照組相比顯著（Ｐ＜０．０５）升高，ＭＤＡ含量與模型對(duì)照組相比顯著（Ｐ＜０．０５）降低。綜上所述，茶多酚維Ｅ硒膠囊對(duì)試驗(yàn)動(dòng)物模型具有良好的抗氧化活性。

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１．６數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

試驗(yàn)數(shù)據(jù)均以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。采用ＰＥＭＳ３．０《中國(guó)醫(yī)學(xué)百科全書(shū)·醫(yī)學(xué)統(tǒng)計(jì)學(xué)》統(tǒng)計(jì)軟件包（第三版）對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。

２結(jié)果與分析

２．１茶多酚維Ｅ硒膠囊對(duì)小鼠體重的影響

由表１可見(jiàn)，在試驗(yàn)期間，各組小鼠體重差異不顯著（Ｐ＞０．０５），表明茶多酚維Ｅ硒膠囊對(duì)小鼠體重?zé)o顯著影響。

２．２茶多酚維Ｅ硒膠囊對(duì)造模前小鼠血清ＳＯＤ活力的影響

由表２可見(jiàn)，造模前各組小鼠血清中ＳＯＤ活力差異不顯著（Ｐ＞０．０５）。表明茶多酚維Ｅ硒膠囊對(duì)小鼠血清ＳＯＤ活力無(wú)顯著影響。

２．３茶多酚維Ｅ硒膠囊對(duì)小鼠肝組織ＭＤＡ含量的影響

由表３可見(jiàn)，模型對(duì)照組小鼠肝組織中ＭＤＡ含量顯著（Ｐ＜０．０５）高于空白對(duì)照組，茶多酚維Ｅ硒膠囊３００ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ劑量組小鼠的ＭＤＡ含量與模型對(duì)照組相比顯著（Ｐ＜０．０５）降低，茶多酚維Ｅ硒膠囊７５和１５０ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ劑量組與模型對(duì)照組相比差異均不顯著（Ｐ＞０．０５）。

２．４茶多酚維Ｅ硒膠囊對(duì)小鼠肝組織ＳＯＤ活力的影響

由表４可見(jiàn)，模型對(duì)照組小鼠肝組織中ＳＯＤ活力顯著（Ｐ＜０．０５）低于空白對(duì)照組，茶多酚維Ｅ硒膠囊各劑量組小鼠的ＳＯＤ活力與模型對(duì)照組相比差異均不顯著（Ｐ＞０．０５）。

２．５茶多酚維Ｅ硒膠囊對(duì)小鼠肝組織ＧＳＨ－Ｐｘ活力的影響

由表５可見(jiàn)，模型對(duì)照組小鼠肝組織中ＧＳＨ－Ｐｘ活力顯著（Ｐ＜０．０５）低于空白對(duì)照組，茶多酚維Ｅ硒膠囊３００ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ劑量組小鼠的ＧＳＨ－Ｐｘ活力與模型對(duì)照組相比顯著（Ｐ＜０．０５）升高，茶多酚維Ｅ硒膠囊７５和１５０ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ劑量組與模型對(duì)照組相比差異均不顯著（Ｐ＞０．０５）。

３小結(jié)與討論

自由基是機(jī)體正常代謝過(guò)程中的產(chǎn)物，具有強(qiáng)氧化性，機(jī)體內(nèi)自由基過(guò)?？梢鹬|(zhì)過(guò)氧化及生物膜損壞，導(dǎo)致腫瘤及心血管疾病等［１３］。茶多酚具有吸收放射性物質(zhì)毒素的能力，口服和外用茶多酚能抵抗輻射產(chǎn)生的輕度放射病及治療血細(xì)胞減少癥。王岳飛等［１４］的研究表明，茶多酚對(duì)輻照損傷引起的ＮＩＨ小白鼠及荷瘤小鼠紅細(xì)胞與白細(xì)胞減少均有明顯抑制作用，表明茶多酚對(duì)輻照所致的血象損傷有明顯的防護(hù)作用。現(xiàn)有研究表明，茶多酚和維生素Ｃ、維生素Ｅ之間都存在協(xié)同抗氧化作用［１，１５］。維生素Ｅ和硒都是人和動(dòng)物體內(nèi)的必需營(yíng)養(yǎng)素，除發(fā)揮重要的生理功能外，同時(shí)使用能互補(bǔ)、協(xié)同、增效［１６－１８］。

