不同方法在胸腹水細(xì)胞成分檢測中的應(yīng)用價(jià)值

鐘樹奇，鄧秋萍，梁敏華，胡明芬

(佛山市中醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東 佛山 528000)

不同方法在胸腹水細(xì)胞成分檢測中的應(yīng)用價(jià)值

鐘樹奇，鄧秋萍，梁敏華，胡明芬

(佛山市中醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東 佛山 528000)

目的 探討UF-1000i尿液有形成分分析儀與XT-4000i新型多功能全自動血細(xì)胞分析儀、手工顯微鏡三種方法檢查胸腹水中紅細(xì)胞(RBC)計(jì)數(shù)、白細(xì)胞(WBC)計(jì)數(shù)及WBC分類的符合情況。方法 應(yīng)用XT-4000i、UF-1000i與手工顯微鏡法對120份胸腹水標(biāo)本進(jìn)行檢測，并以手工顯微鏡法作為參考方法，對UF-1000i與XT-4000i在RBC計(jì)數(shù)、WBC計(jì)數(shù)和WBC分類檢測結(jié)果進(jìn)行相關(guān)性分析。結(jié)果 在胸腹水RBC低濃度時(shí)，XT-4000i與手工顯微鏡法差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，UF-1000i與手工顯微鏡法差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。而RBC≥1 000×106/L時(shí)，兩臺儀器與手工顯微鏡法差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。對于WBC計(jì)數(shù)，兩臺儀器與手工顯微鏡法差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。XT-4000i與手工顯微鏡法對于WBC分類計(jì)數(shù)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論 UF-1000i、XT-4000i能直接用于胸腹水標(biāo)本的細(xì)胞計(jì)數(shù)，具有較高的臨床應(yīng)用價(jià)值，為體液細(xì)胞計(jì)數(shù)分類提供了一種可行性方法。而RBC≤1 000×106時(shí)，UF-1000i具有更高的靈敏度，但UF-1000i無白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)功能。兩種方法均不能完全替代手工法。

UF-1000i；XT-4000i；胸腹水；RBC；WBC

目前大部分醫(yī)院對臨床胸腹水常規(guī)檢查仍沿用手工計(jì)數(shù)法，此法是公認(rèn)的參考方法，但其操作繁瑣，受人為因素影響大，重復(fù)性差。隨著檢驗(yàn)儀器的快速發(fā)展，UF-1000i可應(yīng)用于胸腹水分析[1]，而近兩年Sysmex新推出的XT-4000i設(shè)有專門的體液分析模式，但有關(guān)報(bào)道較少。本文利用UF-1000i和XT-4000i進(jìn)行胸腹水細(xì)胞計(jì)數(shù)及白細(xì)胞的分類，并以手工顯微鏡法為參考方法，探討不同自動化儀器快速檢測不同性狀胸腹水的可行性。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源 120例胸腹水標(biāo)本均為2012年6～12月佛山市中醫(yī)院門診和住院患者送檢標(biāo)本，其中呼吸內(nèi)科48例，消化內(nèi)科14例，腫瘤內(nèi)科18例，外科22例，肝內(nèi)科13例，腎內(nèi)科5例。經(jīng)臨床診斷為結(jié)核性胸膜炎46例，肺炎31例，惡性腫瘤22例，肺挫傷11例，其他9例，所有標(biāo)本均嚴(yán)格按照胸腹水留取標(biāo)準(zhǔn)《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》[2]要求送檢。

1.2 儀器與試劑 UF-1000i全自動尿沉渣分析儀和XT-4000i新型多功能全自動血細(xì)胞分析儀由日本希森美康公司供應(yīng)，均使用原裝配套試劑。人工鏡檢顯微鏡為奧林巴斯CH30型以及標(biāo)準(zhǔn)牛鮑氏計(jì)數(shù)板，還有離心機(jī)、瑞氏染料等。

