用GC/MS法分析選奇滴丸中防風(fēng)與羌活揮發(fā)油成分

劉 倩，于燕莉，畢云生，梁 竹

(濟(jì)南軍區(qū)總醫(yī)院藥劑科，濟(jì)南 250031)

選奇滴丸源于《蘭室秘藏》，是選奇湯改進(jìn)制劑，由羌活、防風(fēng)、黃芩、甘草組成。羌活、防風(fēng)長(zhǎng)于祛風(fēng)鎮(zhèn)痛，善治頭面部疼痛，黃芩清熱，甘草調(diào)和諸藥；可升清降濁醒腦，主治風(fēng)熱挾痰上壅，頭痛目眩，眉棱骨痛。研究表明，羌活揮發(fā)油有明顯的鎮(zhèn)痛作用，可顯著提高小鼠痛閾，同時(shí)可擴(kuò)張腦血管，增加血流量，改善腦缺血和缺氧[1]。防風(fēng)揮發(fā)油除能夠增加小鼠痛閾之外，其水提物對(duì)動(dòng)物有較強(qiáng)的中樞鎮(zhèn)痛作用，并對(duì)小鼠有顯著的抗焦慮和抗驚厥作用[2,3]?？梢姄]發(fā)油類成分是選奇湯中防風(fēng)和羌活的主要有效成分。為了克服傳統(tǒng)湯劑的缺點(diǎn)，將選奇湯做成滴丸。為了更好地控制選奇滴丸的質(zhì)量，本研究采用GC/MS法對(duì)選奇滴丸中揮發(fā)性成分進(jìn)行研究，并用相同條件和方法對(duì)防風(fēng)和羌活兩單味藥材的揮發(fā)油與選奇滴丸復(fù)方進(jìn)行比較分析，為選奇滴丸的物質(zhì)基礎(chǔ)與配伍機(jī)制研究奠定基礎(chǔ)，為提高選奇滴丸的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供依據(jù)。

1 儀器和試藥

1.1 儀器 GC-QP2010型GC/MS聯(lián)用儀器(包括GC/MS solution色譜工作站，日本島津公司)；BS223S電子天平(精度0.001 g，德國(guó)賽多利斯公司)。

1.2 試藥 防風(fēng)、羌活、黃芩、甘草(購(gòu)自山東宏濟(jì)堂醫(yī)藥連鎖有限公司)，均經(jīng)濟(jì)南軍區(qū)總醫(yī)院制劑室于燕莉副主任藥師鑒定。選奇滴丸(濟(jì)南軍區(qū)總醫(yī)院制劑室自制，批號(hào) 20120411、20120520、20120526)。乙酸乙酯 (色譜純, 批號(hào) 20071126，天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司)；水為純化水。

2 方 法

2.1 樣品的制備 (1)供試品溶液：取選奇滴丸40粒，精密稱定，置圓底燒瓶中，加水100 ml，按《中華人民共和國(guó)藥典》2010年版一部附錄ⅩD揮發(fā)油提取方法(甲法)進(jìn)行提取。自揮發(fā)油提取器上端加水使充滿刻度部分，再加乙酸乙酯2 ml，加熱回流提取8 h。放冷至室溫，分取乙酸乙酯層，提取器再用乙酸乙酯少量洗滌數(shù)次，洗液與提取液合并，置10 ml容量瓶中，用乙酸乙酯定容至刻度，即得[4-6]。(2)陰性對(duì)照溶液：取不含防風(fēng)、羌活的滴丸，同法制成陰性對(duì)照溶液。

2.2 單味藥材揮發(fā)油提取 分別取防風(fēng)、羌活100 g，按《中華人民共和國(guó)藥典》2010年版一部附錄ⅩD揮發(fā)油提取方法(甲法)進(jìn)行水蒸氣回流提取8 h，放冷置室溫，得淡黃色油滴和棕色油滴，分別取油滴40 μl，置5 ml的容量瓶中，用乙酸乙酯溶解、定容后進(jìn)樣分析。

2.3 GC/MS聯(lián)用條件 (1)氣相色譜條件：參見參考文獻(xiàn)[6]，分流比49∶1。 (2) 質(zhì)譜條件：電子轟擊源EI；離子源溫度230 ℃；接口溫度280 ℃；電子能量70 eV； 掃描范圍20～600原子質(zhì)量單位。 溶劑延遲時(shí)間3 min； 倍增電壓0.8 kV。

2.4 數(shù)據(jù)分析 所分辨的質(zhì)譜在NIST08標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜庫(kù)中檢索。

3 結(jié) 果

按2.3項(xiàng)下條件，用GC/MS方法對(duì)選奇滴丸、防風(fēng)、羌活的揮發(fā)油及陰性對(duì)照樣品進(jìn)行分析，GC/MS測(cè)定總離子流圖見圖1。通過對(duì)各樣品TIC圖譜比較，采用GC/MS分析工作站NIST08標(biāo)準(zhǔn)譜庫(kù)進(jìn)行檢索，鑒定出54種成分，通過峰面積歸一化法計(jì)算各成分相對(duì)含量，分析結(jié)果見表1。

