高致病性豬藍耳病、圓環(huán)病毒病疫苗對豬瘟疫苗免疫效果的影響試驗

朱華賢，陳建祥，厲金炳，何夏潮，袁金錢，董國良，王友杉，徐小燕，黃鎮(zhèn)華，王鑫炎，史麗娜

(1.紹興市上虞區(qū)畜牧獸醫(yī)技術(shù)推廣中心，浙江上虞312300; 2.上虞區(qū)豐惠畜牧獸醫(yī)站)

高致病性豬藍耳病(PRRS)是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒變異株引起的一種急性傳染病，以妊娠母豬流產(chǎn)、死胎、木乃伊胎、早產(chǎn)、產(chǎn)弱仔等繁殖障礙和呼吸困難、高死亡率為特征。該病傳播速度快，仔豬發(fā)病率可達100%，死亡率可達35%以上，母豬流產(chǎn)可達35%，中大豬感染率、死亡率較高。PRRSV主要在粘膜、肺局部巨噬細胞(PAM)和單核細胞中復制，由于PRRSV 復制期間PAM 破壞造成的免疫抑制，可能是PRRS 流行豬場呼吸道疾病增加、生產(chǎn)性能降低和免疫失敗的主要原因［1－2］。

豬圓環(huán)病毒病(PCV2)是由PCV2 感染引起的一種免疫抑制性疾病。據(jù)邢剛等(2014)［3］報道，周繼勇等曾利用IFA 方法對浙江省內(nèi)的2039份血清樣本進行檢測，發(fā)現(xiàn)豬群普遍存在PCV2 感染;李曉成(2013)［4］曾于2013年進行PCV2 流行病學調(diào)查。結(jié)果表明，國內(nèi)PCV2 感染率為21.74%，華東地區(qū)為31.7%。主要臨床表現(xiàn)為仔豬斷奶后多系統(tǒng)衰竭綜合征;12 周齡以上豬則主要表現(xiàn)為皮炎和腎病綜合征，間質(zhì)性肺炎、先天性震顫及繁殖障礙等。

近年來，我國養(yǎng)豬業(yè)普遍應用PRRS、PCV2 疫苗免疫，對緩解臨床癥狀、控制二種疫病的疫情不失為主要應對措施之一［5］。但PRRS 弱毒疫苗干擾豬瘟免疫抗體和如何使用PCV2 疫苗仍存在較多爭議。本試驗的目的旨在探討PRRS、PCV2 疫苗對豬瘟疫苗免疫效果的影響，為臨床防控提供科學依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試疫苗 PRRS 疫苗(JXA1－R 株)由山東省某公司提供，生產(chǎn)批號1211027－1，豬瘟耐熱保護劑活疫苗(兔源)由山西省某公司提供，生產(chǎn)批號2112069，PCV2 滅活疫苗由浙江省某公司提供，生產(chǎn)批號20130202。CSF 抗體、PRRS 抗體、PCV2 抗體檢測委托浙江省農(nóng)科院畜牧獸醫(yī)研究所測定。

1.2 試驗方法 試驗在上虞區(qū)某規(guī)模豬場進行。選擇日齡相近的斷奶仔豬(平均35日齡)40 頭，隨機分為四組，每組10 頭，分對照組、PRRS 疫苗組(簡稱藍耳組)、PCV2 疫苗組(簡稱圓環(huán)組)、PRRS+PCV2 疫苗組(簡稱藍+圓組)。預試期7 d。免疫程序和劑量詳見表1。

表1 免疫程序設(shè)計

1.3 飼養(yǎng)管理 按豬場常規(guī)飼養(yǎng)管理日程操作，專人負責飼養(yǎng)。保育豬日糧:玉米60%、6401 料精40%;生長豬日糧:玉米65%、豆粕27%、麩皮4%、4312 料精4%。全程記錄耗料、健康狀況。

2 結(jié)果與分析

2.1 PCV2、PRRS 疫苗對供試豬生長速度的影響

詳見表2。

表2 PCV2、PRRS 疫苗對供試豬生長速度的影響

由表2可見，經(jīng)86 d 試驗(35 d－121 d)，以圓環(huán)組增重最高，對照組最低，但經(jīng)F 檢驗，各組間差異不顯著(P ＞0.05)。

2.2 PCV2、PRRS 疫苗對供試豬采食量及料重比的影響 詳見表3。

表3 PCV2、PRRS 疫苗對供試豬采食量及料重比的影響

由表3可見，經(jīng)86 d 試驗，環(huán)圓組總耗料563.5 kg，凈增重305.5 kg，料重比為1.845∶1，其次為藍+圓組，料重比為2.007∶1，但經(jīng)F 檢驗，各組間差異不顯著(P ＞0.05)。