1.3 方法 120例胸腹水標(biāo)本均采用UF-1000i、XT-4000i、手工顯微鏡法檢測RBC計(jì)數(shù)、WBC計(jì)數(shù)，因UF-1000i無WBC分類功能，遂只采用手工顯微鏡法、XT-4000i檢測WBC的分類。手工顯微鏡法檢測由經(jīng)驗(yàn)豐富、操作技能佳的檢驗(yàn)人員嚴(yán)格按照《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》[2]，采用標(biāo)準(zhǔn)的牛鮑氏計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)胸腹水中RBC和WBC數(shù)并對標(biāo)本離心10 min，去掉上清液，取沉渣涂片，再采用瑞氏染色對白細(xì)胞進(jìn)行鏡檢分類。UF-1000i檢測胸腹水標(biāo)本嚴(yán)格按照UF-1000i全自動尿沉渣分析儀說明書進(jìn)行檢測。XT-4000i檢測胸腹水標(biāo)本嚴(yán)格按照XT-4000i新型多功能全自動血細(xì)胞分析儀說明書進(jìn)行檢測。兩種儀器均采用儀器配套質(zhì)控物進(jìn)行質(zhì)量控制，儀器性能符合要求。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件分析數(shù)據(jù)，以手工顯微鏡法為參考方法對所得數(shù)據(jù)進(jìn)行配對t檢驗(yàn)和線性回歸分析等統(tǒng)計(jì)處理，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三種方法RBC計(jì)數(shù)結(jié)果的比較 按RBC濃度的高低將尿樣分為三組(A組：RBC＜1 000×106/L，B組：5 000×106/L≥RBC≥1 000×106/L，C組：RBC＞5 000×106/L)，UF-1 000i、XT-4 000i與手工顯微鏡法對不同濃度RBC計(jì)數(shù)的相關(guān)性及顯著性的比較結(jié)果見表1、表2。在胸腹水RBC低濃度時(shí)，XT-4000i與手工顯微鏡法差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，UF-1000i與手工顯微鏡法差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。而RBC≥1 000×106/L時(shí)，兩臺儀器與手工顯微鏡法的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表1 UF-1000i、XT-4 000i與手工顯微鏡法對RBC計(jì)數(shù)的相關(guān)性比較

表2 胸腹水標(biāo)本中RBC計(jì)數(shù)檢測結(jié)果的比較(±s)

表2 胸腹水標(biāo)本中RBC計(jì)數(shù)檢測結(jié)果的比較(±s)

2.2 三種方法WBC計(jì)數(shù)和WBC分類結(jié)果的比較 手工顯微鏡法與UF-1000i、XT-4000i在WBC計(jì)數(shù)和WBC分類檢測結(jié)果相關(guān)性分析及比較見表3、表4。對于WBC計(jì)數(shù)，兩臺儀器與手工顯微鏡法差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。XT-4000i與手工顯微鏡法對于WBC分類計(jì)數(shù)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表3 120例胸腹水標(biāo)本中WBC計(jì)數(shù)結(jié)果的相關(guān)性及比較

表4 120例胸腹水標(biāo)本中的WBC分類計(jì)數(shù)結(jié)果的相關(guān)性及比較(±s)

表4 120例胸腹水標(biāo)本中的WBC分類計(jì)數(shù)結(jié)果的相關(guān)性及比較(±s)

