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    黃牛巴氏桿菌病的診斷及治療

    2014-06-03 03:20:06宋莎莎
    中國畜牧獸醫(yī)文摘 2014年5期
    關(guān)鍵詞:恒溫氏桿菌瓊脂

    于 浩 宋莎莎

    (山東省乳山市南黃鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)工作站,山東乳山 264500)

    牛巴氏桿菌病是由巴氏桿菌引起的一種急性、熱性傳染病,主要經(jīng)消化道傳染,其次,為呼吸道或傷口傳染[1,2]。本病一般呈散發(fā)性流行,通常是突然發(fā)病,發(fā)生高熱和肺炎,有時表現(xiàn)水腫病變,各臟器出血等[3,4]。

    2013年5月,乳山市某肉牛場150余頭9月齡左右的育肥黃牛暴發(fā)此病。5月初從濟寧購進,5月中旬開始陸續(xù)發(fā)病、死亡,截止6月10日大群發(fā)病,死亡10余頭,遂采集病料進行病原菌分離鑒定及藥敏試驗,篩選敏感藥物,合理選擇用藥,為該牛場的病情控制提供及時有效的幫助。

    1 試驗材料與儀器

    1.1 試驗材料

    采集該牛場糞便、血液,并取病死牛肺、淋巴結(jié)、脾臟等病變臟器。

    1.2 主要試劑及培養(yǎng)基

    三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基、革蘭氏染液、麥康凱瓊脂培養(yǎng)基、營養(yǎng)肉湯、尿素酶培養(yǎng)基、營養(yǎng)瓊脂及微量糖發(fā)酵管等。

    1.3 試驗儀器

    自動電熱壓力蒸汽滅菌器,電熱恒溫鼓風干燥箱,電熱恒溫培養(yǎng)箱,超凈工作臺。

    1.4 抗菌藥物紙片

    環(huán)丙沙星、林可霉素、慶大霉素、強力霉素、鏈霉素及頭孢噻呋等。

    2 試驗方法

    2.1 臨床癥狀和病理觀察

    2.1.1 臨床癥狀觀察

    觀察病牛精神狀態(tài)、體表特征、糞便顏色和質(zhì)地、尿液顏色以及檢測體溫、呼吸數(shù)和心率等臨床特征,并詢問養(yǎng)殖場技術(shù)人員病死牛的病程變化情況。

    2.1.2 病理剖檢觀察

    對病死牛進行剖檢,觀察其可視粘膜、胃腸道、脾臟、肺臟、血液等病變情況。

    2.2 細菌的分離純化和鏡檢

    2.2.1 病原菌分離純化

    將病料無菌接種于血瓊脂培養(yǎng)基上,于37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h,觀察細菌生長情況、菌落特征。然后挑取可疑菌落再接種于血瓊脂培養(yǎng)基上進行純化,將純培養(yǎng)細菌接種于麥康凱培養(yǎng)基上,37℃恒溫培養(yǎng)24 h,觀察記錄其生長情況。

    2.2.2 鏡檢

    挑取可疑菌落,革蘭氏染色、鏡檢。

    2.3 細菌的生化鑒定

    2.3.1 糖發(fā)酵

    將待檢菌株分別接種在蔗糖、麥芽糖、葡萄糖、乳糖、甘露醇、尿素、枸櫞酸微量發(fā)酵生化管中,于37℃恒溫培培養(yǎng)48 h,觀察記錄結(jié)果。

    2.3.2 尿素酶試驗

    將待檢菌種做穿刺劃線,接種于尿素酶斜面培養(yǎng)基中,37℃恒溫培養(yǎng)24h,觀察記錄結(jié)果。若培養(yǎng)基由黃色變?yōu)榧t色為陽性,否則為陰性。