本試驗(yàn)應(yīng)用茶多酚、維生素Ｅ和硒的混合物對(duì)小鼠進(jìn)行抗氧化研究，而肝臟作為機(jī)體的生化代謝中心也是對(duì)脂質(zhì)過(guò)氧化最敏感的器官，肝臟損傷與氧化應(yīng)激有明顯關(guān)系，因此本研究選擇肝組織ＭＤＡ、ＳＯＤ和 ＧＳＨ－Ｐｘ作為研究指標(biāo)，初步探討茶多酚維Ｅ硒膠囊的抗氧化活性。結(jié)果表明，茶多酚維Ｅ硒膠囊各劑量對(duì)試驗(yàn)小鼠體重和造模前血清ＳＯＤ活力均無(wú)影響，提示茶多酚維Ｅ硒膠囊在７５～３００ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ劑量范圍內(nèi)對(duì)小鼠無(wú)毒副作用。在本研究范圍內(nèi)，低、中濃度（７５、１５０ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ）茶多酚維Ｅ硒膠囊劑量組與模型對(duì)照組相比沒(méi)有顯著增強(qiáng)小鼠的自由基清除能力，而高濃度（３００ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ）可明顯降低小鼠肝組織ＭＤＡ含量、升高ＧＳＨ－Ｐｘ活力。王岳飛等［１９］研究顯示，茶多酚與幾種天然抗氧化物質(zhì)的協(xié)同抗氧化作用與抗氧化物質(zhì)本身的抗氧化能力、抗氧化物的有效濃度等因素有關(guān)?？寡趸镏g的協(xié)同作用在抗氧化物本身有效濃度較低時(shí)協(xié)同作用也較低，隨著有效濃度增加，協(xié)同抗氧化作用增加，達(dá)到峰值后繼續(xù)增加有效濃度，協(xié)同作用減弱。協(xié)同作用的機(jī)理都是通過(guò)基于氧化還原電位差的偶聯(lián)氧化。偶聯(lián)作用一方面降低了直接反應(yīng)的兩種物質(zhì)間的點(diǎn)位落差，使反應(yīng)易于進(jìn)行；另一方面，偶聯(lián)的抗氧化劑油水分配系數(shù)互為補(bǔ)充，在某一體系中合理分布，充分發(fā)揮每一種抗氧化劑的功能，因而茶多酚與多種抗氧化劑聯(lián)合應(yīng)用后，其抗氧化效果大大增強(qiáng)［１５］，這也為茶多酚與其他抗氧化物配伍作為食品或保健品的原料或添加劑提供了理論依據(jù)。

４結(jié)論

本研究結(jié)果顯示，輻照后，模型對(duì)照組小鼠的肝組織ＳＯＤ活力和ＧＳＨ－Ｐｘ活力與空白對(duì)照組相比均顯著（Ｐ＜０．０５）降低、ＭＤＡ含量與空白對(duì)照組相比顯著（Ｐ＜０．０５）升高，說(shuō)明造模成功。茶多酚維Ｅ硒膠囊３００ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ劑量組小鼠的肝組織ＧＳＨ－Ｐｘ活力與模型對(duì)照組相比顯著（Ｐ＜０．０５）升高，ＭＤＡ含量與模型對(duì)照組相比顯著（Ｐ＜０．０５）降低。綜上所述，茶多酚維Ｅ硒膠囊對(duì)試驗(yàn)動(dòng)物模型具有良好的抗氧化活性。

參考文獻(xiàn)：

［１］ 趙保路．茶多酚的抗氧化作用［Ｊ］．科學(xué)通報(bào)，２００２，１６（４７）： １２０６－１２１０．

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［７］ 張微云，葉瑋．茶多酚與維生素Ｃ聯(lián)合應(yīng)用抑制口腔產(chǎn)臭細(xì)菌產(chǎn)生揮發(fā)性硫化物的體外研究［Ｊ］．中華臨床醫(yī)師雜志，２０１１，５（１８）：５４６２－５４６４．

［８］ 李清釗，關(guān)維俊，劉英莉，等．茶多酚聯(lián)合維生素Ｃ對(duì)阿霉素腎毒性的保護(hù)作用［Ｊ］．工業(yè)衛(wèi)生與職業(yè)病，２００３，２９（５）：２７３－２７５．

［９］ 蔣建平，陳洪，周曉媛．以茶多酚為主體的抗氧化劑聯(lián)用對(duì)冷卻肉保鮮作用的研究［Ｊ］．株洲工學(xué)院學(xué)報(bào)，２００５，１９（１）：１７－１９．

