天山花楸正丁醇部位降糖效果研究

李樂　 蘇向輝　 唐輝

摘要 [目的]對天山花楸的有效成分進(jìn)行提取分離，探索正丁醇部位的降糖效果。[方法]采用回流提取法對天山花楸進(jìn)行提取，梯度洗脫，獲得正丁醇部位，以鏈脲佐菌素（STZ）誘發(fā)小白鼠糖尿病模型，利用該部位進(jìn)行降血糖試驗。[結(jié)果]正丁醇部位給藥組與模型組相比，有明顯降糖效果。[結(jié)論]天山花楸具有一定的抗糖尿病作用。

關(guān)鍵詞 天山花楸（Sorbus tianschanica.Rupr）；正丁醇部位；糖尿病

中圖分類號 S567 文獻(xiàn)標(biāo)識碼

A 文章編號 0517-6611（2014）08-02303-02

Hypoglycemic Effect of nbutanol Part of Sorbus tianschanica

LI Le， TANG Hui et al （Pharmacy College of Shihezi University， Shihezi， Xinjiang 832002）

Abstract [Objective] To study the hypoglycemic effect of nbutanol part of tianschanica. [Method] Sorbus tianshanica was extracted with flux method， through gradient elution， nbutanol part was obtained. The diabetic rat model was induced by intraperitoneal injection of STZ， the rat blood glucose levels was detected. [Result] nbutanol part could lower blood glucose level in STZ induced hyperglycaemic rats. [Conclusion] Sorbus tianschanica has significant hypoglycemic effect.

Key words Sorbus tianschanica； nbutanol； Diabetes

天山花楸（Sorbus tianschanica.Rupr）屬薔薇科花楸屬（Sorbus）落葉灌木或小喬木，生長在天山海拔2 000～2 500 m針葉林帶，枝葉及果實系新疆維吾爾族和哈薩克族民間用藥。民間常以果實、嫩枝葉及莖皮入藥。其果實味苦甘、性平；嫩枝葉及莖皮：味苦、無毒，具有清熱利肺和補(bǔ)脾生津之功效[1]。

國內(nèi)學(xué)者對天山花楸醇提物及水提物的藥理作用進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)醇提物對心肌缺血有保護(hù)作用，水提液有抑制心肌收縮力的作用[2]。在課題組前期進(jìn)行的天山花楸藥理學(xué)試驗中，天山花楸乙酸乙酯部位顯示出較好的降糖效果。為了進(jìn)一步研究天山花楸的藥用價值，筆者對天山花楸提取液梯度洗脫，采用天山花楸正丁醇部位進(jìn)行小鼠降糖試驗，以期為天山花楸的進(jìn)一步開發(fā)利用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 研究對象。天山花楸，采自新疆瑪納斯林場，經(jīng)藥學(xué)院中藥系副教授李鵬鑒定。

1.1.2 試驗動物。昆明種小鼠，由石河子大學(xué)動物中心提供，雌雄兼用，體重（24±3）g，試驗前在實驗室飼養(yǎng)一周適應(yīng)環(huán)境。

1.1.3 主要儀器。羅氏羅康全手持式活力型血糖儀，購自羅氏公司；EL2204電子天平，購自梅特勒-托利多儀器有限公司；RE52A型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，購自上海洪紀(jì)儀器設(shè)備有限公司。

1.1.4 主要試劑。鏈脲佐菌素（STZ）：批號S0131，購自Sigma公司，二甲雙胍片，購自中美上海施貴寶制藥有限公司；其他試劑均為分析純，市售。

1.2 方法

1.2.1 樣品制備。根據(jù)前期正交試驗方案，取天山花楸葉3.00 kg，粉碎，按聊也比1∶8（g/ml，W/V，下同）濃度95%乙醇水浴回流提取1 h，過濾，合并濾液，旋蒸除去溶劑至粘稠狀，依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇進(jìn)行萃取，正丁醇部位揮去溶劑備用。

1.2.2 糖尿病小鼠模型建立。使用前將STZ用0.1 mol/L的檸檬酸-檸檬酸鈉溶液配制成濃度1%的STZ溶液，避光保存，冰浴使用。將小鼠禁食（不禁水）約12 h后，腹腔注射新配置的STZ誘發(fā)糖尿病，劑量為90 mg/kg，于4 d后再禁食（不禁水）12 h，尾靜脈取血。用血糖儀測定小鼠血糖值，大于11.1 mmol/L為合格的試驗性糖尿病小鼠模型，進(jìn)行后期試驗[3-4]。

1.2.3 動物分組及給藥。將造模成功的小鼠隨機(jī)分為模型組，陽性對照（二甲雙胍）組，正丁醇部位高劑量組（A組），正丁醇部位中劑量組（B組），正丁醇部位低劑量組（C組），每組15只，另取15只同批健康小鼠，設(shè)為空白對照組[5-6]。

