臨床血液檢驗(yàn)中兩種不同細(xì)菌鑒定法的應(yīng)用價(jià)值

胡錦霞

臨床血液檢驗(yàn)中兩種不同細(xì)菌鑒定法的應(yīng)用價(jià)值

胡錦霞

目的 探討兩種不同細(xì)菌鑒定法在臨床血液檢驗(yàn)中的應(yīng)用價(jià)值。方法 同時(shí)使用常規(guī)藥敏試驗(yàn)和直接藥敏試驗(yàn)對620份陽性血液標(biāo)本進(jìn)行檢測，然后對兩種檢測方法藥敏結(jié)果的符合率及各細(xì)菌的鑒定結(jié)果進(jìn)行分析。結(jié)果 兩組檢測方法在G+球菌敏感度、G-桿菌敏感度、耐藥的符合率等方面差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論 常規(guī)藥敏試驗(yàn)和直接藥敏試驗(yàn)的符合率較高，但直接藥敏試驗(yàn)的檢測操作更簡單，且時(shí)間也比較短，可將其推廣應(yīng)用于細(xì)菌感染的臨床血液檢驗(yàn)中。

細(xì)菌；鑒定；常規(guī)試驗(yàn)；直接藥敏試驗(yàn)

近年來，抗生素在臨床上的應(yīng)用已越來越廣泛，這就使各種細(xì)菌的耐藥性及對抗生素的敏感性發(fā)生了一定的變異，從而給臨床檢驗(yàn)工作帶來了一定難度。研究發(fā)現(xiàn)，對臨床細(xì)菌進(jìn)行檢測時(shí)，可通過血液細(xì)菌鑒定法對患者的血液樣品進(jìn)行檢測，從而為相關(guān)疾病的診斷及治療提供有效的依據(jù)[1]。本研究結(jié)合筆者的工作經(jīng)驗(yàn)，主要就兩種不同細(xì)菌鑒定法在臨床血液檢驗(yàn)中的應(yīng)用進(jìn)行分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 資料均選自我院2012年7月至2013

年9月收治的620例發(fā)熱合并全身感染的患者，排除及納入標(biāo)準(zhǔn)：無血液系統(tǒng)疾??；無凝血功能障礙；入院前48 h內(nèi)未服用任何藥物及未接受任何治療。通過無菌操作在患者發(fā)熱初期或高峰期采集620份陽性血液標(biāo)本，每例患者采集20 ml靜脈血，然后以冷藏方式對樣本進(jìn)行保存，并盡快送到檢驗(yàn)科進(jìn)行檢驗(yàn)。

1.2 方法 同時(shí)使用常規(guī)藥敏試驗(yàn)和直接藥敏試驗(yàn)對每份樣本進(jìn)行檢測，然后對兩種檢測方法各細(xì)菌鑒定結(jié)果及藥敏結(jié)果的符合率進(jìn)行分析。

1.2.1 常規(guī)藥敏試驗(yàn) 將血液樣本分別接種在巧克力平板、麥康凱平板及血平板上，在濃度為5%、溫度為35 ℃的二氧化碳下孵育18～24 h后，取出菌落涂片，對其進(jìn)行革蘭染色鏡檢，并結(jié)合檢測結(jié)果選擇相應(yīng)的觸酶或進(jìn)行氧化酶試驗(yàn)，使用URITEST-3000生物鑒定儀對其進(jìn)行鑒定，并進(jìn)行藥敏試驗(yàn)[2]。

