2010年～2012年某區(qū)127株淋球菌抗生素敏感性的分析

黃?；?張煥梅 梁佩嬋

（廣東省江門市皮膚醫(yī)院皮膚科，廣東 江門 529000）

2010年～2012年某區(qū)127株淋球菌抗生素敏感性的分析

黃?；?張煥梅 梁佩嬋

（廣東省江門市皮膚醫(yī)院皮膚科，廣東 江門 529000）

目的了解江門地區(qū)2010年～2012年淋球菌對抗生素的敏感性及變化趨勢。方法采用瓊脂稀釋法測定6種抗生素對127株淋球菌的最小抑菌濃度（MIC）及質(zhì)粒介導(dǎo)的高度耐四環(huán)素淋球菌（TRNG），采用紙片酸度法檢測菌株是否產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶（PPNG）。結(jié)果淋球菌對大觀霉素及頭孢克肟的敏感率均為100%，頭孢曲松為77.95%，環(huán)丙沙星敏感率最低，其耐藥率高達(dá)92.13%；127株淋球菌中檢出PPNG菌株48株（37.80%），TRNG菌株51株（40.16%）。結(jié)論淋球菌對青霉素、四環(huán)素和環(huán)丙沙星的耐藥率較高，大觀霉素及頭孢克肟可作為治療本地區(qū)淋病的首選藥物。

淋球菌；抗生素；敏感性

淋病由淋病奈瑟菌（即淋球菌）感染引起，主要表現(xiàn)為泌尿生殖系統(tǒng)的化膿性感染，因其潛伏期短、傳染性強(qiáng)及可導(dǎo)致多種并發(fā)癥而受到日益關(guān)注，它既是較常見的一種性傳播疾病，也是我國法定乙類傳染病。目前，隨著抗生素的大量使用及細(xì)菌的變異，淋球菌耐藥菌株日益增多，且不同時(shí)間、不同地域淋球菌對藥物的敏感性有所不同，因此連續(xù)監(jiān)測淋球菌對抗生素的敏感性對本地區(qū)淋病的臨床治療具有重要意義，現(xiàn)將我院2010年～2012年江門地區(qū)127株淋球菌對6種抗生素敏感性檢測結(jié)果報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

①菌株來源：127株淋球菌從我院性病門診有癥狀淋病患者中分離，所有菌株經(jīng)革蘭染色、氧化酶和過氧化氫酶試驗(yàn)、糖發(fā)酵試驗(yàn)確證，-70 ℃冰箱凍存?zhèn)溆?。②抗生素：青霉素（SmithKline公司）、四環(huán)素（Sigma公司）、環(huán)丙沙星（Bayer Leverkussen公司）、頭孢曲松和頭孢克肟（Roche公司）及大觀霉素（普強(qiáng)公司）6種抗菌藥物由中國疾病預(yù)防控制中心性病控制中心提供。

1.2 方法

①抗生素敏感性測定：采用瓊脂稀釋法測定6種抗生素對淋球菌的最小抑菌濃度（MIC），各抗生素用適當(dāng)緩沖液溶解后配成溶液，倍比稀釋，其在培養(yǎng)基平皿上的濃度范圍分別為青霉素、四環(huán)素0.125～32 μg/mL，環(huán)丙沙星0.25～32 μg/mL，頭孢曲松0.001～0.5 μg/mL，頭孢克肟0.015～1 μg/mL，大觀霉素0.5～32 μg/mL。試驗(yàn)菌株和標(biāo)準(zhǔn)菌株先在無選擇性培養(yǎng)基上傳代2次，用16～18 h的新鮮培養(yǎng)物制成107～108cfu/mL菌懸液，用多頭點(diǎn)接種器蘸取菌液接種于各抗生素瓊脂平皿上，35 ℃培養(yǎng)24 h后觀察結(jié)果，記錄MIC50和MIC90，每批試驗(yàn)均由已知MIC值的世界衛(wèi)生組織（WHO）參照菌株作質(zhì)控，按WHO西亞太地區(qū)淋球菌耐藥監(jiān)測項(xiàng)目推薦的標(biāo)準(zhǔn)判斷敏感性[1]。②β-內(nèi)酰胺酶測定：采用紙片酸度定量法，以標(biāo)準(zhǔn)菌株E株作為陽性對照，標(biāo)準(zhǔn)菌株A株作為陰性對照。③高度耐四環(huán)素菌株（TRNG）測定：采用瓊脂稀釋法，當(dāng)四環(huán)素MIC≥16 μg/mL，可判為TRNG菌株。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 敏感性測定

