血清胱抑素C、β2-微球蛋白及肌酐在多發(fā)性骨髓瘤診斷中的價(jià)值

蘇顯都，林 榕，徐曉蘭，孫京花，于 莉，范長玲海南省農(nóng)墾那大醫(yī)院 檢驗(yàn)科，海南儋州 57700；南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院 血液科，廣東廣州 5055；解放軍總醫(yī)院 檢驗(yàn)科，北京 0085

血清胱抑素C、β2-微球蛋白及肌酐在多發(fā)性骨髓瘤診斷中的價(jià)值

蘇顯都1，林 榕2，徐曉蘭2，孫京花3，于 莉1，范長玲1
1海南省農(nóng)墾那大醫(yī)院 檢驗(yàn)科，海南儋州 571700；2南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院 血液科，廣東廣州 510515；3解放軍總醫(yī)院 檢驗(yàn)科，北京 100853

目的探討血清胱抑素C(cystatin C，Cys-C)、β2-微球蛋白(β2-microglobulin，β2-MG)及肌酐(creatinine，Cr)在多發(fā)性骨髓瘤(multiple myeloma，MM)中的診斷意義。方法使用日立7600全自動生化分析儀檢測2010年2月- 2014年1月海南農(nóng)墾那大醫(yī)院及南方醫(yī)院住院的43例初診MM患者和30例健康體檢者血清Cys-C、β2-MG、Cr、尿酸(uric acid，UA)及尿素的水平。應(yīng)用受試工作特征曲線(receiver operating characteristic curve，ROC)評價(jià)Cys-C、β2-MG和Cr在MM診斷中的價(jià)值。結(jié)果MM患者Cys-C水平(2.06±0.82) mg/L明顯高于健康對照組(0.71±0.18) mg/L (P＜0.01)；并且與β2-MG呈明顯正相關(guān)(r=0.523，P＜0.05)。Durie-Salmon分期中，Ⅲ期CysC水平(3.14±1.38) mg/L明顯高于Ⅱ期(1.35± 0.16) mg/L和Ⅰ期(0.97±0.18) mg/L (P＜0.01)；Ⅲ期與Ⅰ期、Ⅱ期血清Cr和β2-MG水平比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。不同免疫分型中，輕鏈型血清Cys-C水平(2.75±1.01) mg/L明顯高于不分泌型(1.49±0.53) mg/L (P＜0.05)；IgA型血清β2-MG水平(7.48±4.52) mg/L明顯高于不分泌型(5.37±2.64) mg/L (P＜0.05)。ROC分析顯示，CysC的曲線下的面積(area under curve，AUC)及其95%置信區(qū)間(0.912，95%CI：0.891～0.960)高于β2-MG(0.853，95%CI：0.821 ～ 0.894)和Cr(0.741，95%CI：0.702 ～ 0.795)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)論Cys-C可以作為診斷MM患者腎功能早期損害的指標(biāo)之一，且優(yōu)于β2-MG和Cr，對臨床分期、腫瘤負(fù)荷及判斷預(yù)后有一定的幫助。

血清胱抑素C；β2-微球蛋白；多發(fā)性骨髓瘤

多發(fā)性骨髓瘤(multiple myeloma，MM)是一種惡性漿細(xì)胞疾病，表現(xiàn)為漿細(xì)胞異常增生，并產(chǎn)生大量單克隆免疫球蛋白，在骨髓內(nèi)惡性增殖，引起骨折和骨髓功能衰竭。研究表明，血清胱抑素C(cystatin C，Cys-C)能反映惡性腫瘤的進(jìn)展及腫瘤的負(fù)荷量，β2-微球蛋白(β2- microglobulin，β2-MG)和Cr在早期腎功能損害中的診斷具有重要意義[1-3]。本研究通過檢測43例初診MM患者血清Cys-C、尿素、肌酐(creatinine，Cr)、尿酸(uric acid，UA)及β2-MG的水平，以期進(jìn)一步評價(jià)血清Cys-C、β2-MG及Cr對MM診斷價(jià)值，為臨床提供幫助。