    2.3.3 三糖鐵試驗

    將待檢細菌穿刺接種于三糖鐵(TSI)瓊脂中,37℃恒溫培養(yǎng)24 h,觀察記錄結(jié)果。

    2.4 藥敏試驗

    2.4.1 菌液的制備

    挑取血瓊脂培養(yǎng)基上的3~5個菌落,加入無菌的盛有2~3 ml營養(yǎng)肉湯的離心管中。37℃恒溫培養(yǎng)12 h,備用。

    2.4.2 藥敏試驗

    參照有關(guān)資料介紹方法進行[5]。取上述菌液0.1 ml于血瓊脂平板上,涂勻,室溫干燥5 min,將藥敏紙片置于培養(yǎng)基表面。37 ℃恒溫培養(yǎng)12 h,觀察記錄結(jié)果。

    2.5 藥物治療試驗

    根據(jù)藥敏試驗結(jié)果對牛群進行藥物治療,并記錄治療效果。

    3 結(jié)果

    3.1 臨床癥狀

    患牛突然發(fā)病,體溫升高,達41℃~42℃,精神沉郁,食欲、飲欲不振,反芻次數(shù)減少;鼻鏡干燥,呼吸困難,由鼻孔流出大量粘性液體;有的帶有血色,糞便成稀糊狀并混有血液,有的糞便排泄物中帶有大塊的壞死脫落的腸粘膜。病牛努責頻繁,有里急后重的表現(xiàn)。有的病牛眼睛紅腫、流淚??崴聘忻?,當?shù)孬F醫(yī)按感冒和腸炎進行治療近1周,結(jié)果不但沒有抑制病情發(fā)展,反而出現(xiàn)死亡病例增多的現(xiàn)象。

    3.2 病理變化

    全身淋巴結(jié)腫大、出血,氣管內(nèi)有大量泡沫樣粘液,肺臟充血、出血、淤血,呈大理石樣,胸腔和心包積液;肝臟腫大,膽汁潴留,呈墨綠色;大網(wǎng)膜和腸系膜上有大面積彌漫性點狀、片狀出血,真胃和十二指腸粘膜水腫、增厚、出血,結(jié)腸呈紫紅色,有的發(fā)生壞死。

    3.3 細菌分離結(jié)果

    3.3.1 細菌分離

    從所采集病料中共分離出3株巴氏桿菌,由淋巴結(jié)中得到的菌株定為1號菌,由糞便中得到的菌株定位為2號菌,由肺中得到的菌株定為3號菌。

    細菌在血瓊脂平板上生長良好,菌落呈淡灰色、圓形、濕潤、露珠樣小菌落,無溶血現(xiàn)象。在麥康凱培養(yǎng)基上1號細菌不生長,2號、3號細菌生長良好且菌落邊緣整齊表面光滑。

    3.3.2 染色鏡檢

    細菌呈革蘭氏陰性,單個存在,兩端鈍圓兩極濃染。

    3.4 生化試驗結(jié)果

    對所分離出的3株巴氏桿菌進行生化試驗鑒定,其中,1號菌株蔗糖、尿素、葡萄糖、甘露醇為陽性,其余為陰性。2號、3號菌株蔗糖、尿素、乳糖、麥芽糖、葡萄糖、甘露醇為陽性,三糖鐵試驗和尿素酶試驗為陽性,其余為陰性。根據(jù)各試驗結(jié)果可以推斷出1號為多殺性巴氏桿菌,2號、3號為產(chǎn)氣性巴氏桿菌。生化鑒定結(jié)果見表1。

    3.5 藥敏試驗結(jié)果

    通過藥敏試驗可知,多殺性巴氏桿菌和產(chǎn)氣性巴氏桿菌對頭孢菌素和強力霉素較為敏感。藥敏試驗結(jié)果見表2。

    表1 生化試驗試驗結(jié)果

    表2 不同藥物對巴氏桿菌的抑菌圈記錄表

    3.6 治療

    根據(jù)藥敏試驗結(jié)果,發(fā)病后,采用頭孢噻呋鈉10 mg/kg·bw進行治療連用5 d,效果較好,對于病情嚴重的牛用葡萄糖靜脈注射進行補液,經(jīng)治療,除病情嚴重的1頭牛死亡外,其余全部治愈而且再無新病例發(fā)生。

