豬瘟ELISA抗體檢測(cè)試劑盒的應(yīng)用效果比較試驗(yàn)

李曉薇 李永強(qiáng) 鐘小艷

（1.璧山縣璧城畜牧獸醫(yī)站，重慶 402760；2.璧山縣養(yǎng)殖業(yè)技術(shù)服務(wù)中心，重慶 402760）

豬瘟（CSF）是由豬瘟病毒感染引起的豬的急性、熱性、高度致死性傳染病，是嚴(yán)重影響?zhàn)B豬業(yè)發(fā)展的主要疫病之一。世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）將其列為A類16種傳染病之一，我國(guó)亦將其列為一類傳染病，是發(fā)生最多、危害最大、流行最廣的動(dòng)物傳染病之一。按照農(nóng)業(yè)部國(guó)家動(dòng)物疫病強(qiáng)制免疫計(jì)劃和省屬要求，豬瘟免疫抗體檢測(cè)采用正向間接血凝試驗(yàn)（IHA）或者酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）2種方法，其中，ELISA應(yīng)用最廣[1]。然而，不同廠家生產(chǎn)的試劑盒檢測(cè)結(jié)果是否存在差異，一些技術(shù)人員還很難確定。所以，我們選擇了2個(gè)國(guó)內(nèi)廠家生產(chǎn)的豬瘟ELISA抗體檢測(cè)試劑盒進(jìn)行了比對(duì)試驗(yàn)，供基層同行參考。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 檢測(cè)試劑 市售檢測(cè)豬瘟抗體的2種國(guó)產(chǎn)ELISA試劑盒（A、B兩廠家）。

1.1.2 血清來源 隨機(jī)采取免疫信息清晰的84份豬血液樣木，分離血清，置4 ℃冰箱保存?zhèn)溆?。樣品來源為體質(zhì)健壯、體重不等、兔疫時(shí)間、免疫次數(shù)不一的商品豬群。

1.2 檢測(cè)方法

1.2.1 重復(fù)性試驗(yàn) 從84份檢測(cè)樣品中隨機(jī)抽取1份，將樣品設(shè)6個(gè)平行試驗(yàn)孔，分別使用2種試劑盒進(jìn)行重復(fù)性試驗(yàn)，檢測(cè)試劑盒均在有效期內(nèi)，檢測(cè)操作按盒內(nèi)說明書進(jìn)行，各試劑檢測(cè)對(duì)照均成立，檢測(cè)結(jié)果按試劑盒要求判定。

1.2.2 2種試劑盒檢測(cè)豬瘟抗體比較試驗(yàn) 將84份樣品分別用2種試劑盒進(jìn)行豬瘟抗體檢測(cè)，檢測(cè)試劑盒均在有效期內(nèi)，檢測(cè)操作按盒內(nèi)說明書進(jìn)行，各試劑檢測(cè)均設(shè)對(duì)照，檢測(cè)結(jié)果按試劑盒要求判定。

2 結(jié)果與分析

2.1 重復(fù)性試驗(yàn)

同一份樣品，用2種不同試劑盒檢測(cè)，其陰性、陽(yáng)性結(jié)果沒有變化。試驗(yàn)所得數(shù)據(jù)中各個(gè)觀察值的變異程度不大，試驗(yàn)數(shù)據(jù)具有較高的參考價(jià)值。

2.2 定性比較

了解2種試劑盒的相似性與差異性，可以參考2種試劑盒檢測(cè)結(jié)果的陽(yáng)性率和2種試劑盒之間的符合率。所檢樣品的豬瘟抗體陽(yáng)性率、陰性率見表1。

表1 2種試劑盒檢測(cè)豬瘟抗體結(jié)果

從表1可知，A廠家豬瘟ELISA抗體試劑盒檢測(cè)豬瘟抗體陽(yáng)性率為61.90%，陰性率為38.10%；B廠家的抗體陽(yáng)性率為69.05%，陰性率為30.95%，根據(jù)統(tǒng)計(jì)分析，兩者比較u＜1.96，p＞0.05，表明兩廠家試劑盒檢測(cè)豬瘟抗體陽(yáng)性率及陰性率差異不顯著。

2.3 符合率比較

兩廠家試劑盒檢測(cè)豬瘟抗體的陽(yáng)性符合率為98.08%，陰性符合率為78.13%，總符合率為90.48%，具有較高的符合率，見表2。但B廠家的試劑盒比A廠家試劑盒的親和性更高，敏感性更強(qiáng)。

表2 2種試劑盒檢測(cè)豬瘟抗體比較

3 討論

（1）大多數(shù)試驗(yàn)情況都需要高敏感性和高特異性，但在單一試驗(yàn)中，兩者卻很難同時(shí)具備。本試驗(yàn)中，A廠家試劑盒的陽(yáng)性率較低，其敏感性不高，但特異性更強(qiáng)；B廠家試劑盒陽(yáng)性率較高，敏感性更強(qiáng)但特異性更差。在實(shí)際生產(chǎn)中，抗體的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)和免疫效果評(píng)價(jià)要求試劑盒有較高的敏感性。相反，引種監(jiān)測(cè)以及個(gè)體淘汰則要求檢測(cè)試劑盒有較高的特異性。所以，要明確檢測(cè)目的不同對(duì)于試劑盒敏感性和特異性的要求，合理地選用試劑盒，更好的為實(shí)際生產(chǎn)服務(wù)。

（2）綜上所述，從本次試驗(yàn)結(jié)果分析來看，兩廠家生產(chǎn)的豬瘟ELISA抗體檢測(cè)試劑盒陽(yáng)性率、陰性率差異不顯著，且陽(yáng)性符合率、陰性符合率及總符合率較高，相比進(jìn)口試劑盒更加低廉，在實(shí)際基層工作中可以靈活應(yīng)用；保證免疫監(jiān)測(cè)工作的完成，為指導(dǎo)生產(chǎn)、防制豬瘟的暴發(fā)提供可靠的依據(jù)。同時(shí)，解決了試劑盒實(shí)際供應(yīng)及監(jiān)測(cè)經(jīng)費(fèi)緊張等問題。

[1]龐然，張小敏，周斌，等. 4種商品化試劑盒檢測(cè)豬瘟病毒抗體的比較分析[J].中國(guó)獸醫(yī)雜志，2011，（9：40-42.