［１０］ ＣＥＭＥＫ Ｍ， Ｂ?譈Ｙ?譈ＫＢＥＮ Ａ， Ｂ?譈Ｙ?譈ＫＯＫＵＲＯＧＬＵ Ｍ Ｅ， ｅｔ ａｌ． Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ｒｏｌｅｓ ｏｆ ｖｉｔａｍｉｎ Ｅ （α－ｔｏｃｏｐｈｅｒｏｌ）， ｓｅｌｅｎｉｕｍ ａｎｄ ｖｉｔａｍｉｎ Ｅ ｐｌｕｓ ｓｅｌｅｎｉｕｍ ｉｎ ｏｒｇａｎｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｔｏｘｉｃｉｔｙ ｉｎ ｖｉｖｏ： Ａ ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ ｓｔｕｄｙ［Ｊ］． Ｐｅｓｔｉｃｉｄｅ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，２０１０，９６（３）：１１３－１１８

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［１２］ ＹＯＳＥＦＩＮＡＳＡＢ Ａ，ＧＨＡＳＳＥＭＩ Ｆ， ＳＡＤＥＧＨＩ Ｈ． Ｔｈｅ ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｖｉｔａｍｉｎ Ｅ ａｎｄ ｓｅｌｅｎｉｕｍ ｏｎ ｌｉｖｅｒ ｔｉｓｓｕｅ ａｎｄ ｌｉｖｅｒ ｅｎｚｙｍｅｓ ｉｎ ｆｒｕｃｔｏｓｅ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｄｉａｂｅｔｉｃ ｒａｔｓ［Ｊ］． Ｒｅｓｅａｒｃｈ ｉｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，２０１２，７（５）：１２５８－１２９０．

［１３］ 鄭建仙．功能性食品［Ｍ］．北京：中國(guó)輕工業(yè)出版社，１９９９．１６４－１６６．

［１４］ 王岳飛，唐德松，樸宰日．茶多酚對(duì)荷瘤小鼠輻射損傷的影響［Ｊ］．中華放射醫(yī)學(xué)與防護(hù)雜志，２００４，２４（３）：２６３－２６４．

［１５］ 胡秀芳，毛建妹，蔣麗萍，等．茶多酚與其他抗氧化劑的協(xié)同作用［Ｊ］．茶葉，２０００，２６（２）：６６－６９．

［１６］ ＳＩＶＥＲＴＳＥＮ Ｔ， ＶＩＥ Ｅ， ＢＥＲＮＨＯＦＴ Ａ， ｅｔ ａｌ． Ｖｉｔａｍｉｎ Ｅ ａｎｄ ｓｅｌｅｎｉｕｍ ｐｌａｓｍａ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ ｉｎ ｗｅａｎｌｉｎｇ ｐｉｇｓ ｕｎｄｅｒ ｆｉｅｌｄ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｉｎ Ｎｏｒｗｅｇｉａｎ ｐｉｇ ｈｅｒｄｓ［Ｊ］． Ａｃｔａ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｉａ Ｓｃａｎｄｉｎａｖｉｃａ，２００７，４９：１－９．

［１７］ ＹＡＫＡＲＹＩＬＭＡＺ Ｆ， ＧＵＬＩＴＥＲ Ｓ， ＳＡＶＡＳ Ｂ， ｅｔ ａｌ． Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｖｉｔａｍｉｎ Ｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｎ ｐｅｒｏｘｉｓｏｍｅ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｏｒ－ａｃｔｉｖａｔｅｄ ｒｅｃｅｐｔｏｒ－ａｌｐｈａ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎｄ ｉｎｓｕｌｉｎ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｎｏｎ－ａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｓｔｅａｔｏｈｅｐａｔｉｔｉｓ：Ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ａ ｐｉｌｏｔ ｓｔｕｄｙ［Ｊ］．Ｉｎｔｅｒｎａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｊｏｕｒｎａｌ，２００７，３７（４）：２２９－２３５．

［１８］ ＫＵＮＥ Ｇ， ＷＡＴＳＯＮ Ｌ． Ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ ｃａｎｃｅｒ ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ａｎｄ ｔｈｅ ｄｉｅｔａｒｙ ｍｉｃｒｏｎｕｔｒｉｅｎｔｓ ｆｏｌａｔｅ， ｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ， ｖｉｔａｍｉｎｓ Ｂ６， Ｂ１２， Ｃ， Ｅ，ｓｅｌｅｎｉｕｍ， ａｎｄ ｌｙｃｏｐｅｎｅ［Ｊ］． Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ ａｎｄ Ｃａｎｃｅｒ， ２００６，５６（１１）：１１－２１．

