乳腺癌中CCR5和c-Met的表達及意義

張玉文 王 丹 劉 亞

（商丘市第一人民醫(yī)院病理科，河南 商丘 476000）

乳腺癌中CCR5和c-Met的表達及意義

張玉文 王 丹 劉 亞

（商丘市第一人民醫(yī)院病理科，河南 商丘 476000）

目的探討乳腺癌組織中CCR5和c-Met的表達及其意義。方法采用免疫組化SP法檢測45例乳腺癌中CCR5和c-Met的表達。結(jié)果乳腺癌組織CCR5陽性率55.6%（25/45），正常乳腺組織中CCR5表達率8.9%（4/45），兩種組織陽性表達率差異顯著（P＜0.01），c-Met的陽性表達率為51%（23/45），正常乳腺組織中c-Met表達率6.6%（3/45），兩種組織陽性表達率差異顯著（P＜0.01）。在伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的乳腺癌中c-Met和CCR5的共同陽性率44.4%（20/45），無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的乳腺癌中陽性表達率為22.2%（10/45）。CCR5和c-Met的表達和乳腺癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移成正相關。結(jié)論CCR5和c-Met與提示乳腺癌的轉(zhuǎn)移預后因素有關，可作為預測乳腺癌轉(zhuǎn)移的參考指標之一。

乳腺腫瘤；CCR5；c-Met；免疫組化

隨著生活方式的改變，乳腺癌已經(jīng)成為女性最常見的惡性腫瘤，其發(fā)病年齡趨于年輕化、惡性化，嚴重影響患者的生活質(zhì)量，因此采取積極的預防及治療措施至關重要。乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展與許多因素相關，研究表明，CCR5和c-Met與乳腺癌發(fā)病有關密切關系[1-5]。目前，這兩個蛋白在乳腺癌中的共同作用沒有報道，本研究通過檢測45例乳腺癌中CCR5和c-Met的表達情況，探討CCR5和c-Met作為乳腺癌轉(zhuǎn)移和預后指標的可能性。

1 材料與方法

1.1 材料

收集商丘市第一人民醫(yī)院2010年至2012年乳腺癌標本及同病例的正常乳腺組織45例，患者年齡30～65歲，平均年齡47.5歲，女性患者，手術標本經(jīng)10%中性福爾馬林固定，常規(guī)包埋切片，染色。所有病例均進行常規(guī)HE染色并經(jīng)過2位以上的病理學專家診斷。CCR5單克隆抗體（MAB182）購自美國R&D公司，c-Met購自北京中杉公司。

圖1 乳腺癌組織中CCR5/c-Met的表達

1.2 免疫組化染色

采用PV-6000免疫組化法，切片經(jīng)脫蠟、脫水、修復、封閉，PBS液沖洗3次×2 min，滴加CCR5和c-Met過夜，PBS沖洗3次×2 min，滴加二抗，孵育30 min，PBS沖洗3次×2 min，用DAB顯色，PBS做陰性對照。

1.3 結(jié)果判讀

免疫組化結(jié)果判定：CCR5和c-Met均為細胞質(zhì)和胞膜有黃色至棕褐色的細顆粒狀分布的為陽性細胞，癌細胞無著色或陽性細胞＜10%的為陰性細胞；淺黃色、陽性細胞10%～30%為（+），棕黃色、陽性細胞30%～70%的為（++），棕褐色、陽性細胞>70%的為（+++）（圖1）。

1.4 統(tǒng)計學處理

采用SPSS13.0統(tǒng)計學軟件進行統(tǒng)計學處理。

2 結(jié) 果

乳腺癌組織CCR5陽性率55.6%（25/45），正常乳腺組織中CCR5表達率8.9%（4/45），兩種組織陽性表達率差異顯著（χ2=22.436，P＜0.01），c-Met的陽性表達率為51%（23/45），正常乳腺組織中c-Met表達率6.6%（3/45），兩種組織陽性表達率差異顯著（χ2=21.635，P＜0.01）。在伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的乳腺癌中c-Met和CCR5的共同陽性率55.5%（25/45），無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的乳腺癌中陽性表達率為24.4%（11/45）。CCR5和c-Met的表達和乳腺癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關（χ2=9.074，P=0.003）。

