乙型肝炎病毒大蛋白檢測的臨床意義

田雨香 張 菁

（上海市徐匯區(qū)大華醫(yī)院,上海 200237）

乙型肝炎病毒大蛋白檢測的臨床意義

田雨香 張 菁

（上海市徐匯區(qū)大華醫(yī)院,上海 200237）

目的探尋乙型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒表面大蛋白（LHBs）表達量的變化及其與病毒載量的相關性。方法對臨床確診為慢性乙型肝炎的170例病例及28例健康對照血清樣本分析，ELISA檢測乙型肝炎表面大蛋白的含量、實時定量PCR檢測乙型肝炎病毒。結果乙型肝炎病毒表面大蛋白在乙型肝炎患者的血清中表達，在非乙型肝炎的患者中不表達，并且和乙型肝炎病毒的載量成正相關。結論乙型肝炎病毒表面大蛋白的表達，可以作為臨床感染乙型肝炎病毒及臨床療效判斷的參考依據(jù)。

乙型肝炎病毒；大蛋白；病毒載量；血清

乙型肝炎是一種嚴重危害人類健康的傳染性疾病之一,而我國是慢性乙型肝炎（cHB）的高發(fā)區(qū),感染率達到10%～15%。近年來研究發(fā)現(xiàn),乙型肝炎病毒表面的大蛋白（LHBs）與HBV的復制密切相關,是HBV感染、復制及乙型肝炎患者的診斷、治療和預后的一個新的標志。本文通過對170例慢性乙型肝炎患者同時進行LHBs檢測,并將結果進行比較和分析,探討乙型肝炎患者血清中LHBs與HBV-DNA的關系。

1 對象與方法

1.1 患者資料:選擇2010年10月至2011年3月在中醫(yī)肝科門診就診的慢性乙型肝炎患者,診斷按2000年西安會議《病毒性肝炎防治方案標準》[1]排除其他病毒感染:HAV,HCV,HDV,HEV及HIV。非乙型肝炎患者（脂肪肝及丙型肝炎患者或者健康人）28例,作為正常對照組。采集靜脈血,同時進行LHBs和HBV-DNA 檢測,LHBs檢測試劑盒由熱景公司提供,ELISA方法,酶標儀為伯樂550型,HBV-DNA檢測試劑為廣州達安生產(chǎn),ABI7000型熒光定量PCR進行擴增。

1.2 統(tǒng)計方法:比較病毒載量和大蛋白的相關性,病毒載量取對數(shù),進行t檢驗,同時以病毒含量分組,用χ2檢驗比較各組大蛋白含量的差異,應用SPSS11.0統(tǒng)計軟件進行分析。

2 結 果

170例患者符合納入標志,平均年齡48.6歲,其中女性68例,經(jīng)檢測,病毒載量和大蛋白的結果,經(jīng)Pearson檢驗,相關系數(shù)為r=0.828, P＜0.01。按病毒載量分為三組:單位IU/mL。①組:毒載量＜103男性14例,女性9例,平均年齡50.3歲,LHBs檢測結果為（0.027± 0.014）；②組:病毒載量為103～106 男性51例,女性35例,平均年齡48.8歲,LHBs檢測結果為（0.286±0.091）；③組:病毒載量＞106男性為37例,女性為24例,LHBs檢測結果為0.937±0.214；④組:為非乙型肝炎患者組,男性17例,女性11例,平均年齡54.2歲,乙型肝炎病毒含量均低于檢測下限并且擴增曲線無抬高,LHBs檢測結果均為陰性,部分結果為負值。各實驗組相關資料見表1。

表1 各實驗組臨床資料

3 討 論

乙型肝炎病毒的外膜蛋白有三種:表面抗原、PreS1抗原和PreS2抗原,組裝成三種不同的HBV顆粒,大蛋白（LHBs）與含有HBVDNA的Dane顆粒關系最為密切[2],是由表面抗原。國內(nèi)外的基礎及臨床研究表明:LHBs可以激活蛋白激酶C,導致c-Raf/MEK信號通路的激活,表明LHBs具有轉錄激活功能[3]。魏紅山課題組經(jīng)過48周的阿德福韋酯治療慢性肝炎的系列血清乙型肝炎病毒LHBs的動態(tài)監(jiān)測,發(fā)現(xiàn)治療前患者血清LHBs的抗病毒治療效果有一定的預測作用,并且LHBs的含量和HBV-DNA拷貝數(shù)的對數(shù)值有相關性[4]本文研究結果與其基本一致,即隨著乙型肝炎病毒含量的增加,大蛋白的濃度也隨之增加。浙江大學醫(yī)學院附屬第一醫(yī)院傳染病研究所的研究表明:在拉米夫定治療應答明顯的患者中,HBV LHBs比HBV DNA轉陰大約晚5個月,結合臨床,抗病毒治療后HBV DNA陰轉后停藥相當比例患者病情反彈[5],因此,研究人員認為治療效果監(jiān)測單獨采用HBV DNA指標是不夠的,應該增加對乙型肝炎病毒復制有轉錄激活作用的乙型肝炎LHBs的檢測。在臨床診斷治療病毒性乙型肝炎時,需綜合考慮各種因素,LHBs可以作為感染、復制、病情觀察和預后評估的聯(lián)合監(jiān)測指標.尤其對無條件開展DNA檢測的中小型實驗室?？蓪⑵淞袨橐倚透窝赘腥镜某Ｒ?guī)輔助診斷項目來推廣應用。

[1] 巾華醫(yī)學會傳染病寄生蟲病學會和肝病學分會.病毒性肝炎防治方案[J].中華肝臟病雜志,2000,8(6):324-329.

[2] Sch?dler S, Hildt E .HBV life cycle:entry and morphogenesis[J]. Viruses,2009,1(2):185-209.

[3] Block TM,Guo H,Guo JT. Molecular virology of hepatitis B virus for clinicians[J].Clin Liver Dis,2007,11(4):685-706.

[4] Fan X,Fang D,Bin D,et al.Serum levels of surface large envelope proteins:prognostic markers for hepatitis B e antigen-negative patients with adefovir dipivoxil treatment[J].Antivir Ther,2009,1 4(8):1149-1156.

[5] 陳曉明,楊美芳,薛寒,等.乙型肝炎病毒大蛋白和DNA在抗病毒治療過程中的變化[J].中華傳染病雜志,2007,25(7):41-43.

Clinical Significance of Testing the Large Protein on the Surface of Hepatitis B Virus in the Serum

TIAN Yu-xiang, ZHANG Jing
(DaHua Hospital of Xuhui District, Shanghai 200237, China)

ObjectiveTo find the relationtion of the large protein on the surface of hepatitis B virus(LHBs) and loading of hepatitis B virus in the serum .MethodsTesting the concentration of LHBs by ELISA and loading of hepatitis B virus by real-time PCR in serum of 170 patients and 28 controls.ResultThere are some LHBs in the serum of patients with hepatitis B ,as the same time they are positive correlation and there are not any LHBs in the healthy control.ConclusionThe large protein on the surface of hepatitis B virus could regard as a marker thought which indicate the infection hepatitis B virus and effect of the treatment.

Hepatitis B virus; Large protein (LHBs); Loading of the virus; Serum

R512.62

B

1671-8194（2014）25-0097-02

上海市科學技術委員會科技支撐項目（編號：1340190290A）