注：與手工顯微鏡法比較，aP＞0.05，bP＞0.05。

3 討論

胸腹水標(biāo)本的常規(guī)檢查對標(biāo)本性質(zhì)的初步判斷起到非常重要的作用。但臨床一直采用手工法進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，此法雖為金標(biāo)準(zhǔn)，但操作繁瑣，計(jì)數(shù)誤差大，重復(fù)性差。采用自動化儀器檢測快速且精確，UF-1000i尿沉渣分析儀是用紅色半導(dǎo)體激光束照射經(jīng)過核酸熒光染色后在鞘流貫流分析池中形成的鞘流樣本，并通過對各粒子產(chǎn)生的前向散色光、側(cè)向散色光以及側(cè)向熒光信號轉(zhuǎn)換成的光信號進(jìn)行分析，從而對各種有形成分，如紅細(xì)胞、白細(xì)胞及上皮細(xì)胞等進(jìn)行識別和計(jì)數(shù)[3]。XT-4 000i血細(xì)胞分析儀專門設(shè)有體液檢測通道能全自動對體液細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)和白細(xì)胞分類的功能，實(shí)現(xiàn)了體液標(biāo)本的自動化。其DIFF通道是利用半導(dǎo)體激光的核酸熒光染色流式細(xì)胞術(shù)為原理計(jì)數(shù)及分類胸腹水中的有核細(xì)胞，能夠最大程度的避免一般血細(xì)胞分析儀傳統(tǒng)電阻抗法所受到的電脈沖噪聲信號、細(xì)胞碎片、污染物、氣泡等的影響[4]，從而對體液標(biāo)本進(jìn)行全面的分析。

本研究采用UF-1000i、XT-4000i及手工顯微鏡法同時(shí)對120例胸腹水進(jìn)行紅細(xì)胞、白細(xì)胞計(jì)數(shù)及白細(xì)胞分類，三種方法的相關(guān)性均良好。以手工顯微鏡法為參考方法，三種方法檢測結(jié)果經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，在胸腹水RBC＜1 000×106/L時(shí)應(yīng)用UF-1 000i測定RBC較準(zhǔn)確，其原因是XT-4 000i的靈敏度較低，廠家提供線性范圍為(1～8)×1012/L對于低濃度的標(biāo)本很難準(zhǔn)確計(jì)數(shù)。而5 000×106/L≥RBC≥1 000×106/L時(shí)，兩臺儀器測定RBC差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。當(dāng)RBC＞5 000×106/L，應(yīng)用XT-4 000i測定RBC更準(zhǔn)確、方便，因?yàn)閁F-1000i的線性范圍為(1～5 000)×106/L，超出此范圍需對標(biāo)本進(jìn)行稀釋再計(jì)數(shù)，否則無法得到準(zhǔn)確計(jì)數(shù)，但對于最終計(jì)算得出的結(jié)果，兩臺儀器差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，只是使用UF-1 000i則要增加稀釋這一步，操作稍繁瑣，也增加了結(jié)果不準(zhǔn)確性的可能。對于WBC計(jì)數(shù)，兩臺儀器與手工顯微鏡法差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。胸腹水白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)要求計(jì)算單個(gè)核細(xì)胞和多核細(xì)胞所占比例，XT-4000i能滿足實(shí)驗(yàn)要求，與手工顯微鏡計(jì)數(shù)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而UF-1000i沒有此功能。UF-1000i和XT-4000i可在相當(dāng)大范圍內(nèi)對各種細(xì)胞進(jìn)行準(zhǔn)確計(jì)數(shù)，定量報(bào)告，UF-1 000i對標(biāo)本的分析量(800μl)[5]、XT-4 000i對標(biāo)本的分析量(85μl)均比手工細(xì)胞計(jì)數(shù)(10μl)的多，這增加了結(jié)果的準(zhǔn)確性，且具有操作規(guī)范化、檢測自動化、快速，重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)。但亦有相應(yīng)缺點(diǎn)，因胸腹水中有形成分較復(fù)雜，其中包括結(jié)晶、上皮細(xì)胞以及大量的蛋白黏液絲等，干擾了儀器的計(jì)數(shù)及分類，且對于渾濁或膿性粘稠標(biāo)本容易引起儀器管道堵塞，不易應(yīng)用[6]，可作為胸腹水常規(guī)檢查的篩檢之用，目前尚不能完全取代手工顯微鏡法。