3 討 論

CC趨化因子受體5（CCR5）具有G蛋白耦聯(lián)受體家族所特有的7個跨膜區(qū)域，呈螺旋結(jié)構(gòu)，為一種細胞膜蛋白，是趨化因子CCL3，CCL4，CCL5的特異性受體，與類風濕性關節(jié)炎、自身免疫性疾病、糖尿病等急慢性炎癥有著重要的聯(lián)系[6-9]。乳腺癌細胞株MCF-7可表達CCR5，用其拮抗劑Met-CCL5預處理乳腺癌小鼠，腫瘤的體積和質(zhì)量較對照組明顯減少[9,10]。研究表明，CCR5通過兩種途徑對腫瘤發(fā)生作用：①調(diào)節(jié)和遷徙免疫細胞，從而間接對腫瘤起作用。②腫瘤自身表達CCR5與不同的細胞因子結(jié)合，作用于腫瘤本身[10]。

c-Met蛋白為具有生物活性的雙鏈肝細胞生長因子（HGF）的特異性上皮受體，主要存在于上皮細胞中，HGF能夠作用于c-Met，使c-Met蛋白收到刺激后調(diào)節(jié)上皮細胞內(nèi)的磷酸化程度，促進有絲分裂等[4,5,7]。通過HGF/c-Met信號通路促進腫瘤組織周圍基質(zhì)的降解，腫瘤組織內(nèi)血管的生成，促進癌組織的生長、浸潤和轉(zhuǎn)移[4-6]。

本文45例乳腺癌組織CCR5陽性率55.6%（25/45），正常乳腺組織中CCR5表達率8.9%（4/45），兩種組織陽性表達率差異顯著（χ2=22.436，P＜0.01），c-Met的陽性表達率為51%（23/45），正常乳腺組織中c-Met表達率6.6%（3/45），兩種組織陽性表達率差異顯著（χ2=21.635，P＜0.01）。在伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的乳腺癌中c-Met和CCR5的共同陽性率55.5%（25/45），無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的乳腺癌中陽性表達率為24.4%（11/45）。CCR5和c-Met的表達和乳腺癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移成正相關。提示隨著CCR5和c-Met蛋白的活性增高，促進癌組織侵襲和轉(zhuǎn)移的能力也增強，易于向周圍組織浸潤性生長，并且易于轉(zhuǎn)移至其他部位。因此CCR5和c-Met蛋白在癌組織中的高表達和患者的不良預后有關，提示二者可以作為乳腺癌轉(zhuǎn)移及預后的參考指標。

本研究從蛋白表達水平證實了CCR5和c-Met在乳腺癌組織的發(fā)生、侵襲、轉(zhuǎn)移方面發(fā)揮著一定作用，可作為乳腺癌預后不良的標志，二者的聯(lián)合檢測可以更加有效的評估患者轉(zhuǎn)移及預后，為進一步研究乳腺癌的作用機制打下了基礎。但是由于受體作用網(wǎng)絡的復雜性以及腫瘤生長的多因素性，CCR5和c-Met在乳腺癌的表達的正相關性，是通過何種機制及其作用細節(jié)仍需進一步探討。

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Expression of CCR5 and c-Met in Breast Cancer and Its Significance

ZHANG Yu-wen, WANG Dan, LIU Ya
(Department of Pathology, First People's Hospital of Shangqiu, Shangqiu 476000, China)

ObjectiveTo study the significance of CCR5 and c-Met expression in breast cancer.MethodsThe expression of CCR5 and c-Met in 45 cases of breast cancer was analyzed by using immunohistochemisty.ResultsCCR5 was expressed in 55.6% of cancerous breast tissue (25/45), whereas it was only expressed in 8.9% of normal breast tissue (4/45). Significant difference was noted between the expression levels (P＜0.01). c-Met was expressed in 51% of cancerous breast tissue (23/45), but only 6.6% (3/45) of normal tissue. The observed difference in expression level of c-Met was also statistically significant (P＜0.01). On the other hand, 44.4% (20/45) of breast cancer patients with lymph node metastasis showed co-expression of both c-Met and CCR5, compared to 22.2% (10/45) in the normal breast tissue. Our findings demonstrate significant associations between the expression of c-Met, CCR5 and lymph node metastasis in breast cancer patients.ConclusionCCR5 and c-Met expression was associated with poor prognosis of breast cancer patients, which could be predict the prognosis of breast cancer.

Breast cancer; CCR5; c-Met; Immunohistochemistry

R737.9

B

1671-8194（2014）23-0065-02