2.3 PCV2、PRRS 疫苗的免疫效果

2.3.1 PCV2 疫苗的免疫效果 詳見表4。

表4 PCV2 疫苗的免疫效果觀察

根據(jù)ELISA 檢測方法，臨界值≥0.4 為陽性、初始第一次采血即PCV2 疫苗免疫前，PCV2 抗體檢測S/P 值均≥0.4，提示該場圓環(huán)病毒為嚴重污染場。第二次采血，即PCV2 疫苗免疫后第35 d，PCV2 抗體雖然有較高的陽性率，但不管是PCV2 疫苗注射組還是未注射組均呈下降趨勢。第三次采血，即PCV2 疫苗免疫后第86 d，對照、圓環(huán)二組S/P 值繼續(xù)呈下降趨勢，而藍耳、藍+圓組呈明顯上升趨勢，藍+圓組有8 豬上升，藍耳組有6 豬上升。出現(xiàn)上述情況，或與野毒感染、藍耳病弱毒疫苗等因素有關(guān)。

2.3.2 PRRS 疫苗的免疫效果 詳見表5。

表5 PRRS 疫苗的免疫效果觀察

根據(jù)ELISA 檢測方法，臨界值≧0.4 為陽性，初始第一次采血，各組只有部分豬PRRS 抗體超過臨界值，可能與母源抗體有關(guān)。第二次采血，對照、圓環(huán)二組繼續(xù)呈下降趨勢，而藍耳、藍+圓組上升趨勢明顯，陽性率100%。第三次采血，對照、圓環(huán)二組繼續(xù)呈下降趨勢，而藍耳、藍+圓組仍繼續(xù)保持較高抗體滴度，陽性率達100%。

2.4 PCV2、PRRS 疫苗對豬瘟疫苗免疫效果的影響詳見表6、表7。

表6 PCV2、PRRS 疫苗對豬瘟免疫效果的影響

表7 第二次采血豬瘟抗體檢測分析(LSR 法)

從陽性率觀察，第一次采血豬瘟抗體各組陽性率為0%。第二次對照、圓環(huán)組陽性率均為20%，藍耳、藍+ 圓組均為0%。第三次均到達較高水平。從個體抗體曲線走向分析，各組基本呈上升趨勢。方差分析結(jié)果，第一、三次采血豬瘟抗體各組差異不顯著，第二次差異顯著，其中圓環(huán)組、對照組與藍耳組、藍+圓組相比，差異顯著(P ＜0.05);圓環(huán)組與對照組、藍耳組與藍+圓組差異不顯著(P ＞0.05)。

3 小結(jié)與討論

3.1 經(jīng)本次試驗，各組從生產(chǎn)性能分析，雖然圓環(huán)組生長速度最快，耗料最多，飼料報酬最高，但經(jīng)方差分析，各組差異不顯著(P ＞0.05)。

3.2 PRRS 疫苗在本次試驗中，表明免疫效果良好，在PRRS 疫苗免疫后第28 d、74 d，藍耳、藍+圓組血清中均有較高PRRS 抗體。另外，PRRS 弱毒活疫苗或許能增加圓環(huán)病毒病野毒株的感染幾率，但應進一步驗證探討。

3.3 一般認為，PRRS 弱毒活疫苗免疫1 周后才能使用豬瘟疫苗，本次試驗認為PRRS 弱毒活疫苗對豬瘟疫苗免疫有較大干擾作用，干擾時間應該大于7 d。因此，在使用PRRS 疫苗和其他疫病疫苗時要嚴格控制免疫接種的間隔時間，間隔7 d 是不夠的。本次試驗PCV2 滅活苗對豬瘟弱毒活疫苗免疫抗體未見抑制作用。

［1］陳玉華.高致病性豬藍耳病滅活疫苗和弱毒疫苗的免疫效果試驗［J］.浙江畜牧獸醫(yī)，2014(1):4－6.

［2］文利新，丁小波，羅維.豬高致病性藍耳病的發(fā)病特點及其防治技術(shù)［J］.湖南農(nóng)業(yè)科學，2008，4:153－154.

［3］刑剛，邱小伙，阮系真，等.兩種PCV2 抗體ELISA 檢測試劑盒檢測效果比較［J］.浙江畜牧獸醫(yī)，2014(1):1－3.

［4］李曉.在浙江省豬病高峰論壇會議上的報告［R］.2013.11.

［5］陳慶新，高紹彬，葉菊香，等.杭州地區(qū)豬Ⅱ型圓環(huán)病毒抗體的血清學調(diào)查［J］.中國獸醫(yī)科技，2003，33:26－28.