香灰菌傳代對(duì)銀耳栽培的影響

賀元川等

摘要：測(cè)定了傳代香灰菌（Tremella fuciformis）的羧甲基纖維素酶及漆酶的活性。結(jié)果表明，隨著傳代次數(shù)的增加，香灰菌羧甲基纖維素酶及漆酶的活性逐漸下降，隨著銀耳生長(zhǎng)周期的延長(zhǎng)，銀耳的產(chǎn)量與品質(zhì)略有下降。因此，在銀耳的制種過程中，除了對(duì)銀耳進(jìn)行篩選復(fù)壯，也要對(duì)香灰菌進(jìn)行復(fù)壯篩選，保證制備高品質(zhì)的銀耳栽培種。

關(guān)鍵詞：香灰菌；漆酶；纖維素酶；銀耳

中圖分類號(hào)： S567.3+40.4 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A 文章編號(hào)：1002-1302（2014）04-0201-01

收稿日期：2013-08-14

基金項(xiàng)目：重慶市科技攻關(guān)項(xiàng)目（編號(hào)：JA-12-21-1）。

作者簡(jiǎn)介：賀元川（1985—），女，四川隆昌人，碩士，助理研究員，主要從事食用菌培養(yǎng)及活性物質(zhì)研究。Tel：（023）89029087；E-mail：heyuanchuan@126.com。

通信作者：陳仕江，碩士，研究員，主要從事食用菌的培養(yǎng)及活性物質(zhì)研究。Tel：（023）89029078；E-mail：shijiangchen@163.com。香灰菌（Tremella fuciformis）是銀耳的伴生菌，銀耳菌絲要依靠香灰菌分解基質(zhì)，提供營養(yǎng)，才能完成整個(gè)生活史。香灰菌分解基質(zhì)能力直接關(guān)系到銀耳能否正常生長(zhǎng)發(fā)育。香灰菌主要依賴香灰菌分泌的胞外木質(zhì)素酶分解基質(zhì)。目前有學(xué)者對(duì)香灰菌的生物特性進(jìn)行了初步研究，而關(guān)于酶活力與菌種退化相關(guān)性的研究尚未見報(bào)道[1]。本研究對(duì)不同代香灰菌與同代銀耳菌制備銀耳菌種進(jìn)行出耳試驗(yàn)，并測(cè)定木質(zhì)素酶與纖維素酶的活性，探明香灰菌傳代過程中酶活性變化對(duì)銀耳栽培的影響，旨在為銀耳菌種的制備提供理論依據(jù)。

1材料與方法

1.1材料

出發(fā)菌株為銀科1號(hào)與香灰菌株（1代至6代）。

1.2培養(yǎng)基配方

棉籽殼83.5%，麩皮15%，石膏1.5%，蔗糖1%，硫酸鎂0.3%，磷酸氫二鉀 0.2%，水65%。1.3方法

分別從長(zhǎng)出白毛團(tuán)的菌包袋2個(gè)穴孔的中間位置取混合菌絲5 g，將同一菌包所取樣品混合均勻后再取5 g，分別加入 25 mL 蒸餾水并攪勻，浸提2 h后抽濾的溶液即為菌絲粗酶液，每處理設(shè)5個(gè)重復(fù)。參照文獻(xiàn)[2-4]的方法測(cè)定酶活性，出耳并進(jìn)行管理。

2結(jié)果與分析

2.1出耳情況

從表1可以看出，香灰菌1至4代的菌種生產(chǎn)的銀耳朵徑都較大，耳片適中，展片較好，大小較均勻，出耳率高，產(chǎn)量、質(zhì)量均較理想。第5代與第6代香灰菌生產(chǎn)的菌種，耳片雖然大而展，但耳片大小差異較大，產(chǎn)量下降，周期延長(zhǎng)。由此可見，香灰菌傳代過程中，酶活性逐漸降低，對(duì)培養(yǎng)基分解能力下降，導(dǎo)致提供給銀耳菌的養(yǎng)料不充分，從而影響銀耳的生長(zhǎng)發(fā)育。生產(chǎn)中建議對(duì)香灰菌進(jìn)行復(fù)壯篩選，以保證銀耳栽培質(zhì)量。

2.3羧甲基纖維素酶（CMC酶）的活性

漆酶等木質(zhì)素酶首先降解木屑，暴露出纖維素。纖維素在胞外纖維素酶的作用下逐步降解為可直接利用的單糖——葡萄糖。纖維素酶并不是單一組分，而是多組分酶，包括C1酶、Cx酶、β-葡萄糖苷酶3種主要成分。C1酶將暴露出來的天然纖維素水解成不定形纖維素，Cx酶繼續(xù)將其水解成纖維寡糖，最終在β-葡萄糖苷酶作用下水解成葡萄糖。由圖2可以看出，隨著傳代代數(shù)的增加，香灰菌羧甲基纖維素酶的活性逐漸降低。