綜上所述，UF-1000i和XT-4000i是分別針對尿液和血液細(xì)胞計(jì)數(shù)設(shè)計(jì)的自動化儀器，雖然XT-4000i設(shè)有專門的體液檢測通道，但單一儀器的線性范圍較窄，不能完全涵蓋臨床標(biāo)本細(xì)胞濃度范圍,而聯(lián)合使用不同儀器則有助于拓寬檢測的線性范圍。但從節(jié)省成本考慮，本文建議對于低濃度胸腹水標(biāo)本則使用UF-1000i進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，對于中、高濃度的則使用XT-4 000i進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)及白細(xì)胞分類。

[1]徐淑貞,陳明濤.UF-1000i尿沉渣分析儀在胸腹水有核細(xì)胞計(jì)數(shù)中的應(yīng)用[J].浙江實(shí)用醫(yī)學(xué),2011,4(16):302-303.

[2]葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].3版.南京:東南大學(xué)出版社,2006:312-317.

[3]張慶芳.UF-1000i全自動尿沉渣分析儀在胸腹水檢查中的應(yīng)用[J].中國實(shí)用醫(yī)藥,2009,4(33):34-35.

[4]胡 穎.SYSMEX XT-4 000i檢測胸腹水有核細(xì)胞結(jié)果分析[J].中國保健營養(yǎng),2012,10:1689-1690.

[5]魏 明,甘 文.UF-100全自動尿沉渣分析儀在胸腹水檢查中的應(yīng)用[J].江西醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2004,44(5):107.

[6]李 瑩,孫玉鴻,王英敏,等.UF-100尿液分析儀及血細(xì)胞分析儀在胸腹水白細(xì)胞計(jì)數(shù)中的對比性研究[J].黑龍江醫(yī)學(xué)科學(xué),2010, 33(1):134-135.

讀者·作者·編者

標(biāo)準(zhǔn)醫(yī)學(xué)名詞表(待續(xù))

(本表以全國自然科學(xué)名詞審定委員會公布的《醫(yī)學(xué)名詞》為據(jù))

Value of different methods in the detection of hydrothorax and ascites cell components.

ZHONG Shu-qi,DENG Qiu-ping,LIANG Min-hua,HU Ming-fen.
Department of Clinical Laboratory,Traditional Chinese Medicine Hospital of Foshan,Foshan 528000,Guangdong,CHINA

Objective To investigate the compliance of red blood cells(RBC)count,white blood cell (WBC)count and leukocyte classification of hydrothorax and ascites by the UF-1000i urine formed elements analyzer and XT-4000i multifunctional automatic blood cell analyzer.MethodsOne hundred and twenty hydrothorax and specimens were detected by XT-4000i multifunctional automatic blood cell analyzer as the reference method. The results of correlation analysis of RBC count,WBC count and leukocyte classification were analyzed by the XT-4000i and the UF-1000i.ResultsIn pleural and ascitic fluid low concentration RBC,XT-4000i and manual microscopy method had significant difference,UF-1000i and manual microscopy method had no significant difference. No significant difference between two instruments and manual microscopy method when RBC≥1 000×106/L.The difference of the two instruments and manual microscopy method was not statistically significant in the WBC count.It is no significant difference in leukocyte classification by the XT-4000i and manual microscopy method.ConclusionThe UF-1000i and the XT-4000i can be directly used for the cell count in the hydrothorax and specimens,which has high clinical value and provides a feasible method for classification of body fluid cell count.The UF-1000i has more advantages when RBC≤1 000×106/L,but the UF-1000i doesn't have the function of leukocyte classification.Both two methods can not completely replace the manual method.

UF-1000i;XT-4000i;Hydrothorax and ascites;Red blood cells(RBC);White blood cell(WBC)

R446.63

A

1003—6350（2014）02—0218—03

2013-06-30)

10.3969/j.issn.1003-6350.2014.02.0082

鐘樹奇。E-mail：zhongshuqi@sohu.com