圖1 揮發(fā)油的總離子流圖

表1 各揮發(fā)油樣品GC/MS測(cè)定結(jié)果

(續(xù)表1)

各揮發(fā)油樣品GC/MS比較分析由表1可見，共鑒定出54個(gè)成分。選奇滴丸中主要揮發(fā)性成分有α-蒎烯、γ-萜品烯、6，6-二甲基-2-亞甲基-二環(huán)[3.1.1]庚烷、芹菜腦等。單味藥中有些成分在選奇滴丸中消失，如月桂烯、藍(lán)桉醇、鄰苯二甲酸二丁酯，并且選奇滴丸中有新成分產(chǎn)生，主要有順-2-甲基-5-(2-丙基)-2-環(huán)己烯-1-醇、麝香草酚、噴鼻螺萜醇、丁烯酜內(nèi)酯、1,2 -苯二甲酸丁酯8-甲基壬酯等，這可能與合煎中的化學(xué)反應(yīng)(如氧化、還原、縮合和水解反應(yīng)等)與物理變化(如増溶作用、吸附作用等)有關(guān)。羌活揮發(fā)油的特征性成分為藍(lán)桉醇、N-苯基-1-萘胺等。防風(fēng)揮發(fā)油的特征性成分為辛酸、2-壬酮、對(duì)-聚傘花素醇-8等。陰性對(duì)照樣品共鑒定出2種成分，分別為苯乙酮和棕櫚酸，防風(fēng)和羌活中均未檢出，表明陰性實(shí)驗(yàn)無干擾，與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致，稍有不同可能與藥材產(chǎn)地、品種和提取方法有關(guān)。

4 討 論

本研究通過GC/MS法比較分析了選奇滴丸揮發(fā)油及組方藥材防風(fēng)和羌活揮發(fā)油的化學(xué)組成，發(fā)現(xiàn)防風(fēng)和羌活的特征性揮發(fā)成分在選奇滴丸揮發(fā)油總離子圖中均可檢出，且分離效果較好，陰性實(shí)驗(yàn)無干擾。本研究為揭示選奇滴丸的效應(yīng)物質(zhì)基礎(chǔ)提供了依據(jù)。由于方劑是一個(gè)復(fù)雜化學(xué)物質(zhì)系統(tǒng)，要闡明其效應(yīng)物質(zhì)尚需從多方面、多效應(yīng)、多角度綜合分析評(píng)價(jià)。因此，對(duì)選奇滴丸的其他效應(yīng)物質(zhì)部分及成分與生物效應(yīng)的關(guān)系需要進(jìn)行系統(tǒng)研究，這有助于揭示其物質(zhì)基礎(chǔ)的配伍應(yīng)用規(guī)律。

【參考文獻(xiàn)】

[1] 李云霞,高春華,沙 明.中藥羌活化學(xué)成分及藥理作用研究進(jìn)展[J].遼寧中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2004,6(1):22-23.

Li YunXia,Gao ChunHua,Sha Ming. Research advances in chemical composition and pharmacological activity in Chinese materia medica Notopterygium incisum[J]. J Liaoning Coll Tradit Chin Med,2004, 6(1):22-23. In Chinese.

[2] 徐惠波, 孫曉波,趙全成, 等. 羌活揮發(fā)油的藥理作用研究[J].中草藥, 1991, 22(1):28-30.

Xu HuiBo,Sun XiaoBo,Zhao QuanCheng,etal. Research on pharmacological activity of the volatile oil of notopterygium[J].Chin Herb Med, 1991, 22(1):28-30. In Chinese.

[3] 高詠莉.生藥防風(fēng)的化學(xué)成分與藥理作用研究進(jìn)展[J].山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2004, 35(2):216-218.

Gao YongLi. Research advances in chemical composition and pharmacological activity of crude drugSaposhnikoviadivaricata[J].J Shanxi Med Univ,2004,35(2):216-218. In Chinese.

[4] 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典.2010年版 一部[S].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010:附錄63.

State Pharmacopoeia Committee. Pharmacopoeia of the People’s Republic of China. 2010 ed.Vol 1[S]. Beijing:Chinese Medical Science Press,2010: Appendix 63. In Chinese.

[5] 羅興平,王蘭霞,張伯崇,等.氣相色譜法測(cè)定強(qiáng)力救心滴丸中冰片的含量[J].藥物分析雜志,2002,22(1):39-41.

Luo XingPing,Wang LanXia,Zhang BoChong,etal. Quantitative determination of borneol in Qiangli Jiuxin dripping pills by GC-FID[J]. J Pharm Anal,2002,22(1):39-41. In Chinese with English abstract.

[6] 陳帥華,余蓮芳,李曉如,等. 藥對(duì)防風(fēng)-羌活與其單味藥揮發(fā)油共有組分的分析[J].中南大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)，2010,41(2): 440-445.

Chen ShuaiHua,Yu LianFang,Li XiaoRu,etal. Comparative analysis of common volatile constituents in herbal pairradixSaposhnikoviae-rhizomaseuradixnotopterygiiand its single herbs[J]. J Cent South Univ(Sci Technol), 2010,41(2): 440-445. In Chinese with English abstract.