痛風(fēng)膠囊的薄層色譜鑒別研究

何 羽

痛風(fēng)膠囊的薄層色譜鑒別研究

何 羽

目的 研究痛風(fēng)膠囊的質(zhì)量控制方法。方法采用薄層色譜法對痛風(fēng)膠囊中黃芪、虎杖、紅花進行定性鑒別。結(jié)果薄層色譜斑點清晰，陰性無干擾。結(jié)論該方法簡便可行，可用于痛風(fēng)膠囊的質(zhì)量控制。

痛風(fēng)膠囊；黃芪；虎杖；紅花；薄層色譜鑒別

痛風(fēng)膠囊為畢節(jié)市某醫(yī)院自制制劑，由黃芪、虎杖、紅花等13味中藥組成的復(fù)方制劑，具有清熱祛風(fēng)除濕、活血通絡(luò)的作用，用于濕熱所致的關(guān)節(jié)紅腫熱痛，或伴有汗出而熱，不解，口渴喜飲，心煩不安，小便黃及痛風(fēng)見上述證候者的治療。經(jīng)過大量的臨床病例觀察，療效肯定，治愈率高。為了更好地控制該制劑的質(zhì)量，本文通過采用薄層色譜（TCL）法對痛風(fēng)膠囊中黃芪、虎杖、紅花進行定性鑒別，研究痛風(fēng)膠囊的質(zhì)量控制方法。

1 材料與試劑

1.1 試驗材料島津 AY 120型電子分析天平；DK-98-Ⅱ電熱恒溫水浴鍋；101-2電熱恒溫（鼓風(fēng)）干燥箱；PS-100超聲波清洗器；Goodsee-Ⅱ型薄層色譜攝影儀；硅膠G板（青島海洋化工有限公司）。

1.2 主要試劑黃芪甲苷、黃芪、虎杖、紅花對照藥材由中國藥品生物制品研究院提供；痛風(fēng)膠囊制劑由畢節(jié)市某醫(yī)院制劑室提供。

2 方法與結(jié)果

2.1 黃芪的薄層鑒別[1]取本品內(nèi)容物5g，加水50m l，加熱回流提取1h，濾過，濾液用水飽和的正丁醇萃取3次，每次35m l，合并正丁醇提取液，以5%碳酸氫鈉溶液洗滌2次，每次25m l，繼續(xù)以水洗滌2次，每次25m l，用無水硫酸鈉吸收多余水分，回收正丁醇至干，殘渣用1m l甲醇溶解，作為供試品液。取黃芪對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液；取黃芪甲苷對照品，加入甲醇制成1m l含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。按標(biāo)準(zhǔn)處方同法制備缺黃芪的陰性樣品，依照供試品溶液的處理方法制成陰性樣品溶液。分別吸取供試品溶液、對照品溶液、對照藥材溶液及陰性樣品溶液各 5μl，分別點于同一硅膠 G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水（65:35:10）的下層液為展開劑，上行展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在 105℃加熱數(shù)至斑點顯色清晰，供試品色譜中，日光下觀察：在與對照品及對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點；紫外光燈（365nm）下檢視，顯相同顏色的熒光斑點。陰性對照無干擾，見圖1。

2.2 虎杖的薄層鑒別[1]取本品內(nèi)容物5g，加入甲醇20m l，超聲處理30min，濾過，濾液蒸干，殘渣加2.5mol/L硫酸溶液10m l，水浴加熱30min，放冷，濾液用三氯甲烷提取3次，每次20m l，合并三氯甲烷液，蒸干，殘渣加入三氯甲烷1m l溶解，作為供試品溶液。取虎杖對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液。按標(biāo)準(zhǔn)處方同法制備缺虎杖的陰性樣品，照供試品溶液的處理方法制成陰性樣品溶液。分別吸取供試品溶液、對照藥材溶液及陰性樣品溶液各5μl，分別點于同一硅膠 G薄層板上，以苯-無水乙醇（8:2）的為展開劑，展開，取出，晾干，置氨蒸汽中顯色，日光下檢視：在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點；紫外光燈（365nm）下檢視，顯相同顏色的熒光斑點，陰性對照無干擾，見圖2。