    4 討論

    牛巴氏桿菌病是一種常見多發(fā)的烈性熱性傳染病,對養(yǎng)牛業(yè)危害非常嚴重。巴氏桿菌為條件病原菌,一些誘發(fā)因素如營養(yǎng)不良,寄生蟲感染、長途運輸、飼養(yǎng)管理條件不良等都可促進本病發(fā)生[6,7]。該牛場是在購買后不久發(fā)病,探究其發(fā)病原因,可能是在長途運輸過程中,機體處于長時間的應(yīng)激狀態(tài),神經(jīng)系統(tǒng)和內(nèi)分泌系統(tǒng)功能紊亂引起機體營養(yǎng)物質(zhì)大量消耗,機體免疫力下降,從而導(dǎo)致該病的發(fā)生。邢玫等就曾報道過運輸應(yīng)激能導(dǎo)致牛場暴發(fā)巴氏桿菌病。此外,在飼養(yǎng)過程中,養(yǎng)殖戶要特別注意環(huán)境衛(wèi)生,及時進行環(huán)境的消毒。

    目前,許多地方獸醫(yī)盲目使用廣譜抗菌藥以致使巴氏桿菌產(chǎn)生了廣泛的耐藥性。因此,在臨床治療時,應(yīng)先進行藥敏試驗,不僅能及時有效的治療疾病而且能最大限度減少耐藥性的產(chǎn)生。

    多殺性巴氏桿菌致病率高,病死率也高,在防治過程中應(yīng)該預(yù)防為主。對發(fā)病死亡牛深埋消毒,污染環(huán)境、用具、廄舍徹底清掃消毒;對發(fā)病牛和疑似病牛立即隔離進行治療,健康牛要做好認真觀察,同群牛和周圍牛進行緊急預(yù)防注射;加強飼養(yǎng)管理,增強牛體抵抗力[8]。

    [1]Carter,G.R.,Am[J].Vet.Res.,1955,(16):481-484.

    [2]郭大和,鄭明,潘松年.我國多殺性巴氏桿菌莢膜抗原的血清學(xué)鑒定[J].畜牧獸醫(yī)學(xué)報,1979,10(2):67-78.

    [3]閆海.牦牛巴氏桿菌病的調(diào)查與防治[J].甘肅畜牧獸醫(yī),2007,37(1):33-34.

    [4]張立成.高原牦牛巴氏桿菌病流行特點與分析[J].中國獸醫(yī)雜志,2007,43(7):46.

    [5]HEDDLESTON K L,REBERS P A. Fowl cholera:cross-immunity induced in turkeys with formalin-killed in-vivo-propagated Pasteurella mu tocida[J].A-vian Dis,1972,16(3):578-586.

    [6]余旭平,鄔棟棟,劉曉寧,等. 血清1和3型多殺性巴氏桿菌鐵調(diào)控外膜蛋白共同抗原的初步分析[J].畜牧獸醫(yī)學(xué)報,2008,39(2):245-250.

    [7]朱進江,陳建新,余銀江,等.牛巴氏桿菌病的診治[J].貴州畜牧獸醫(yī),2008,23(4):35.

    [8]楊玉蘭.牛巴氏桿菌病的臨床診斷與綜合防治[J].農(nóng)技服務(wù),2009,26(1):112-118.

    [9]李平安,楊蓮茹,商曉桂,等.牛溶血性巴氏桿菌的分離鑒定[J].內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報,2008,29(1):1-3.

    [10]邢玫,張嵐,張波.巴氏桿菌病的診斷與治療[J].新疆畜牧業(yè),2007,(2):30-31.

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