對象和方法

1 對象 2010年2月- 2014年1月在海南農(nóng)墾那大醫(yī)院及南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院住院的43例初診MM患者作為MM組，診斷標(biāo)準(zhǔn)參照張之南主編《血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)》第3版[4]。其中男性27例、女性16例，年齡45 ～ 82(61.7±11.3)歲。依據(jù)血清免疫固定電泳檢查結(jié)果：IgG型24例，IgA型9例，輕鏈型7例(κ鏈型2例，λ鏈型5例)，不分泌型3例。按照Durie-Salmon分期診斷標(biāo)準(zhǔn)：Ⅰ期8例，Ⅱ期13例，Ⅲ期22例。同時(shí)選取30例無嚴(yán)重肝腎疾病、腫瘤及心血管疾病的健康體檢者作為對照組，其中男性17例、女性13例，年齡30 ～ 75(48.2±9.6)歲。兩組年齡、性別等一般資料的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。

2 主要試劑與儀器 使用日立7600型全自動生化儀檢測血清Cys-C、尿素、Cr、UA及β2-MG，試劑均采用公司配套產(chǎn)品。Cys-C、尿素、Cr、UA及β2-MG正常參考值分別為：0.20 ～ 1.00 mg/L、2.86 ～8.20 mmol/L、54 ～ 106μmol/L、120 ～ 450 μmol/L、0.8 ～ 2.80 mg/L。血清免疫固定電泳檢測采用Sebia Hydrasys全自動電泳分析儀及原裝配套試劑盒。

3 血樣采集及檢驗(yàn) 所有標(biāo)本均為清晨空腹靜脈采血，取靜脈血5 ml，注入無抗凝的試管中混勻，以離心半徑13.5 cm，3 500 r/min離心5 min，分離血清后進(jìn)行血清Cys-C、β2-MG、Cr、尿素、UA及血清免疫固定電泳檢測。采用免疫比濁法檢測血清Cys-C和β2-MG，Cr和UA用氧化酶法檢測，尿素用尿酶法檢測，整個(gè)過程嚴(yán)格按操作規(guī)程進(jìn)行。

4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件分析。數(shù)據(jù)以±s表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，非正態(tài)分布數(shù)據(jù)比較采用非參數(shù)法Mann-Whitney檢驗(yàn)。相關(guān)性分析采用Spearman等級相關(guān)分析法。繪制血清Cys-C、β2-MG和Cr診斷MM的受試工作特征曲線(receiver operating characteristic curve，ROC)，計(jì)算ROC曲線下的面積(area under cure，AUC)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

1 兩組血清Cys-C、尿素、Cr、UA及β2-MG水平比較 MM組與對照組血清Cys-C水平較高(P＜0.01)；Cr、β2-MG和UA水平高于對照組(P均＜0.05)；而尿素水平兩組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。見表1。

2 不同分期血清Cys-C、尿素、Cr、UA及β2-MG水平比較 MM患者Ⅲ期血清Cys-C、Cr及β2-MG水平明顯高于Ⅰ期和Ⅱ期(P＜0.01或P＜0.05)，Ⅲ期血清尿素和UA水平明顯高于Ⅰ期(P＜0.05)，而Ⅱ期與Ⅰ期血清Cys-C、尿素、Cr、UA及β2-MG水平差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均＞0.05)。見表2。3 不同免疫分型間血清Cys-C、尿素、Cr、UA及β2-MG水平比較 MM患者輕鏈型血清Cys-C水平明顯高于不分泌型(P＜0.05)；IgA型血清β2-MG水平明顯高于不分泌型(P＜0.05)；而其他組間比較均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。見表3。

表1 兩組血清Cys-C、尿素、Cr、UA及β2-MG水平比較Tab. 1 Comparison of the levels of serum Cys-C, urea, Cr UA andβ2-MG between two groups

表2 MM患者各期間血清Cys-C、尿素、Cr、UA及β2-MG水平比較Tab. 2 Comparison of the levels of serum Cys-C, urea, Cr UA and β2-MG during various phases in MM patients

表3 MM患者不同免疫分型間血清Cys-C、尿素、Cr、UA及β2-MG水平比較Tab. 3 Comparison of the levels of serum Cys-C, urea, Cr, UA and β2-MG in MM patients with different immune classification

4 ROC曲線分析血清Cys-C、β2-MG和Cr在MM中的診斷價(jià)值 采用非參數(shù)法估計(jì)，血清Cys-C、β2-MG和Cr的AUC及其95%置信區(qū)間(95% confidence interval，95%CI)分別為0.912(95%CI：0.891 ～ 0.960)、0.853(95%CI：0.821 ～ 0.894)、0.741(95%CI：0.702 ～ 0.795)，與AUC=0.5比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；且Cys-C的AUC明顯高于β2-MG和Cr(P＜0.05)。見圖1。