圖1 黃芪的薄層圖

圖2 虎杖的薄層圖

2.3 紅花的薄層鑒別取本品內(nèi)容物 10g，加水20m l，加熱回流1h，放冷，濾過，加入乙醇適量使之含醇量為70%，放置過夜，濾過，濾液蒸干，殘渣加水20m l溶解，用石油醚（90～120℃）提取2次，每次 15m l，棄去石油醚液，水溶液蒸干，用80%丙酮1m l使溶解，作為供試品溶液。取紅花對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液。按標(biāo)準(zhǔn)處方同法制備缺紅花的陰性樣品，照供試品溶液的處理方法制成陰性樣品溶液。分別吸取供試品溶液、對照藥材溶液及陰性樣品溶液各 5μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠H薄層板上，以乙酸乙酯-甲酸-水-甲醇（7.0:2.0:3.0:0.4）的為展開劑，展開，取出，晾干，日光下檢視：在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點，陰性對照無干擾，見圖3。

圖3 紅花的薄層圖

3 討論

3.1 黃芪的鑒別，多數(shù)文獻上采用《中國藥典》2010版一部黃芪藥材項下的方法進行薄層鑒別，但在試驗中可以發(fā)現(xiàn)，此方法用于單味黃芪藥材或藥味較少的含黃芪藥材的復(fù)方制劑時較合適，當(dāng)用于藥味較多的復(fù)方制劑時，存在明顯的不足，表現(xiàn)為黃芪甲苷的極性較大，在薄層色譜圖中的Rf值較小，斑點相對比較集中，前后相鄰成分難以分開，斑點不明顯，為使斑點清晰可見，點樣量稍微過大時，會出現(xiàn)嚴(yán)重的拖尾，而且陰性樣品在這個區(qū)域會出現(xiàn)干擾，影響結(jié)果的判斷，采用本展開劑系統(tǒng)展開時，效果較好，陰性樣品無干擾。

3.2 黃芪的提取方法按“國家藥品標(biāo)準(zhǔn) WS3-161 (Z-151)-2001(Z)”香菊膠囊[2]項下關(guān)于黃芪甲苷的提取方法采用甲醇回流提取，水飽和的正丁醇萃取，用氨試液洗滌至中性，發(fā)現(xiàn)采用甲醇提取出的成分較多，展開時分不開，其次由于氨試液堿性較強，用正丁醇飽和的水一般要洗滌5次以上才能達到中性，造成黃芪甲苷的損失很大，本法采用水提，水飽和的正丁醇萃取，以 5%碳酸氫鈉溶液洗滌的方法，洗滌2次即可達到中性，使黃芪甲苷的損失較小。

3.3 在鑒別虎杖時，參照《中國藥典》2010版一部項下虎杖藥材鑒別的展開劑系統(tǒng)進行展開，結(jié)果發(fā)現(xiàn)即使展距很大，Rf值也較小，在日光下觀察，陰性無干擾，但在紫外光燈（365nm）下檢視時，陰性出現(xiàn)明顯的干擾，采用本展開劑系統(tǒng)展開時，效果較好，陰性樣品無干擾。

3.4 紅花提取時，直接用80%丙酮提取，方中其他組分干擾較大，通過水提，用石油醚萃取掉其中的脂溶性成分后，再用80%丙酮溶解，采用本展開劑系統(tǒng)展開時，效果較好，陰性樣品無干擾，取得了滿意的效果。

總之，采用薄層色譜（TCL）法對痛風(fēng)膠囊中黃芪、虎杖、紅花進行定性鑒別，其薄層色譜斑點清晰，穩(wěn)定性好，陰性樣品無干擾，且方法簡便可行，可用于該產(chǎn)品的質(zhì)量控制。

[1] 中華人民共和國國家藥典委員會.中華人民共和國藥典[M].一部.北京.中國醫(yī)藥科技出版社,2010:194,283.

[2] 中華人民共和國國家藥品監(jiān)督管理局.國家藥品標(biāo)準(zhǔn)WS3-161(Z-151)-2001(Z) [S].北京,2010.

Studies on TLC Identications of Tongfeng Capsule

He Yu

Ob jectiveTo study the quality control method of Tongfeng capsule.MethodsAstragalus membraneceus(Fisch.)Bge.var,Polygonum cuspidatum Sieb.et Zucc And Carthamus tinctorius L can be distinguished respectively by TLC.Resu ltsTLC spot were fairly clear,and the blank test showed no interference.Conc lusionThe method was proved to be simple and feasble,and suitable for content determ ination of Tongfeng capsule.

Tongfeng capsu le;Astraga lus mem branaceus(Fisch.)Bge.var;Polygonum cuspidatum Sieb.et Zucc; Carthamus tinctorius L;TLC

R927

A

1673-5846(2014)05-0014-03

畢節(jié)市食品藥品檢驗所，貴州畢節(jié) 551700

何羽，主管藥師，主要從事藥品檢驗和藥物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究。Tel：0857-8288509，E-mail：gzheyu@163.com。