從大豆的β—伴大豆球蛋白中發(fā)掘β亞基缺失的遺傳

衛(wèi)會(huì)君　司曉霞　田懷東

摘 要：大豆β-伴大豆球蛋白是大豆種子蛋白的主要成分之一，由α′，α和β亞基組成。通過(guò)SDS-PAGE方法，篩選289份具有多樣種子外觀性狀的大豆種質(zhì)，發(fā)掘出17份具有β亞基缺失性狀的遺傳資源。所發(fā)掘的遺傳資源可用于改善大豆蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)的育種研究。

關(guān)鍵詞：大豆；β-伴大豆球蛋白；β亞基；遺傳

中圖分類號(hào)：Q504 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：2095-6835（2014）04-0159-01

大豆是一年生草本植物，起源于中國(guó)，是世界上廣泛栽培的農(nóng)作物之一。β-伴大豆球蛋白由76 kDa的α′、72 kDa的α和52-54 kDa的β亞基組成。其中，β亞基含量最少，幾乎不含含硫氨基酸。人體對(duì)β亞基的攝入可降低對(duì)大豆蛋白中其他氨基酸的吸收率，因此，該亞基對(duì)大豆蛋白的營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)有著重要影響。從多樣的大豆種質(zhì)資源中發(fā)掘β亞基缺失的遺傳資源，有望為提高大豆種子蛋白質(zhì)的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值提供珍貴素材。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

選擇289份籽粒外觀性狀不同的大豆種質(zhì)作為供試材料。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

參照Tian的方法，稱取0.03 g大豆粉末，加入0.15 mL正己烷，在室溫下振蕩1 h脫脂，將離心所得脫脂粉末清洗后加入物質(zhì)的量濃度為0.03 mol/L的三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽緩沖液（Tris-HCl）振蕩，取其上清液。在上清液中加入物質(zhì)的量濃度為1 mol/L的SBS，調(diào)pH為 6.4靜置過(guò)夜，再取出上清液。在該上清液中加入2.5 mol/L的NaCl，調(diào)pH為5.5，振蕩后離心，而后繼續(xù)提取出上清液。在此上清液中加等量超純水靜置，再離心調(diào)pH為4.8，冰浴靜置得球蛋白。在其中加入由質(zhì)量體積比為4%（w/v）的十二烷基硫酸鈉（SDS）、物質(zhì)的量濃度為4 mol/L的尿素（Urea）、體積比為5%的2-Me、物質(zhì)的量濃度為1.5 mmol/L的EDTA、物質(zhì)的量濃度為2 mmol/L的PMSF、物質(zhì)的量濃度0.125 mol/L、pH為6.8的三羥甲基氨基甲烷（Tris）構(gòu)成的全蛋白提取液，用于聚丙烯酰氨凝膠電泳（SDS-PAGE）。

〔編輯：陳文強(qiáng)〕

Abstract： Soybean beta with soybean globulin is one of the major components of soybean seed protein and by alpha， alpha and beta subunit composition. By sds-page method， screening of 289 soybean germplasm， the seed appearance diversity unearthed 17 beta subunits loss characteristics of genetic resources. Discovered by genetic resources can be used to improve the soybean protein nutritional quality breeding research.

Key words： soybean， beta - with soybean globulin； beta subunits； geneticendprint

摘 要：大豆β-伴大豆球蛋白是大豆種子蛋白的主要成分之一，由α′，α和β亞基組成。通過(guò)SDS-PAGE方法，篩選289份具有多樣種子外觀性狀的大豆種質(zhì)，發(fā)掘出17份具有β亞基缺失性狀的遺傳資源。所發(fā)掘的遺傳資源可用于改善大豆蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)的育種研究。

關(guān)鍵詞：大豆；β-伴大豆球蛋白；β亞基；遺傳

中圖分類號(hào)：Q504 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：2095-6835（2014）04-0159-01

大豆是一年生草本植物，起源于中國(guó)，是世界上廣泛栽培的農(nóng)作物之一。β-伴大豆球蛋白由76 kDa的α′、72 kDa的α和52-54 kDa的β亞基組成。其中，β亞基含量最少，幾乎不含含硫氨基酸。人體對(duì)β亞基的攝入可降低對(duì)大豆蛋白中其他氨基酸的吸收率，因此，該亞基對(duì)大豆蛋白的營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)有著重要影響。從多樣的大豆種質(zhì)資源中發(fā)掘β亞基缺失的遺傳資源，有望為提高大豆種子蛋白質(zhì)的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值提供珍貴素材。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

選擇289份籽粒外觀性狀不同的大豆種質(zhì)作為供試材料。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