3結(jié)論與討論

本研究表明，隨著代數(shù)的增加，香灰菌漆酶與羧甲基纖維素酶的活性逐漸降低，第5代明顯降低。隨著傳代周期的逐漸延長(zhǎng)，銀耳品質(zhì)開始變得參差不齊。由此可知，香灰菌傳代降低了酶活性，減少了銀耳營養(yǎng)物質(zhì)，阻礙了銀耳菌的生長(zhǎng)發(fā)育。為了制備高質(zhì)量的銀耳栽培種，除了要對(duì)菌種進(jìn)行篩選復(fù)壯，還要準(zhǔn)確把握香灰菌的接種量，以保證酶的活性。

參考文獻(xiàn)：

[1]彭衛(wèi)紅. 不同香灰菌株生長(zhǎng)特性差異研究[J]. 西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2003，16（增刊）：162-164.

[2]鐘冬秀，鐘秀媚. 不同菌齡銀耳栽培種應(yīng)用生產(chǎn)試驗(yàn)[J]. 食用菌，2008（4）：26-27.

[3]黃年來. 中國銀耳生產(chǎn)[M]. 北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2000.

[4]雷銀清. 銀耳夏季栽培關(guān)鍵技術(shù)[J]. 食用菌，2007（3）：54.endprint

摘要：測(cè)定了傳代香灰菌（Tremella fuciformis）的羧甲基纖維素酶及漆酶的活性。結(jié)果表明，隨著傳代次數(shù)的增加，香灰菌羧甲基纖維素酶及漆酶的活性逐漸下降，隨著銀耳生長(zhǎng)周期的延長(zhǎng)，銀耳的產(chǎn)量與品質(zhì)略有下降。因此，在銀耳的制種過程中，除了對(duì)銀耳進(jìn)行篩選復(fù)壯，也要對(duì)香灰菌進(jìn)行復(fù)壯篩選，保證制備高品質(zhì)的銀耳栽培種。

關(guān)鍵詞：香灰菌；漆酶；纖維素酶；銀耳

中圖分類號(hào)： S567.3+40.4 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A 文章編號(hào)：1002-1302（2014）04-0201-01

收稿日期：2013-08-14

基金項(xiàng)目：重慶市科技攻關(guān)項(xiàng)目（編號(hào)：JA-12-21-1）。

作者簡(jiǎn)介：賀元川（1985—），女，四川隆昌人，碩士，助理研究員，主要從事食用菌培養(yǎng)及活性物質(zhì)研究。Tel：（023）89029087；E-mail：heyuanchuan@126.com。

通信作者：陳仕江，碩士，研究員，主要從事食用菌的培養(yǎng)及活性物質(zhì)研究。Tel：（023）89029078；E-mail：shijiangchen@163.com。香灰菌（Tremella fuciformis）是銀耳的伴生菌，銀耳菌絲要依靠香灰菌分解基質(zhì)，提供營養(yǎng)，才能完成整個(gè)生活史。香灰菌分解基質(zhì)能力直接關(guān)系到銀耳能否正常生長(zhǎng)發(fā)育。香灰菌主要依賴香灰菌分泌的胞外木質(zhì)素酶分解基質(zhì)。目前有學(xué)者對(duì)香灰菌的生物特性進(jìn)行了初步研究，而關(guān)于酶活力與菌種退化相關(guān)性的研究尚未見報(bào)道[1]。本研究對(duì)不同代香灰菌與同代銀耳菌制備銀耳菌種進(jìn)行出耳試驗(yàn)，并測(cè)定木質(zhì)素酶與纖維素酶的活性，探明香灰菌傳代過程中酶活性變化對(duì)銀耳栽培的影響，旨在為銀耳菌種的制備提供理論依據(jù)。

1材料與方法

1.1材料

出發(fā)菌株為銀科1號(hào)與香灰菌株（1代至6代）。

1.2培養(yǎng)基配方

棉籽殼83.5%，麩皮15%，石膏1.5%，蔗糖1%，硫酸鎂0.3%，磷酸氫二鉀 0.2%，水65%。1.3方法

分別從長(zhǎng)出白毛團(tuán)的菌包袋2個(gè)穴孔的中間位置取混合菌絲5 g，將同一菌包所取樣品混合均勻后再取5 g，分別加入 25 mL 蒸餾水并攪勻，浸提2 h后抽濾的溶液即為菌絲粗酶液，每處理設(shè)5個(gè)重復(fù)。參照文獻(xiàn)[2-4]的方法測(cè)定酶活性，出耳并進(jìn)行管理。