1.2.2 直接藥敏試驗(yàn) ①先將血液樣本接種在URITEST-3000型生化血培養(yǎng)儀對其進(jìn)行自動(dòng)培養(yǎng)及檢測，當(dāng)檢測出陽性樣品后，通過無菌注射器抽取10 ml陽性樣品，注入無菌試管，然后行以梯度方式對細(xì)菌進(jìn)行離心分離以1 500 r/min（離心半徑r＝10 cm），速度對全部陽性樣品進(jìn)行離心，5～10 min后收集上層清液，再以3 000 r/min進(jìn)行離心，15～20 min后去除上清液，洗滌2次后通過磷酸緩沖液（PBS）進(jìn)行重懸[3]。②另外取懸液涂片20 μl對陽性樣品進(jìn)行革蘭染色，同時(shí)進(jìn)行倒置并使用顯微鏡對其進(jìn)行觀察，如果是革蘭陽性菌（G+），且形態(tài)為鏈狀，則使用濃度為5%的羊血血平板+MH對其進(jìn)行初級(jí)藥敏試驗(yàn)，此外，結(jié)合試驗(yàn)結(jié)果選擇合適的酶，菌液的濃度調(diào)整為6.2×108cfu/L后，將接種在藥敏綜合板（NC21）上，然后對其進(jìn)行細(xì)菌鑒定及藥敏試驗(yàn)；常規(guī)接種時(shí)，在MH平板上拭以1～2滴懸液進(jìn)行藥敏試驗(yàn)及細(xì)菌鑒定，并借助無菌拭子以均勻方式涂于平板上，然后貼上合適的藥敏紙片，結(jié)合2005NCCLSI標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)對陽性樣品中度敏感、敏感性以及耐藥進(jìn)行判斷[4]。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 使用SPSS 10.0軟件對相關(guān)數(shù)據(jù)資料進(jìn)行分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

表1 兩種檢測方法抗生素敏感度檢出符合率情況

根據(jù)表1可知，G－球菌和G+桿菌的中度敏感、敏感、耐藥符合率分別為92.4%、95.1%、95.8%及94.5%、96.6%、96.9%，因此，兩種方法的陽性樣品藥敏試驗(yàn)的符合率均較高，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

3 討論

相關(guān)調(diào)查顯示，當(dāng)患者受到多重耐藥菌的感染后，很容易出現(xiàn)細(xì)菌性疾病，如敗血癥、全身感染等，這主要是因?yàn)榛颊邫C(jī)體內(nèi)的細(xì)菌已產(chǎn)生一定的耐藥性，若相關(guān)細(xì)菌的耐藥性出現(xiàn)一定增強(qiáng)，會(huì)給患者病情的診斷及治療帶來一定影響，嚴(yán)重時(shí)還會(huì)威脅患者的生命安全[5]。在臨床診斷過程中，應(yīng)通過高效、快速的方法對細(xì)菌進(jìn)行鑒定，并對其耐藥性能進(jìn)行檢驗(yàn)，才能為臨床治療提供有效依據(jù)。本研究同時(shí)使用常規(guī)藥敏試驗(yàn)和直接藥敏試驗(yàn)對620份陽性血液標(biāo)本進(jìn)行檢測，此外，還對樣品中的G+桿菌、G－球菌進(jìn)行了藥敏試驗(yàn)與檢測，根據(jù)結(jié)果可知，兩種檢測方法的陽性樣品藥敏試驗(yàn)的總符合率均較高，且檢測結(jié)果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。但是，與常規(guī)藥敏試驗(yàn)相比，直接藥敏試驗(yàn)的檢測時(shí)間較短，且簡單方便，因此可廣泛應(yīng)用于相關(guān)疾病的臨床診斷中。

[1] 張茂海.兩種細(xì)菌鑒定法在臨床血液檢驗(yàn)中的應(yīng)用研究[J].湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2011,31(12):101-102.

[2] 趙碩,朱以軍,單小云,等.576株血液分離病原菌的分布及耐藥性分析[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2011,21(9):130-132.

[3] 張鴻.武漢市青山區(qū)血培養(yǎng)病原菌的分布及耐藥性分析[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2011,29(4):114-115.

[4] 曹敏華.2659份血培養(yǎng)中病原菌的分布及耐藥性[J].海南醫(yī)學(xué), 2012,23(8):120-121.

[5] 李慧.兩種細(xì)菌鑒定法在臨床血液檢驗(yàn)中的應(yīng)用[J].現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué),2011,38(9):190-191.

R446.5

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1673-5846(2014)08-0177-02

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