A組給藥劑量為8 g/kg，B組給藥劑量為4 g/kg，C組給藥劑量為2 g/kg，陽性對照組給藥劑量為200 mg/kg，模型組及對照組均給予等容量生理鹽水灌胃。按照上述劑量連續(xù)灌胃7 d，末次給藥前禁食不禁水12 h，給藥后禁食不禁水1 h后尾靜脈取血[7-8]，用血糖儀測定血糖值。同時進(jìn)行糖耐量試驗，各組小鼠在末次給藥前12 h后尾靜脈取血，為零時血糖，給藥3 h后腹腔注射葡萄糖2.5 g/kg，于0.5、1.0和2.0 h尾靜脈取血測血糖值，計算藥時曲線下面積（AUC）[9]。

1.2.4 藥物對正常小鼠的影響及給藥劑量考察。正常小鼠按上述天山花楸中劑量試驗，連續(xù)灌天山花楸7 d，末次給藥前禁食不禁水12 h，給藥后禁食不禁水1 h后斷尾取血，用血糖儀測血糖值，結(jié)果小鼠血糖均為正常水平[10]`。

1.2.5 持續(xù)喂養(yǎng)對小鼠死亡率的考察。試驗結(jié)束后繼續(xù)給藥一周后小鼠的死亡情況來考察給藥劑量及藥物潛在毒性。

1.2.6 試驗數(shù)據(jù)均以“±s”表示，采用SPSS16.0軟件包對試驗各組動物進(jìn)行統(tǒng)計分析，不同試驗組間差異用方差檢驗進(jìn)行分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 天山花楸正丁醇部位對小鼠血糖的影響 由表1可知，天山花楸正丁醇部位給藥組與模型組相比有明顯差異（P<0.05），證明該部位具有降低STZ誘發(fā)糖尿病小鼠血糖的作用，隨著給藥劑量的減少，降糖效果也呈現(xiàn)降低趨勢，表明該部位給藥劑量與降糖效果呈正相關(guān)。

2.2 天山花楸正丁醇部位對小鼠葡萄糖耐受量的影響 由表2可知，正丁醇不同部位均有不同程度降低葡萄糖復(fù)核后糖尿病小鼠的血糖值。葡萄糖負(fù)荷0 h時，正丁醇高劑量給藥組、中劑量給藥組和低劑量給藥組與模型組相比血糖值均有明顯差異；負(fù)荷0.5 h后，血糖值均有上升，1 h后，各組小鼠血糖值均有下降，但模型組較高；2 h后，血糖值大幅下降，正丁醇高劑量組下降趨勢最明顯，與模型組相比有較大差異（P<0.01），證明該劑量有利于維持患病小鼠的血糖耐受能力，有效對抗餐后血糖的迅速升高。

2.3 藥物的劑量考察 由表3可知，正丁醇部位對于正常小鼠血糖值無明顯影響，但是高劑量及中劑量給藥組小鼠死亡率高于低劑量組，可能是正丁醇部位含有某種未知化學(xué)成分對小鼠產(chǎn)生不良影響。正丁醇組給藥組小鼠整體死亡率均低于模型組，表明其對糖尿病小鼠存活率有一定促進(jìn)作用。

3 結(jié)論

試驗采用回流提取法對天山花楸進(jìn)行提取，梯度洗脫，獲得正丁醇部位，以鏈脲佐菌素（STZ）誘發(fā)小白鼠糖尿病模型，利用該部位進(jìn)行降血糖試驗。結(jié)果發(fā)現(xiàn)正丁醇部位給藥組與模型組相比，有明顯降糖效果，表明天山花楸具有一定的抗糖尿病作用。

參考文獻(xiàn)

[1]

新疆自治區(qū)衛(wèi)生廳革命委員會.新疆中草藥[M].烏魯木齊：新疆人民出版社，1973：62.

[2] 李迪民，陳堅，王巖.天山花楸水煎提液藥理學(xué)研究[J].中草藥，1996，26（6）：302.

[3] 孫煥，陳廣，陸付耳.介紹幾種誘發(fā)性糖尿病動物模型[J].中國實驗方劑學(xué)雜志，2007，13（2）：68.

[4] PETTERPHER C C，IENDOUX S P，BOHR V A，et al.Repair of alkaliabile rites with in the mitochondrial DNA of RINr38 cells after exposure to the nitrosurea streptozotocin[J]. Biochemstry， 1991，266（5）：3113.

[5] 方福生，李春霖.二甲雙胍的臨床應(yīng)用及研究進(jìn)展[J].中國藥物應(yīng)用與監(jiān)測，2007， 4（1）：7-10.

[6] 劉浩，蔣思萍，楊玲玲，等.芫根粗總皂苷對糖尿病小鼠的降血糖作用[J].西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報，2012，40（6）：23-27.

[7] 郝玉美，劉洪琪.苦瓜、黃芪、黃芩苷對2 型糖尿病模型大鼠胰島素抵抗的影響[J].中藥藥理與臨床，2007，23（5）：145.

[8] 彭亮，李知敏. 灰兜巴抗糖尿病作用的實驗研究[J].時珍國醫(yī)國藥，2010，21（12）：3060-3061.

[9] 玄光善，潘士佳，南姬.桑葉降糖成分與二甲雙胍的協(xié)同降糖作用研究[J].食品科學(xué)， 2011，32（15）：260-262.

[10] 宋立江，劉長青，郭金銘，等.鏈脲佐菌素致糖尿病模型影響條件的實驗研究[J].實用預(yù)防醫(yī)學(xué)， 2008，15（5）：1592-1593.