2結(jié)果與分析

2.1出耳情況

從表1可以看出，香灰菌1至4代的菌種生產(chǎn)的銀耳朵徑都較大，耳片適中，展片較好，大小較均勻，出耳率高，產(chǎn)量、質(zhì)量均較理想。第5代與第6代香灰菌生產(chǎn)的菌種，耳片雖然大而展，但耳片大小差異較大，產(chǎn)量下降，周期延長(zhǎng)。由此可見，香灰菌傳代過程中，酶活性逐漸降低，對(duì)培養(yǎng)基分解能力下降，導(dǎo)致提供給銀耳菌的養(yǎng)料不充分，從而影響銀耳的生長(zhǎng)發(fā)育。生產(chǎn)中建議對(duì)香灰菌進(jìn)行復(fù)壯篩選，以保證銀耳栽培質(zhì)量。

2.3羧甲基纖維素酶（CMC酶）的活性

漆酶等木質(zhì)素酶首先降解木屑，暴露出纖維素。纖維素在胞外纖維素酶的作用下逐步降解為可直接利用的單糖——葡萄糖。纖維素酶并不是單一組分，而是多組分酶，包括C1酶、Cx酶、β-葡萄糖苷酶3種主要成分。C1酶將暴露出來的天然纖維素水解成不定形纖維素，Cx酶繼續(xù)將其水解成纖維寡糖，最終在β-葡萄糖苷酶作用下水解成葡萄糖。由圖2可以看出，隨著傳代代數(shù)的增加，香灰菌羧甲基纖維素酶的活性逐漸降低。

3結(jié)論與討論

本研究表明，隨著代數(shù)的增加，香灰菌漆酶與羧甲基纖維素酶的活性逐漸降低，第5代明顯降低。隨著傳代周期的逐漸延長(zhǎng)，銀耳品質(zhì)開始變得參差不齊。由此可知，香灰菌傳代降低了酶活性，減少了銀耳營養(yǎng)物質(zhì)，阻礙了銀耳菌的生長(zhǎng)發(fā)育。為了制備高質(zhì)量的銀耳栽培種，除了要對(duì)菌種進(jìn)行篩選復(fù)壯，還要準(zhǔn)確把握香灰菌的接種量，以保證酶的活性。

參考文獻(xiàn)：

[1]彭衛(wèi)紅. 不同香灰菌株生長(zhǎng)特性差異研究[J]. 西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2003，16（增刊）：162-164.

[2]鐘冬秀，鐘秀媚. 不同菌齡銀耳栽培種應(yīng)用生產(chǎn)試驗(yàn)[J]. 食用菌，2008（4）：26-27.

[3]黃年來. 中國銀耳生產(chǎn)[M]. 北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2000.

[4]雷銀清. 銀耳夏季栽培關(guān)鍵技術(shù)[J]. 食用菌，2007（3）：54.endprint

摘要：測(cè)定了傳代香灰菌（Tremella fuciformis）的羧甲基纖維素酶及漆酶的活性。結(jié)果表明，隨著傳代次數(shù)的增加，香灰菌羧甲基纖維素酶及漆酶的活性逐漸下降，隨著銀耳生長(zhǎng)周期的延長(zhǎng)，銀耳的產(chǎn)量與品質(zhì)略有下降。因此，在銀耳的制種過程中，除了對(duì)銀耳進(jìn)行篩選復(fù)壯，也要對(duì)香灰菌進(jìn)行復(fù)壯篩選，保證制備高品質(zhì)的銀耳栽培種。

關(guān)鍵詞：香灰菌；漆酶；纖維素酶；銀耳

中圖分類號(hào)： S567.3+40.4 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A 文章編號(hào)：1002-1302（2014）04-0201-01

收稿日期：2013-08-14

基金項(xiàng)目：重慶市科技攻關(guān)項(xiàng)目（編號(hào)：JA-12-21-1）。

作者簡(jiǎn)介：賀元川（1985—），女，四川隆昌人，碩士，助理研究員，主要從事食用菌培養(yǎng)及活性物質(zhì)研究。Tel：（023）89029087；E-mail：heyuanchuan@126.com。