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１．６數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

試驗(yàn)數(shù)據(jù)均以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。采用ＰＥＭＳ３．０《中國(guó)醫(yī)學(xué)百科全書(shū)·醫(yī)學(xué)統(tǒng)計(jì)學(xué)》統(tǒng)計(jì)軟件包（第三版）對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。

２結(jié)果與分析

２．１茶多酚維Ｅ硒膠囊對(duì)小鼠體重的影響

由表１可見(jiàn)，在試驗(yàn)期間，各組小鼠體重差異不顯著（Ｐ＞０．０５），表明茶多酚維Ｅ硒膠囊對(duì)小鼠體重?zé)o顯著影響。

２．２茶多酚維Ｅ硒膠囊對(duì)造模前小鼠血清ＳＯＤ活力的影響

由表２可見(jiàn)，造模前各組小鼠血清中ＳＯＤ活力差異不顯著（Ｐ＞０．０５）。表明茶多酚維Ｅ硒膠囊對(duì)小鼠血清ＳＯＤ活力無(wú)顯著影響。

２．３茶多酚維Ｅ硒膠囊對(duì)小鼠肝組織ＭＤＡ含量的影響

由表３可見(jiàn)，模型對(duì)照組小鼠肝組織中ＭＤＡ含量顯著（Ｐ＜０．０５）高于空白對(duì)照組，茶多酚維Ｅ硒膠囊３００ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ劑量組小鼠的ＭＤＡ含量與模型對(duì)照組相比顯著（Ｐ＜０．０５）降低，茶多酚維Ｅ硒膠囊７５和１５０ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ劑量組與模型對(duì)照組相比差異均不顯著（Ｐ＞０．０５）。

２．４茶多酚維Ｅ硒膠囊對(duì)小鼠肝組織ＳＯＤ活力的影響

由表４可見(jiàn)，模型對(duì)照組小鼠肝組織中ＳＯＤ活力顯著（Ｐ＜０．０５）低于空白對(duì)照組，茶多酚維Ｅ硒膠囊各劑量組小鼠的ＳＯＤ活力與模型對(duì)照組相比差異均不顯著（Ｐ＞０．０５）。

２．５茶多酚維Ｅ硒膠囊對(duì)小鼠肝組織ＧＳＨ－Ｐｘ活力的影響

由表５可見(jiàn)，模型對(duì)照組小鼠肝組織中ＧＳＨ－Ｐｘ活力顯著（Ｐ＜０．０５）低于空白對(duì)照組，茶多酚維Ｅ硒膠囊３００ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ劑量組小鼠的ＧＳＨ－Ｐｘ活力與模型對(duì)照組相比顯著（Ｐ＜０．０５）升高，茶多酚維Ｅ硒膠囊７５和１５０ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ劑量組與模型對(duì)照組相比差異均不顯著（Ｐ＞０．０５）。

３小結(jié)與討論

自由基是機(jī)體正常代謝過(guò)程中的產(chǎn)物，具有強(qiáng)氧化性，機(jī)體內(nèi)自由基過(guò)剩可引起脂質(zhì)過(guò)氧化及生物膜損壞，導(dǎo)致腫瘤及心血管疾病等［１３］。茶多酚具有吸收放射性物質(zhì)毒素的能力，口服和外用茶多酚能抵抗輻射產(chǎn)生的輕度放射病及治療血細(xì)胞減少癥。王岳飛等［１４］的研究表明，茶多酚對(duì)輻照損傷引起的ＮＩＨ小白鼠及荷瘤小鼠紅細(xì)胞與白細(xì)胞減少均有明顯抑制作用，表明茶多酚對(duì)輻照所致的血象損傷有明顯的防護(hù)作用。現(xiàn)有研究表明，茶多酚和維生素Ｃ、維生素Ｅ之間都存在協(xié)同抗氧化作用［１，１５］。維生素Ｅ和硒都是人和動(dòng)物體內(nèi)的必需營(yíng)養(yǎng)素，除發(fā)揮重要的生理功能外，同時(shí)使用能互補(bǔ)、協(xié)同、增效［１６－１８］。