5 多發(fā)性骨髓瘤患者血清Cys-C與β2-MG的相關(guān)性 將MM患者血清Cys-C與β2-MG進(jìn)行Spearman相關(guān)性分析，結(jié)果顯示Cys-C水平與β2-MG呈明顯正相關(guān)(r=0.523，P＜0.05)。

圖 1 Cys-C、β2-MG和Cr的ROC曲線Fig. 1 ROC curve of Cys-C, β2-MG and Cr

討 論

多發(fā)性骨髓瘤對腎的損害是多因素共同作用的結(jié)果，其中輕鏈蛋白、高鈣及高尿酸血癥是腎小球和腎小管損害的主要表現(xiàn)。有研究表明，50% MM患者經(jīng)過合理治療后，受損的腎功能得到一定的恢復(fù)[5]。因此，MM患者腎功能損害的早期診斷對提高治療效果、判斷預(yù)后及延長生存期有重要意義。

Cys-C是半胱氨酸蛋白酶抑制家族成員之一，在所有有核細(xì)胞中表達(dá)，能抑制細(xì)胞內(nèi)外的半胱氨酸蛋白酶，對腫瘤的生長及血管生成、浸潤和轉(zhuǎn)移有重要作用。有研究表明，血清Cys-C是反映早期腎損害的敏感指標(biāo)，腎小球輕微損傷時(shí)，Cys-C水平可升高，并隨病情加重逐漸升高。國外有文獻(xiàn)報(bào)道，血清Cys-C在早期發(fā)現(xiàn)腎功能變化和療效觀察中有重要的意義[6-7]。而年齡和性別對血清Cr水平影響較大，僅在肌酐清除率降低50%以上時(shí)才升高，腎功能診斷的敏感性差[8]；血清尿素主要是檢測腎功能外源性指標(biāo)之一，但腎外因素對其影響較大[8-9]。

本研究結(jié)果顯示，MM組血清Cys-C、尿素、Cr、UA及β2-MG水平明顯高于對照組(P＜0.05)，提示MM患者存在早期腎功能損害。血清中β2-MG可以從腎小球毛細(xì)血管壁自由濾過，幾乎被近端腎小管重吸收并分解。MM患者血β2-MG水平升高，可能是由于瘤細(xì)胞增生，細(xì)胞周轉(zhuǎn)加速及腎功能損害所致。β2-MG能夠反映腎功能損害程度，對診斷腎功能損害及評價(jià)腎功能方面有較高的敏感性和特異性[10]。血清Cys-C水平與β2-MG呈明顯正相關(guān)(r=0.523，P＜0.05)。所以，Cys-C可作為MM早期腎功能損害診斷指標(biāo)之一。雖然結(jié)果中MM組Cr和UA水平也明顯高于對照組，但由于其影響因素較多，應(yīng)結(jié)合其他指標(biāo)來綜合評價(jià)腎功能。采用ROC曲線分析血清Cys-C、β2-MG和Cr在MM患者中的診斷價(jià)值，發(fā)現(xiàn)Cys-C曲線下的面積最大，且Cys-C從腎小球?yàn)V過后由腎小管重吸收并代謝，可以反映腎小球和腎小管的功能。所以，血清Cys-C對多發(fā)性骨髓瘤腎損害的診斷價(jià)值優(yōu)于β2-MG和Cr。

有研究表明，Cys-C基因表達(dá)在MM患者中明顯上調(diào)(上調(diào)近50倍)，其水平在一定程度上可以反映MM患者的腫瘤負(fù)荷[11]。Terpos等[12]研究也證實(shí)，Cys-C是反映患者的腫瘤負(fù)荷和判斷MM患者中位生存期的獨(dú)立預(yù)測指標(biāo)。血清β2-MG作為MM Durie-Salmon分期的指標(biāo)之一，可以反映MM患者腫瘤負(fù)荷，是MM的獨(dú)立的預(yù)后指標(biāo)[13]。MM患者腫瘤分期與患者生存率密切相關(guān)，且有助于準(zhǔn)確的預(yù)后判斷[14]。本研究結(jié)果顯示，MM患者Ⅲ期血清Cys-C、β2-MG和Cr水平明顯高于Ⅰ期、Ⅱ期，提示Ⅲ期MM患者發(fā)生腎功能損害的可能性更大。血清Cys-C與β2-MG呈明顯正相關(guān)，Cys-C結(jié)合β2-MG對MM分期和MM患者預(yù)后判斷有重要的作用。另外，MM患者Ⅲ期血清尿素和UA水平明顯高于Ⅰ期，而Ⅱ期與Ⅰ期血清Cys-C、尿素、Cr、UA及β2-MG水平比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，提示MM患者臨床分期越差，尿素和UA水平越高。而是否參與MM的發(fā)生和發(fā)展有待于進(jìn)一步證實(shí)。我們對各免疫分型間血清Cys-C、尿素、Cr、UA及β2-MG水平比較，發(fā)現(xiàn)MM患者輕鏈型血清Cys-C水平明顯高于不分泌型，IgA型血清β2-MG水平明顯高于不分泌型，說明MM患者中不同免疫分型間，血清Cys-C和β2-MG水平可能存在一些差異。

