肝復(fù)樂膠囊中揮發(fā)油提取工藝研究*

王傳杰 高立霞 馬全龍 韓麗麗

(泰山醫(yī)學(xué)院附屬泰山醫(yī)院,山東 泰安 271000; 2.山東醫(yī)藥技師學(xué)院,山東 泰安 271000; 3.濟南龍華醫(yī)藥技術(shù)有限公司,山東 濟南 250100)

肝復(fù)樂膠囊由黨參、鱉甲(醋制)、重樓、黃芪、大黃、柴胡、桃仁、土鱉蟲、白術(shù)(炒)、陳皮、半枝蓮、敗醬草、茯苓等二十一味中藥組成,具有健脾理氣，化瘀軟堅，清熱解毒之功。適用于以肝瘀脾虛為主證的原發(fā)性肝癌，證見上腹腫塊，脅肋疼痛，神疲乏力，食少納呆，脘腹脹滿，心煩易怒，口苦咽干等。方中沉香、白術(shù)、陳皮、敗醬草、郁金、茵陳、香附、柴胡均含有揮發(fā)油類成分，為充分提取揮發(fā)油，以保證藥效，我們采用正交實驗法以對揮發(fā)油進行了提取研究，最大程度保留混合揮發(fā)油。

1 材料與儀器

揮發(fā)油提取器(上海嵐虹玻璃儀器有限公司)；ZNHW-I智能恒溫電熱套 (上海羌強儀器設(shè)備有限公司)；ESJ200-4B電子天平(鄭州南北儀器設(shè)備有限公司)。夏枯草、柴胡、赤芍、莪術(shù)等藥材均購于泰安永春堂藥店 (經(jīng)檢驗均符合《中國藥典》2010版一部規(guī)定)。

2 方法與結(jié)果

2.1沉香、白術(shù)、陳皮、敗醬草、郁金、茵陳、香附、柴胡吸水率的考察 按處方量稱取沉香2.8 g、白術(shù)28 g、陳皮28 g、敗醬草28 g、郁金28 g、茵陳28 g、香附28 g、柴胡14 g，用10倍量水浸泡至透心，結(jié)果藥材的吸水率為185.0%。

2.2揮發(fā)油正交實驗設(shè)計[1-3]為了提高揮發(fā)油得率，對揮發(fā)油提取過程中影響大的因素如提取時間(A)、加水量(B)、藥材粉碎粒度(C)、和浸泡時間(D)四個考察因素，以揮發(fā)油得率為考察指標，設(shè)計L9(34)表進行正交試驗，結(jié)果見表1。

2.3揮發(fā)油提取 稱取沉香2.8 g、白術(shù)28 g、陳皮28 g、敗醬草28 g、郁金28 g、茵陳28 g、香附28 g、柴胡14 g，總計184.8 g，分別粉碎成不同目數(shù)，按正交試驗表將藥粉與相應(yīng)量的水置圓底燒瓶中，連接揮發(fā)油測定器與回流冷凝管，自冷凝管上端加水使充滿揮發(fā)油提取器的刻度部分，并溢出流入燒瓶為止。置電熱套中緩緩加熱至沸，并保持微沸至規(guī)定時間；停止加熱，放置片刻，開啟測定器下端的活塞，將水緩緩放出，至油層上端到達刻度0線上面5 mm處為止，放置1小時以上，再開啟活塞使油層下降至其上端恰與刻度0線平齊，讀取揮發(fā)油量，按下式計算揮發(fā)油得率，揮發(fā)油得率=揮發(fā)油體積(ml)/藥材量(g)×100%，結(jié)果見表2，3。

表1 因素水平表

表2 試驗安排及結(jié)果

表3 方差分析

注：F0.05(2，2)=19.00，*P<0.05。

從正交實驗結(jié)果看，藥材的提取時間(A)、粉碎度(B)和加水量(C)對揮發(fā)油量有顯著影響(P<0.05)，各因素對揮發(fā)油提取影響大小依次為提取時間>藥材粒度>加水量>浸泡時間，最佳工藝為A3B3C2D1。A3與A2間無明顯差別，為便于生產(chǎn)操作、降低能源消耗，確定優(yōu)選工藝為A2B3C2D1，即將藥材粉碎過50目篩，加10倍量水浸泡1 h，回流提取4 h。

2.4驗證試驗 稱取沉香2.8 g、白術(shù)28 g、陳皮28 g、敗醬草28 g、郁金28 g、茵陳28 g、香附28 g、柴胡14 g，各六份，分成2組，每組藥材重184.8 g，按最佳工藝A3B3C2D1(藥材粉碎過50目篩，加10倍量水浸泡1 h，回流提取5 h)和優(yōu)選工藝A2B3C2D1(藥材粉碎過50目篩，加10倍量水浸泡1 h，回流提取4 h)提取揮發(fā)油，各提取3次，對提取條件進行驗證，結(jié)果見表4。

表4 揮發(fā)油驗證試驗結(jié)果表

兩種結(jié)果基本無差別，最終確定沉香、白術(shù)、陳皮、敗醬草、郁金、茵陳、香附、柴胡揮發(fā)油提取工藝為藥材粉碎過50目篩，加10倍量水浸泡1h，回流提取4h。

3 討 論

沉香、白術(shù)、陳皮、敗醬草、郁金、茵陳、香附、柴胡中揮發(fā)油具明顯藥理作用，在制劑制備工藝中需對揮發(fā)油單獨進行提取，以保證藥效。

中草揮發(fā)油提取多種方法，包括水蒸氣蒸餾法、有機溶劑提取法、同時蒸餾-萃取法、超臨界流體萃取法、微波輻射法、超聲波輔助提取法、固相微萃取法、亞臨界水萃取法、分子蒸餾技術(shù)等。其中的水蒸氣蒸餾法是提取揮發(fā)油的傳統(tǒng)方法[4]。

通過采用正交試驗，確定了肝復(fù)樂膠囊中揮發(fā)油的最佳提取工藝，即藥材粉碎過50目篩，加10倍量水浸泡1 h，回流提取4 h，并對最佳提取工藝進行了驗證，結(jié)果表明該工藝操作性強、重復(fù)性好等優(yōu)點，為肝復(fù)樂膠囊的研制提供了依據(jù)。

[1] 肖功勝,楊云,孫維英,等.柴胡有效成分提取工藝的研究[J].時珍國醫(yī)國藥,2008,19(8):1829．

[2] 李佳林,宋宏春,張宏宇,等.清心沉香八昧丸中揮發(fā)油提取工藝的優(yōu)化[J].北方藥學(xué),2008,5(3):23-24．

[3] 陳占立,孫愛平,李知遙,等.正交試驗優(yōu)選陳皮揮發(fā)油的最佳提取工藝條件[J].中國藥業(yè),2010,19(2):42-43．

[4] 王曉麗,都曉偉,張碩辛,等.肝達康中揮發(fā)油的提取工藝研究[J].時珍國醫(yī)國藥,2013,24(4):879-880．