本試驗(yàn)應(yīng)用茶多酚、維生素Ｅ和硒的混合物對(duì)小鼠進(jìn)行抗氧化研究，而肝臟作為機(jī)體的生化代謝中心也是對(duì)脂質(zhì)過(guò)氧化最敏感的器官，肝臟損傷與氧化應(yīng)激有明顯關(guān)系，因此本研究選擇肝組織ＭＤＡ、ＳＯＤ和 ＧＳＨ－Ｐｘ作為研究指標(biāo)，初步探討茶多酚維Ｅ硒膠囊的抗氧化活性。結(jié)果表明，茶多酚維Ｅ硒膠囊各劑量對(duì)試驗(yàn)小鼠體重和造模前血清ＳＯＤ活力均無(wú)影響，提示茶多酚維Ｅ硒膠囊在７５～３００ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ劑量范圍內(nèi)對(duì)小鼠無(wú)毒副作用。在本研究范圍內(nèi)，低、中濃度（７５、１５０ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ）茶多酚維Ｅ硒膠囊劑量組與模型對(duì)照組相比沒(méi)有顯著增強(qiáng)小鼠的自由基清除能力，而高濃度（３００ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ）可明顯降低小鼠肝組織ＭＤＡ含量、升高ＧＳＨ－Ｐｘ活力。王岳飛等［１９］研究顯示，茶多酚與幾種天然抗氧化物質(zhì)的協(xié)同抗氧化作用與抗氧化物質(zhì)本身的抗氧化能力、抗氧化物的有效濃度等因素有關(guān)?？寡趸镏g的協(xié)同作用在抗氧化物本身有效濃度較低時(shí)協(xié)同作用也較低，隨著有效濃度增加，協(xié)同抗氧化作用增加，達(dá)到峰值后繼續(xù)增加有效濃度，協(xié)同作用減弱。協(xié)同作用的機(jī)理都是通過(guò)基于氧化還原電位差的偶聯(lián)氧化。偶聯(lián)作用一方面降低了直接反應(yīng)的兩種物質(zhì)間的點(diǎn)位落差，使反應(yīng)易于進(jìn)行；另一方面，偶聯(lián)的抗氧化劑油水分配系數(shù)互為補(bǔ)充，在某一體系中合理分布，充分發(fā)揮每一種抗氧化劑的功能，因而茶多酚與多種抗氧化劑聯(lián)合應(yīng)用后，其抗氧化效果大大增強(qiáng)［１５］，這也為茶多酚與其他抗氧化物配伍作為食品或保健品的原料或添加劑提供了理論依據(jù)。

４結(jié)論

本研究結(jié)果顯示，輻照后，模型對(duì)照組小鼠的肝組織ＳＯＤ活力和ＧＳＨ－Ｐｘ活力與空白對(duì)照組相比均顯著（Ｐ＜０．０５）降低、ＭＤＡ含量與空白對(duì)照組相比顯著（Ｐ＜０．０５）升高，說(shuō)明造模成功。茶多酚維Ｅ硒膠囊３００ ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ劑量組小鼠的肝組織ＧＳＨ－Ｐｘ活力與模型對(duì)照組相比顯著（Ｐ＜０．０５）升高，ＭＤＡ含量與模型對(duì)照組相比顯著（Ｐ＜０．０５）降低。綜上所述，茶多酚維Ｅ硒膠囊對(duì)試驗(yàn)動(dòng)物模型具有良好的抗氧化活性。

參考文獻(xiàn)：

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［７］ 張微云，葉瑋．茶多酚與維生素Ｃ聯(lián)合應(yīng)用抑制口腔產(chǎn)臭細(xì)菌產(chǎn)生揮發(fā)性硫化物的體外研究［Ｊ］．中華臨床醫(yī)師雜志，２０１１，５（１８）：５４６２－５４６４．

［８］ 李清釗，關(guān)維俊，劉英莉，等．茶多酚聯(lián)合維生素Ｃ對(duì)阿霉素腎毒性的保護(hù)作用［Ｊ］．工業(yè)衛(wèi)生與職業(yè)病，２００３，２９（５）：２７３－２７５．

［９］ 蔣建平，陳洪，周曉媛．以茶多酚為主體的抗氧化劑聯(lián)用對(duì)冷卻肉保鮮作用的研究［Ｊ］．株洲工學(xué)院學(xué)報(bào)，２００５，１９（１）：１７－１９．