參照Tian的方法，稱取0.03 g大豆粉末，加入0.15 mL正己烷，在室溫下振蕩1 h脫脂，將離心所得脫脂粉末清洗后加入物質(zhì)的量濃度為0.03 mol/L的三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽緩沖液（Tris-HCl）振蕩，取其上清液。在上清液中加入物質(zhì)的量濃度為1 mol/L的SBS，調(diào)pH為 6.4靜置過(guò)夜，再取出上清液。在該上清液中加入2.5 mol/L的NaCl，調(diào)pH為5.5，振蕩后離心，而后繼續(xù)提取出上清液。在此上清液中加等量超純水靜置，再離心調(diào)pH為4.8，冰浴靜置得球蛋白。在其中加入由質(zhì)量體積比為4%（w/v）的十二烷基硫酸鈉（SDS）、物質(zhì)的量濃度為4 mol/L的尿素（Urea）、體積比為5%的2-Me、物質(zhì)的量濃度為1.5 mmol/L的EDTA、物質(zhì)的量濃度為2 mmol/L的PMSF、物質(zhì)的量濃度0.125 mol/L、pH為6.8的三羥甲基氨基甲烷（Tris）構(gòu)成的全蛋白提取液，用于聚丙烯酰氨凝膠電泳（SDS-PAGE）。

〔編輯：陳文強(qiáng)〕

Abstract： Soybean beta with soybean globulin is one of the major components of soybean seed protein and by alpha， alpha and beta subunit composition. By sds-page method， screening of 289 soybean germplasm， the seed appearance diversity unearthed 17 beta subunits loss characteristics of genetic resources. Discovered by genetic resources can be used to improve the soybean protein nutritional quality breeding research.

Key words： soybean， beta - with soybean globulin； beta subunits； geneticendprint

摘 要：大豆β-伴大豆球蛋白是大豆種子蛋白的主要成分之一，由α′，α和β亞基組成。通過(guò)SDS-PAGE方法，篩選289份具有多樣種子外觀性狀的大豆種質(zhì)，發(fā)掘出17份具有β亞基缺失性狀的遺傳資源。所發(fā)掘的遺傳資源可用于改善大豆蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)的育種研究。

關(guān)鍵詞：大豆；β-伴大豆球蛋白；β亞基；遺傳

中圖分類號(hào)：Q504 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：2095-6835（2014）04-0159-01

大豆是一年生草本植物，起源于中國(guó)，是世界上廣泛栽培的農(nóng)作物之一。β-伴大豆球蛋白由76 kDa的α′、72 kDa的α和52-54 kDa的β亞基組成。其中，β亞基含量最少，幾乎不含含硫氨基酸。人體對(duì)β亞基的攝入可降低對(duì)大豆蛋白中其他氨基酸的吸收率，因此，該亞基對(duì)大豆蛋白的營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)有著重要影響。從多樣的大豆種質(zhì)資源中發(fā)掘β亞基缺失的遺傳資源，有望為提高大豆種子蛋白質(zhì)的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值提供珍貴素材。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

選擇289份籽粒外觀性狀不同的大豆種質(zhì)作為供試材料。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

參照Tian的方法，稱取0.03 g大豆粉末，加入0.15 mL正己烷，在室溫下振蕩1 h脫脂，將離心所得脫脂粉末清洗后加入物質(zhì)的量濃度為0.03 mol/L的三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽緩沖液（Tris-HCl）振蕩，取其上清液。在上清液中加入物質(zhì)的量濃度為1 mol/L的SBS，調(diào)pH為 6.4靜置過(guò)夜，再取出上清液。在該上清液中加入2.5 mol/L的NaCl，調(diào)pH為5.5，振蕩后離心，而后繼續(xù)提取出上清液。在此上清液中加等量超純水靜置，再離心調(diào)pH為4.8，冰浴靜置得球蛋白。在其中加入由質(zhì)量體積比為4%（w/v）的十二烷基硫酸鈉（SDS）、物質(zhì)的量濃度為4 mol/L的尿素（Urea）、體積比為5%的2-Me、物質(zhì)的量濃度為1.5 mmol/L的EDTA、物質(zhì)的量濃度為2 mmol/L的PMSF、物質(zhì)的量濃度0.125 mol/L、pH為6.8的三羥甲基氨基甲烷（Tris）構(gòu)成的全蛋白提取液，用于聚丙烯酰氨凝膠電泳（SDS-PAGE）。

〔編輯：陳文強(qiáng)〕

Abstract： Soybean beta with soybean globulin is one of the major components of soybean seed protein and by alpha， alpha and beta subunit composition. By sds-page method， screening of 289 soybean germplasm， the seed appearance diversity unearthed 17 beta subunits loss characteristics of genetic resources. Discovered by genetic resources can be used to improve the soybean protein nutritional quality breeding research.

Key words： soybean， beta - with soybean globulin； beta subunits； geneticendprint