黃芩苷減輕奧沙利鉑導(dǎo)致熱痛覺過敏的脊髓機制

宋超 趙靜 嵇紹干

目前, 奧沙利鉑仍是推薦應(yīng)用的一線胃腸道腫瘤化療藥物, 但是, 奧沙利鉑可導(dǎo)致嚴(yán)重的外周神經(jīng)病變和痛覺過敏現(xiàn)象, 在很大程度上限制了鉑類化療藥的應(yīng)用［1］。遺憾的是,目前鎮(zhèn)痛藥物并不能有效緩解化療藥物導(dǎo)致的疼痛性神經(jīng)病變［2］。本文旨在尋找能安全有效緩解化療后疼痛的藥物。在前期篩選中, 作者發(fā)現(xiàn)傳統(tǒng)中藥黃芩的活性提取物黃芩苷可能有效。黃芩苷具有抗炎、抗氧化、鎮(zhèn)靜以及抗腦損傷等多種有益的作用［3,4］, 并且還能顯著緩解神經(jīng)損傷導(dǎo)致的難治性神經(jīng)病理性疼痛［5］。黃芩苷能否緩解奧沙利鉑導(dǎo)致的痛覺過敏？將在下文中詳細(xì)探討。

1 材料與方法

1.1 材料 成年健康雄性SD大鼠(徐州醫(yī)學(xué)院動物實驗中心), 體重180～220 g, 清潔級, 12 h明暗交替飼養(yǎng), 自由進食進水。在進行實驗前, 至少適應(yīng)環(huán)境和實驗條件1周。

1.2 實驗試劑和儀器來源 奧沙利鉑購自南京制藥廠有限公司(批號20100703)；黃芩苷, 純度95%, 購自南京澤朗植提技術(shù)有限公司；7-NI購自美國sigma公司；熱敏測痛儀購自美國harvard公司。

1.3 奧沙利鉑誘導(dǎo)的疼痛模型建立 參考國外學(xué)者的實驗方法［6］, 奧沙利鉑溶解于5%的葡萄糖水中, 現(xiàn)用現(xiàn)配。給大鼠奧沙利鉑4 mg·kg-1腹腔注射, 每周連續(xù)注射2 d, 間隔5 d, 共3個周期。建立化療藥物誘導(dǎo)的疼痛模型。將實驗動物隨機分為四組, 模型對照組(奧沙利鉑, 腹腔注射4.0 mg·kg-1), 黃芩苷治療組(在注射奧沙利鉑前, 鞘內(nèi)注射黃芩苷 40 μg ·10 μl-1), 7-NI治療組 (在注射奧沙利鉑前 , 鞘內(nèi)注射7-NI 40 μg·10 μl-1)和空白對照組(僅接受與注射奧沙利鉑同等體積的5%葡萄糖水)。

1.4 熱痛覺過敏測定 按照文獻方法測定各組大鼠熱刺激縮足反射閾值 (thermal withdrawal threshold, TWT)［7］。各組大鼠在接受奧沙利鉑和/或黃芪苷等處理后的第7、14、21天時, 用熱敏儀刺激大鼠后足, 記錄后足抬起時的讀數(shù)值,每只大鼠接受刺激5次, 每次間隔>10 min, 記錄后4次測定的平均值。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法 利用SPSS15.0軟件進行統(tǒng)計分析, 計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示, 采用t檢驗, 組間差異比較采用單因素方差分析。檢驗水準(zhǔn)取α=0.05。P<0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 黃芩苷可以模擬nNOS抑制劑7-NI的作用 顯著減輕奧沙利鉑誘導(dǎo)的熱痛覺過敏行為學(xué)顯示, 與注射奧沙利鉑之前相比, 奧沙利鉑注射后第7、14、21天, 大鼠對于熱刺激縮足的反應(yīng)閾值顯著縮短(P<0.01), 說明長期應(yīng)用奧沙利鉑,可以誘發(fā)大鼠熱痛覺過敏的現(xiàn)象。黃芩苷治療組與相應(yīng)天數(shù)的模型對照組比較, 熱痛覺過敏的現(xiàn)象顯著減輕(P<0.01或P<0.05), 并且與7-NI的治療作用相類似, 見表1。

表1 各組大鼠熱刺激縮足反射閾值比較( ±s)

表1 各組大鼠熱刺激縮足反射閾值比較( ±s)

注：a與自身基礎(chǔ)值比較, P< 0.01, b與模型對照組比較, P< 0.05, c與模型對照組比較, P< 0.01

基礎(chǔ)值 第7天 第14天 第21天空白對照組 12.61±2.41 12.42±1.85 11.54±2.64 11.60±1.47模型對照組 11.82±2.25 7.46±3.11a 5.74±2.11a 5.21±1.26a黃芩苷治療組 12.24±2.97 9.41±1.32b 8.79±3.11c 7.12±1.14c 7-NI治療組 11.94±1.46 9.22±2.54b 8.43±2.13c 7.45±0.89c

3 討論

鉑類化療藥物導(dǎo)致痛覺過敏的現(xiàn)象是其臨床常見的副作用之一, 患者通常痛苦不堪。本文發(fā)現(xiàn), 黃芩苷能夠抑制奧沙利鉑導(dǎo)致的熱痛覺過敏, 提示黃芪苷可能對于奧沙利鉑導(dǎo)致的CIPN具有很好的治療作用。作者仍想知道的是黃芩苷抑制奧沙利鉑導(dǎo)致的熱學(xué)痛覺過敏的機制。

研究發(fā)現(xiàn), 化療藥物導(dǎo)致脊髓水平一氧化氮水平升高,nNOS和cGMP蛋白水平升高, 可能是導(dǎo)致痛覺過敏產(chǎn)生的重要因素［8］, 并且在疼痛信號的初級整合中心——脊髓部位給予nNOS的抑制劑7-NI, 可以減輕長春新堿誘導(dǎo)的外周神經(jīng)疼痛的癥狀［9］。這說明, 脊髓NO可能促進了化療藥物神經(jīng)病理性疼痛的產(chǎn)生。本文發(fā)現(xiàn), 黃芩苷可模擬7-NI的作用,抑制奧沙利鉑導(dǎo)致的熱痛覺過敏。這說明, 黃芩苷可能通過抑制脊髓NO的合成從而減輕了CIPN的程度。鑒于黃芩苷的安全性和有效性, 這一研究成果可能對于臨床緩解鉑類化療使用患者的痛苦具有一定的臨床實用價值。

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