乳酸菌陰道膠囊用于恢復陰道正常菌群380例

楊 英，邱偉芬

（浙江省龍泉市中醫(yī)院，浙江 龍泉 323700）

陰道乳酸桿菌是健康婦女陰道內(nèi)的優(yōu)勢菌，經(jīng)過抗生素或抗真菌藥物陰道局部治療的陰道炎患者，其乳酸桿菌含量明顯降低，陰道內(nèi)正常菌群及微環(huán)境遭到不同程度的破壞，導致陰道炎反復發(fā)作及耐藥或出現(xiàn)繼發(fā)性其他病原菌感染。筆者通過比較乳酸菌陰道膠囊鞏固陰道乳酸桿菌的含量，產(chǎn)H2O2桿菌比例的變化，以及兩組患者陰道炎的復發(fā)率，觀察乳酸菌陰道膠囊恢復陰道正常菌群的作用，為陰道炎的微生態(tài)治療提供依據(jù)。

1 資料與方法

1．1 一般資料

選擇2010年至2012年在我院門診就診的陰道炎患者752例，年齡21～52歲，其中外陰陰道假絲酵母菌病207例，滴蟲性陰道炎183例，菌性陰道病175例，萎縮性陰道炎187例，在全身及局部用藥對癥治療后，復查病原體轉(zhuǎn)陰的患者。納入標準：初診以外陰瘙癢及陰道分泌物增多為主訴的患者，確診陰道炎，經(jīng)陰道局部或全身用藥，臨床癥狀及體征好轉(zhuǎn)或消失，月經(jīng)干凈或停藥后3～5 d復查陰道分泌物病原菌陰性；復查陰道分泌物高倍鏡檢提示陰道清潔度Ⅰ～Ⅱ度，但乳酸桿菌低于1個“＋”或未檢出。排除標準：陰道炎經(jīng)治療臨床癥狀并未好轉(zhuǎn)或加重者；復查感染病原體持續(xù)陽性者；淋病奈瑟菌、衣原體及人乳頭瘤病毒(HPV)感染者；有重要臟器疾病；宮頸上皮內(nèi)瘤變或?qū)m頸癌患者。隨機分為試驗組380例和對照組372例，接受口頭知情同意。

1．2 方法

治療方法：試驗組于月經(jīng)干凈或停藥后3～5 d給予乳酸菌陰道膠囊(西安正浩生物制藥有限公司，國藥準字H10980293，規(guī)格為每枚0．25 g），每次2枚，每晚 1次，清洗外陰后放置陰道深處，10 d為1個療程，共 l～3個療程，于療程結(jié)束后3～5 d復查，并取陰道分泌物檢測乳酸桿菌。告知患者治療及觀察期間避免性生活及勿用抗生素。對照組門診隨訪，作陰道分泌物乳酸桿菌檢測。隨訪觀察6個月，觀察陰道分泌物乳酸桿菌和陰道炎復發(fā)情況。

試驗方法：標本采集窺器暴露宮頸以厭氧菌采集專用拭子于陰道上1／3側(cè)壁順時針旋轉(zhuǎn)取樣，插入拭子套中，送實驗室，接種于乳酸桿菌選擇性培養(yǎng)基(LBS)[1]中，37℃ 10%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48 h，以乳酸桿菌在培養(yǎng)基生長的面積來進行半定量計算乳酸桿菌的量，再將選出的乳酸桿菌接種到H2O2鑒定培養(yǎng)基(MRS瓊脂培養(yǎng)基中加入 0．25 g／L I′MB 和過氧化物酶 0．01 g ／L，遇 H2O2后菌落呈藍色)。另以無菌棉拭子定量(0．1 mL)取陰道上1／3側(cè)壁分泌物，以1 mL 0．9%氯化鈉注射液稀釋涂片革蘭染色，于超高倍鏡下計數(shù)乳酸桿菌。

陰道乳酸桿菌鑒定標準：革蘭染色陽性，無芽孢，細長彎曲或呈球桿狀、桿狀單個或雙鏈狀，無動力；微需氧，5% ～10%CO2環(huán)境下或厭氧環(huán)境下生長，pH為5．6～6．2，觸酶陰性，細胞色素缺失，分解葡萄糖，終產(chǎn)物為乳酸。在超高倍鏡檢下計數(shù)1 000倍鏡下每視野乳酸桿菌的數(shù)量，參照Nugent陰道分泌物評分標準[2]，即 0～1個 ／1 000 F記為“＋”；1～4個 ／1 000 F記為“＋＋”；5～30個 ／1 000 F記為“＋＋＋”；＞30個 ／1 000 F記為“＋＋＋＋”。正常人群陰道乳酸桿菌數(shù)量超過“＋＋”。

1．3 統(tǒng)計學處理

所得數(shù)據(jù)采用SPSS 10．0統(tǒng)計軟件，不同組間乳酸桿菌數(shù)量分布比較采用 χ2檢驗，P＜0．05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2．1 陰道乳酸桿菌檢出率與陽性菌株產(chǎn)H2O2乳酸桿菌的比例

結(jié)果見表1?？梢姡囼灲M乳酸桿菌檢出率明顯高于對照組(χ2＝112．3，P ＜ 0．05)；試驗組培養(yǎng)乳酸桿菌菌落占培養(yǎng)基面積1／2 以上者明顯高于對照組(χ2＝52．86，P ＜ 0．01)；試驗組培養(yǎng)乳酸桿菌菌落產(chǎn) H2O2，陽性率明顯高于對照組(χ2＝74．63，P ＜ 0．01)。