127株淋球菌對青霉素、四環(huán)素和環(huán)丙沙星的耐藥率較高，而對大觀霉素及頭孢克肟全部敏感，見表1。

表1 江門地區(qū)127株淋球菌對6種抗生素耐藥性監(jiān)測

2.2 PPNG菌株測定

127株淋球菌中產(chǎn)青霉素酶淋球菌（PPNG）48株（37.80%），2010年～2012年P(guān)PNG菌株檢出率分別為34.38%（11/32）、38.64%（17/44）、39.22%（20/51），差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.22，P=0.90）。

2.3 TRNG菌株測定

127株淋球菌中高水平耐四環(huán)素淋球菌（TRNG）51株（40.16%），2010年～2012年TRNG菌株檢出率分別為37.50%（12/32）、40.91%（18/44）、41.18%（21/51），差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.13，P=0.94）。

3 討 論

美國疾病控制中心認(rèn)為當(dāng)一種抗生素的耐藥菌百分率超過5%時(shí)，該藥就不作為臨床治療的一線藥物，隨著抗生素的廣泛使用及細(xì)菌的變異，淋球菌的耐藥菌株也日益增多。研究發(fā)現(xiàn)，淋球菌耐藥性由質(zhì)粒和染色體介導(dǎo)，隨著質(zhì)粒介導(dǎo)的高度耐青霉素菌株的出現(xiàn)及傳播，我國早已不推薦青霉素作為治療淋病的首選藥物，本次監(jiān)測的127株淋球菌中75.59%耐青霉素，低于曹文苓[2]等報(bào)道的90.90%（χ2=8.22，P=0.00），低于本地區(qū)2008年報(bào)道[3]的92.50%（χ2=9.56，P=0.00），對青霉素敏感的淋球菌株近年來出現(xiàn)增加趨勢，原因目前尚不清楚，但2010年～2012年P(guān)PNG菌株分別為34.38%、38.64%、39.22%，仍維持在較高水平。TRNG是質(zhì)粒介導(dǎo)的高水平耐四環(huán)素的菌株，監(jiān)測發(fā)現(xiàn)88.97%淋球菌株耐四環(huán)素，其中TRNG51株（40.16%），其MIC502012年為16 μg/mL，雖然青霉素和四環(huán)素不再作為治療淋病的首選藥物，但是PPNG和TRNG流行率仍是淋球菌耐藥性流行病學(xué)的重要監(jiān)測指標(biāo)。監(jiān)測中未發(fā)現(xiàn)對環(huán)丙沙星敏感菌株，其耐藥率高達(dá)92.13%，與牛玉峰[4]報(bào)道的95.80%相符（χ2=1.49，P=0.29），與本地2008年報(bào)道的62.50%相比明顯增長（χ2=27.63，P=0.00），且其MIC90由2010年的8 μg/mL上升到2012年的16 μg/mL，說明近幾年本地區(qū)淋球菌對環(huán)丙沙星的耐藥快速增加，耐喹諾酮類淋球菌的流行維持在較高水平，研究發(fā)現(xiàn)[5]其耐藥機(jī)制主要是由于DNA促旋酶A亞單位（gyrA）和拓?fù)洚悩?gòu)酶IV（parC）基因內(nèi)的氟喹諾酮耐藥決定區(qū)突變所致，我們在臨床治療中應(yīng)盡量避免使用此類藥物。