我們認(rèn)為，血清Cys-C水平在MM患者早期腎功能損害中明顯升高，Cys-C水平與MM的Durie-Salmon分期有關(guān)，分期越高，Cys-C水平越高，且Cys-C較β2-MG和Cr在MM診斷中具有更高的價(jià)值。因此，血清Cys-C可作為評價(jià)MM患者早期腎損害、臨床分期和判斷預(yù)后的良好指標(biāo)。

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Value of serum cystatin C, β2- microglobulin and creatinine in the diagnosis of multiple myeloma

SU Xian-du1, LIN Rong2, XU Xiao-lan2, SUN Jing-hua3,YU Li1, FAN Chang-ling1
1Department of Clinical Laboratory, Hainan Nongken Nada Hospital, Nada 571700, Hainan Province, China;2Department of Hematology, Nanfang Hospital of Southern Medical University, Guangzhou 510515, Guangdong Province, China;3Department of Clinical Laboratory, Chinese PLA General Hospital, Beijing 100853, China

FAN Chang-ling. Email: fzhl1209@163.com

ObjectiveTo investigate the diagnosis significance of serum cystatin C (Cys-C), β2-microglobulin (β2-MG) and creatinine (Cr) in multiple myeloma (MM).MethodsThe serum levels of Cys-C, β2-MG, Cr, uric acid (UA) and urea of 43 newly diagnosed MM patients and 30 healthy persons in Hainan Nongken Nada Hospital and Nanfang Hospital from February 2010 to January 2014 were detected using Hitachi 7600 automatic biochemical analyzer. Receiver operating characteristic curve (ROC) was used to evaluate the value of Cys-C, β2-MG and Cr in the diagnosis of MM.ResultsThe level of Cys-C in patients with MM (2.06±0.82) mg/L was significantly higher than in the control group (0.71±0.18) mg/L (P＜0.01), and it was significant positive correlated with β2-MG (r=0.523, P＜0.05). During Durie-Salmon stage, the level of CysC (3.14±1.38) mg/L in phaseⅢwas significantly higher than that in phaseⅡ(1.35±0.16) mg/L and phaseⅠ(0.97±0.18) mg/L (P＜0.01). The levels of serum Cr and β2-MG in phaseⅢshowed statistically significant difference comparing with that in phaseⅠandⅡ(P＜0.05). Cys-C level of serum light chain (2.75±1.01) mg/L was significantly higher than that of no secretion (1.49±0.53) mg/L in different immune classification (P＜0.05), and β2-MG level of IgA type serum (7.48±4.52) mg/L was significantly higher than that of no secretion (5.37±2.64) mg/L (P＜0.05). Receiver operating characteristic curve analysis showed that area under curve (AUC) and 95% confidence interval of CysC (0.912, 95%CI: 0.891-0.960) were higher than that of the β2-MG (0.853, 95%CI: 0.821-0.894) and Cr (0.741, 95%CI: 0.702-0.795), the difference was statistically significant (P＜0.05).ConclusionCys-C can be used as one of indexes for the early diagnosis of MM patients with renal damage, which is better than β2-MG and Cr, and it also can help with clinical stage, tumor burden and prognosis.

cystatin C; β2- microglobulin; multiple myeloma

R 733.3

A

2095-5227(2014)11-1126-04

10.3969/j.issn.2095-5227.2014.11.013網(wǎng)絡(luò)出版時(shí)間：2014-07-16 10:58 網(wǎng)絡(luò)出版地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/11.3275.R.20140716.1058.001.html

2014-04-22

蘇顯都，男，本科。研究方向：臨床血液實(shí)驗(yàn)學(xué)。Email: adgbn129@126.com

范長玲，男，主任醫(yī)師，科主任。Email: fzhl1209@163. com