通信作者：陳仕江，碩士，研究員，主要從事食用菌的培養(yǎng)及活性物質(zhì)研究。Tel：（023）89029078；E-mail：shijiangchen@163.com。香灰菌（Tremella fuciformis）是銀耳的伴生菌，銀耳菌絲要依靠香灰菌分解基質(zhì)，提供營養(yǎng)，才能完成整個(gè)生活史。香灰菌分解基質(zhì)能力直接關(guān)系到銀耳能否正常生長(zhǎng)發(fā)育。香灰菌主要依賴香灰菌分泌的胞外木質(zhì)素酶分解基質(zhì)。目前有學(xué)者對(duì)香灰菌的生物特性進(jìn)行了初步研究，而關(guān)于酶活力與菌種退化相關(guān)性的研究尚未見報(bào)道[1]。本研究對(duì)不同代香灰菌與同代銀耳菌制備銀耳菌種進(jìn)行出耳試驗(yàn)，并測(cè)定木質(zhì)素酶與纖維素酶的活性，探明香灰菌傳代過程中酶活性變化對(duì)銀耳栽培的影響，旨在為銀耳菌種的制備提供理論依據(jù)。

1材料與方法

1.1材料

出發(fā)菌株為銀科1號(hào)與香灰菌株（1代至6代）。

1.2培養(yǎng)基配方

棉籽殼83.5%，麩皮15%，石膏1.5%，蔗糖1%，硫酸鎂0.3%，磷酸氫二鉀 0.2%，水65%。1.3方法

分別從長(zhǎng)出白毛團(tuán)的菌包袋2個(gè)穴孔的中間位置取混合菌絲5 g，將同一菌包所取樣品混合均勻后再取5 g，分別加入 25 mL 蒸餾水并攪勻，浸提2 h后抽濾的溶液即為菌絲粗酶液，每處理設(shè)5個(gè)重復(fù)。參照文獻(xiàn)[2-4]的方法測(cè)定酶活性，出耳并進(jìn)行管理。

2結(jié)果與分析

2.1出耳情況

從表1可以看出，香灰菌1至4代的菌種生產(chǎn)的銀耳朵徑都較大，耳片適中，展片較好，大小較均勻，出耳率高，產(chǎn)量、質(zhì)量均較理想。第5代與第6代香灰菌生產(chǎn)的菌種，耳片雖然大而展，但耳片大小差異較大，產(chǎn)量下降，周期延長(zhǎng)。由此可見，香灰菌傳代過程中，酶活性逐漸降低，對(duì)培養(yǎng)基分解能力下降，導(dǎo)致提供給銀耳菌的養(yǎng)料不充分，從而影響銀耳的生長(zhǎng)發(fā)育。生產(chǎn)中建議對(duì)香灰菌進(jìn)行復(fù)壯篩選，以保證銀耳栽培質(zhì)量。

2.3羧甲基纖維素酶（CMC酶）的活性

漆酶等木質(zhì)素酶首先降解木屑，暴露出纖維素。纖維素在胞外纖維素酶的作用下逐步降解為可直接利用的單糖——葡萄糖。纖維素酶并不是單一組分，而是多組分酶，包括C1酶、Cx酶、β-葡萄糖苷酶3種主要成分。C1酶將暴露出來的天然纖維素水解成不定形纖維素，Cx酶繼續(xù)將其水解成纖維寡糖，最終在β-葡萄糖苷酶作用下水解成葡萄糖。由圖2可以看出，隨著傳代代數(shù)的增加，香灰菌羧甲基纖維素酶的活性逐漸降低。

3結(jié)論與討論

本研究表明，隨著代數(shù)的增加，香灰菌漆酶與羧甲基纖維素酶的活性逐漸降低，第5代明顯降低。隨著傳代周期的逐漸延長(zhǎng)，銀耳品質(zhì)開始變得參差不齊。由此可知，香灰菌傳代降低了酶活性，減少了銀耳營養(yǎng)物質(zhì)，阻礙了銀耳菌的生長(zhǎng)發(fā)育。為了制備高質(zhì)量的銀耳栽培種，除了要對(duì)菌種進(jìn)行篩選復(fù)壯，還要準(zhǔn)確把握香灰菌的接種量，以保證酶的活性。

參考文獻(xiàn)：

[1]彭衛(wèi)紅. 不同香灰菌株生長(zhǎng)特性差異研究[J]. 西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2003，16（增刊）：162-164.

[2]鐘冬秀，鐘秀媚. 不同菌齡銀耳栽培種應(yīng)用生產(chǎn)試驗(yàn)[J]. 食用菌，2008（4）：26-27.

[3]黃年來. 中國銀耳生產(chǎn)[M]. 北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2000.

[4]雷銀清. 銀耳夏季栽培關(guān)鍵技術(shù)[J]. 食用菌，2007（3）：54.endprint