2．2 乳酸桿菌數(shù)量分布

試驗組超高倍鏡下乳酸桿菌計數(shù)超過“＋＋”的308例，明顯高于對照組的 38 例(χ2＝377．09，P ＜0．05)。見表 2。

表2 兩組陰道分泌物涂片超高倍鏡下陰道乳酸桿菌分布比較[例（%）]

2．3 各類陰道炎復發(fā)率

見表3。可見，試驗組總復發(fā)率明顯低于對照組(χ2＝65．50，P ＜ 0．01)。

表3 兩組不同類型陰道炎的復發(fā)情況比較[例(%)]

3 討論

健康婦女陰道內(nèi)存在著多種微生物群落，它們之間或共生或拮抗，構(gòu)成了相互制約、相互協(xié)調(diào)、動態(tài)的陰道微生態(tài)平衡，其中兼性厭氧乳酸桿菌作為陰道內(nèi)正常菌群，在維持陰道微生態(tài)平衡中發(fā)揮了重要作用。

陰道乳酸桿菌具有抵抗內(nèi)源性及外源性病原菌生長繁殖的作用[3]，機制包括：競爭黏附作用，乳酸桿菌可黏附于陰道壁，通過占位作用抑制病原菌的黏附和感染；產(chǎn)生乳酸，降低陰道pH，抑制多種病原菌的繁殖；分泌H2O2，殺滅病原菌；產(chǎn)生抑制物如細菌素、細菌素樣物質(zhì)、表面活性物質(zhì)，抑制革蘭陽性菌、革蘭陰性菌及真菌；與病原菌競爭營養(yǎng)物質(zhì)；免疫防御功能，對不良免疫反應有下調(diào)作用。研究發(fā)現(xiàn)，乳酸桿菌對多種抗菌藥物敏感，經(jīng)陰道局部或全身應用抗生素的陰道炎患者，其陰道乳酸桿菌檢出率明顯降低[4]。目前，臨床上對于各種類型陰道炎(細菌性陰道病、滴蟲性陰道炎、外陰陰道假絲酵母菌病、淋菌性陰道炎、泌尿系感染等)的治療主要采用抗菌、抗真菌藥物等，由此引起陰道內(nèi)乳酸桿菌數(shù)量下降、生理防御功能減退，導致陰道炎反復發(fā)作甚至耐藥，以及繼發(fā)性混合性感染。

乳酸菌陰道膠囊是有益菌乳酸菌的活菌制劑，其主要成分為活腸鏈球菌，在陰道內(nèi)通過分解陰道上皮的糖原產(chǎn)生大量的乳酸、乙酸等有機酸，實現(xiàn)維持陰道處于低pH的作用；其代謝產(chǎn)物H2O2、細菌因子等具有殺、抑病原菌的作用；實現(xiàn)了提高陰道局部抵抗力和恢復微環(huán)境平衡及抑菌制菌的目的，起到了有效防止復發(fā)的效果。有研究表明，在陰道炎治療后給予乳酸菌陰道膠囊進行陰道局部微環(huán)境調(diào)整的鞏固治療，可縮短治療周期，降低復發(fā)率[5]。

通過對752例陰道炎治療后患者陰道內(nèi)乳酸桿菌的分離、培養(yǎng)及半定量，發(fā)現(xiàn)經(jīng)治療后，患者雖臨床癥狀消失，病原體檢查陰性，陰道清潔度好轉(zhuǎn)，但伴有陰道內(nèi)乳酸桿菌比例的明顯下降，經(jīng)過乳酸菌膠囊鞏固治療的試驗組乳酸桿菌檢出率，較對照組顯著提高。通過陰道桿菌數(shù)量分布的比較，發(fā)現(xiàn)對照組陰道桿菌的數(shù)量分布明顯下降，鞏固治療后陰道乳酸桿菌數(shù)量分布升高，接近正常水平。陰道內(nèi)乳酸桿菌中以產(chǎn)H2O2的乳酸菌為活性菌，通過篩選產(chǎn)H2O2陽性菌落以確定乳酸桿菌活性比例。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，試驗組陽性率較對照組明顯升高，說明乳酸菌陰道膠囊在提升陰道乳酸菌數(shù)量的同時，其活性亦同時提高。隨訪過程中試驗組陰道炎復發(fā)率明顯低于對照組(P＜0．05)，表明在陰道炎治療后給予乳酸菌陰道膠囊鞏固治療，在預防復發(fā)方面的效果肯定。本試驗結(jié)果表明，在臨床治療陰道炎后，給予微生態(tài)制劑——活菌制劑后續(xù)鞏固治療，有助于恢復陰道正常菌群，維持生態(tài)平衡，從而鞏固療效減少陰道炎復發(fā)。

[1]鄭佳音，劉佳明，王忠勇，等．不同人群陰道乳桿菌分離比較的研究[J]．中國微生態(tài)學雜志，2008，20(6)：580-581．

[2]Nugent RP，Krohn MA，Hillers L．Reliability of diagonosing bacterial vaginosisis improved by a standardized method of gram stain interpretation[J]．Jclin Microbiol，1991，29(2)：297-301．

[3]鄭晶晶，宋靜慧．乳酸桿菌及陰道微生態(tài)制劑[J]．內(nèi)蒙古醫(yī)學院學報，2008，30(12)：141-144．

[4]肖冰冰，劉朝暉，廖秦平，等．影響女性陰道乳酸桿菌數(shù)量分布的相關(guān)因素分析[J]．中國實用婦科與產(chǎn)科雜志，2008，24(6)：427-429．

[5]楊 毅，王友芳，郎景和，等．陰道乳酸桿菌活菌制劑對復發(fā)性外陰陰道念珠菌病鞏固治療的初步臨床探討[J]．實用婦產(chǎn)科雜志，2007，23(12)：749-750．