大觀霉素屬于氨基糖苷類抗生素，其對PPNG、TRNG菌株及耐喹諾酮類藥物的淋球菌株敏感性都較好，本地區(qū)2009年～2012年連續(xù)4年監(jiān)測暫未發(fā)現(xiàn)耐大觀霉素菌株，同吳愛明[6]的報(bào)道相近，且MIC90為32 μg/mL仍在敏感性范圍，其仍可作為本地區(qū)治療淋病的首選藥物，耐大觀霉素菌株世界范圍內(nèi)雖少見，但國內(nèi)外已陸續(xù)報(bào)道發(fā)現(xiàn)耐大觀霉素菌株，因此仍需密切觀察。監(jiān)測發(fā)現(xiàn)頭孢曲松的抗菌活性仍較強(qiáng)，127株淋球菌中敏感株為77.95%，略高于劉小鳳[7]報(bào)道的珠海地區(qū)的62.90%，且頭孢曲松MIC90為0.06 μg/mL時(shí)仍在敏感范圍，其可作為本地區(qū)治療淋病的一線藥物。目前本地雖未發(fā)現(xiàn)耐頭孢曲松菌株，但香港[8]已有應(yīng)用頭孢曲松治療淋病失敗的報(bào)道，且在2011年日本[9]報(bào)道發(fā)現(xiàn)首例對頭孢曲松高度耐藥菌株，海南地區(qū)[10]也檢出了耐頭孢曲松的淋球菌株，本研究發(fā)現(xiàn)其MIC90也由2010年的0.03 μg/mL上升至2012年的0.06 μg/mL，所以臨床還應(yīng)密切監(jiān)測耐頭孢曲松淋球菌株的流行狀態(tài)。監(jiān)測中我們發(fā)現(xiàn)作為口服類用藥的第三代頭孢菌素藥物頭孢克肟

100%對淋球菌敏感，也可作為本地治療淋病的首選藥物，早在2010年美國疾病控制中心淋病治療指南中就已明確指出單純性子宮頸、尿道和直腸淋球菌感染可單次頓服頭孢克肟400 mg治療，國內(nèi)陳潔華在2011

年也報(bào)道了其在治療單純性女性生殖系統(tǒng)淋球菌感染中療效顯著，但目前有關(guān)頭孢克肟的監(jiān)測報(bào)道較少，臨床中應(yīng)給予高度關(guān)注。

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The Analysis of Antimicrobial Susceptibility of 127 Neisseria Gonorrhoeae in A District from 2011~2012

HUANG Hai-hua, ZHANG Huan-mei, LIANG Pei-chan
(Department of Dermatology, Jiangmen Skin Hospital, Jiangmen 529000, China)

ObjectiveTo survey the susceptibility and trend of Neisseria gonorrhoeae to antibioticagets in Jiangmen from 2010 to 2012.Methods127 Neisseria gonorrhoeae strains were observed for their susceptibility to six antibiotics, agard lution method was used to detect minimal inhibitory concentration (MIC) of antimicrobial agents and high-level tetracycline-resistance of Neisseria gonorrhoeae(TRNG),the production of β-lactamase was dectermined by paper acidometric method.ResultsThe percentage of Neisseria gonorrhoeae strains sensitive to Spectinomycin,cefixime and ceftriaxone was 100%,100% and 77.95%,the percentage of Neisseria gonorrhoeae strains resistent to ciprofloxacin was 92.13%;48(37.80%) strains were penicillinase-producing Neisseria gonorrhoeae (PPNG),51(40.16%) strains were TRNG.ConclusionThe Neisseria gonorrhoeae isolates are highly resistant to penicillin,tetracycline and ciprof loxacin,spectinomycin and cefixime should be used the first-line drugs for the treatment of Neisseria gonorrhoeae in Jiangmen.

Neisseria gonorrhoeae; Antibiotics; Susceptibility

R378.16

B

1671-8194（2014）22-0012-02