［１０］ ＣＥＭＥＫ Ｍ， Ｂ?譈Ｙ?譈ＫＢＥＮ Ａ， Ｂ?譈Ｙ?譈ＫＯＫＵＲＯＧＬＵ Ｍ Ｅ， ｅｔ ａｌ． Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ｒｏｌｅｓ ｏｆ ｖｉｔａｍｉｎ Ｅ （α－ｔｏｃｏｐｈｅｒｏｌ）， ｓｅｌｅｎｉｕｍ ａｎｄ ｖｉｔａｍｉｎ Ｅ ｐｌｕｓ ｓｅｌｅｎｉｕｍ ｉｎ ｏｒｇａｎｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｔｏｘｉｃｉｔｙ ｉｎ ｖｉｖｏ： Ａ ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ ｓｔｕｄｙ［Ｊ］． Ｐｅｓｔｉｃｉｄｅ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，２０１０，９６（３）：１１３－１１８

［１１］ 萬(wàn)敏，麥康森，馬洪明，等．硒和維生素Ｅ對(duì)皺紋盤(pán)鮑血清抗氧化酶活力的影響［Ｊ］．水生生物學(xué)報(bào)，２００６，２８（５）：４９６－５０３．

［１２］ ＹＯＳＥＦＩＮＡＳＡＢ Ａ，ＧＨＡＳＳＥＭＩ Ｆ， ＳＡＤＥＧＨＩ Ｈ． Ｔｈｅ ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｖｉｔａｍｉｎ Ｅ ａｎｄ ｓｅｌｅｎｉｕｍ ｏｎ ｌｉｖｅｒ ｔｉｓｓｕｅ ａｎｄ ｌｉｖｅｒ ｅｎｚｙｍｅｓ ｉｎ ｆｒｕｃｔｏｓｅ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｄｉａｂｅｔｉｃ ｒａｔｓ［Ｊ］． Ｒｅｓｅａｒｃｈ ｉｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，２０１２，７（５）：１２５８－１２９０．

［１３］ 鄭建仙．功能性食品［Ｍ］．北京：中國(guó)輕工業(yè)出版社，１９９９．１６４－１６６．

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［１６］ ＳＩＶＥＲＴＳＥＮ Ｔ， ＶＩＥ Ｅ， ＢＥＲＮＨＯＦＴ Ａ， ｅｔ ａｌ． Ｖｉｔａｍｉｎ Ｅ ａｎｄ ｓｅｌｅｎｉｕｍ ｐｌａｓｍａ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ ｉｎ ｗｅａｎｌｉｎｇ ｐｉｇｓ ｕｎｄｅｒ ｆｉｅｌｄ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｉｎ Ｎｏｒｗｅｇｉａｎ ｐｉｇ ｈｅｒｄｓ［Ｊ］． Ａｃｔａ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｉａ Ｓｃａｎｄｉｎａｖｉｃａ，２００７，４９：１－９．

［１７］ ＹＡＫＡＲＹＩＬＭＡＺ Ｆ， ＧＵＬＩＴＥＲ Ｓ， ＳＡＶＡＳ Ｂ， ｅｔ ａｌ． Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｖｉｔａｍｉｎ Ｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｎ ｐｅｒｏｘｉｓｏｍｅ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｏｒ－ａｃｔｉｖａｔｅｄ ｒｅｃｅｐｔｏｒ－ａｌｐｈａ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎｄ ｉｎｓｕｌｉｎ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｎｏｎ－ａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｓｔｅａｔｏｈｅｐａｔｉｔｉｓ：Ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ａ ｐｉｌｏｔ ｓｔｕｄｙ［Ｊ］．Ｉｎｔｅｒｎａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｊｏｕｒｎａｌ，２００７，３７（４）：２２９－２３５．

［１８］ ＫＵＮＥ Ｇ， ＷＡＴＳＯＮ Ｌ． Ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ ｃａｎｃｅｒ ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ａｎｄ ｔｈｅ ｄｉｅｔａｒｙ ｍｉｃｒｏｎｕｔｒｉｅｎｔｓ ｆｏｌａｔｅ， ｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ， ｖｉｔａｍｉｎｓ Ｂ６， Ｂ１２， Ｃ， Ｅ，ｓｅｌｅｎｉｕｍ， ａｎｄ ｌｙｃｏｐｅｎｅ［Ｊ］． Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ ａｎｄ Ｃａｎｃｅｒ， ２００６，５６（１１）：１１－２１．

［１９］ 王岳飛，徐平，李磊，等．茶多酚與幾種天然抗氧化物質(zhì)的協(xié)同作用研究［Ｊ］．茶葉科學(xué)，２０１０，３０（２）：１０９－１１４．