高危型人乳頭瘤病毒在宮頸病變篩查中的臨床價(jià)值

韓全貴，白寶琴，馬婷婷，李自潤(rùn)

(1.大同市第三人民醫(yī)院病理科，山西大同037008；2.山西大同大學(xué)醫(yī)學(xué)院，山西大同037009)

子宮頸癌是婦女最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一。我國(guó)每年大約有10萬(wàn)子宮頸癌新發(fā)病例，占世界總數(shù)的1/5，子宮頸癌年死亡率為4.3/10萬(wàn)。子宮頸癌的發(fā)病呈年輕化趨勢(shì)，已嚴(yán)重威脅到中青年女性的健康和生命[1]。利用宮頸液基細(xì)胞學(xué)篩查能發(fā)現(xiàn)宮頸的癌前病變，可減少癌癥的發(fā)生。

現(xiàn)已經(jīng)明確高危型乳頭瘤病毒（HPV）持續(xù)感染是引起子宮頸癌的主要原因。目前已發(fā)現(xiàn)的HPV類別約有100種左右，其中13種可引起子宮頸癌，性接觸為其最主要的感染途徑。研究顯示，95%以上的子宮頸癌都曾感染HPV病毒。與沒(méi)有感染HPV病毒的婦女相比，感染者患子宮頸癌的危險(xiǎn)性高達(dá)幾十倍甚至幾百倍。

HPV持續(xù)感染引起宮頸輕度病變，重度病變，最后發(fā)展為子宮頸癌。HPV感染的檢測(cè)已成為篩查和預(yù)防宮頸癌的關(guān)鍵。宮頸液基細(xì)胞學(xué)檢查是應(yīng)用最廣泛的篩查技術(shù)，該技術(shù)大大提高了細(xì)胞學(xué)診斷的準(zhǔn)確性和敏感性[2]。我們將宮頸液基細(xì)胞學(xué)檢查中4類宮頸病變陽(yáng)性的病人篩查出來(lái)同時(shí)進(jìn)行HPV-DNA檢查，探討這4類病人在宮頸癌前病變的臨床價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象

標(biāo)本來(lái)自大同市第三人民醫(yī)院201201-201212期間運(yùn)用TCT法查出意義不明確的非典型性鱗狀細(xì)胞病變（ASC-US）、高級(jí)別鱗狀上皮內(nèi)病變（HSIL）、非典型性鱗狀細(xì)胞病變(不除外高級(jí)別鱗狀上皮內(nèi)病變)（ASC-H）、低級(jí)別鱗狀上皮內(nèi)病變（LSIL）4類宮頸病變病人共計(jì)388例,年齡在20～75歲。

1.2 方法

1.2.1 TCT法檢測(cè)宮頸病變

1）采樣：用宮頸脫落細(xì)胞專用采樣器采樣頭與宮頸口外側(cè)緊密接觸，順時(shí)針旋轉(zhuǎn)5周，抽出即可采集宮頸脫落細(xì)胞。

2）保存：將采樣頭浸入細(xì)胞保存液中，適度轉(zhuǎn)動(dòng)，將細(xì)胞樣本脫離采樣器轉(zhuǎn)移至保存液中。擰緊保存液瓶蓋，記錄患者編號(hào)等相關(guān)資料。

3）制片報(bào)告：將標(biāo)本送細(xì)胞學(xué)檢查室，按照液基細(xì)胞沉降法制片，用TBS分類法出具報(bào)告。篩查出2012年4類宮頸病變共計(jì)388例。

1.2.2 DNA基因雜交捕獲技術(shù)檢查（HC2）HPV陽(yáng)性值

按照試劑盒說(shuō)明書依次進(jìn)行裂解、雜交、捕獲、反應(yīng)、沖洗、信號(hào)收集。

2 結(jié)果

2.1 液基細(xì)胞學(xué)陽(yáng)性與HPV檢測(cè)陽(yáng)性符合率

利用TBS報(bào)告系統(tǒng)從2012年宮頸液基細(xì)胞學(xué)涂片中篩查出388例包括4種類型的鱗狀上皮細(xì)胞異常，其中ASC-US檢出率最高，占總陽(yáng)性例數(shù)的77%。利用DNA基因捕獲技術(shù)檢查HPV陽(yáng)性值,其中HSIL病人HPV陽(yáng)性檢出率最高，見(jiàn)表1。

表1 2012年大同市第三人民醫(yī)院宮頸液基細(xì)胞學(xué)陽(yáng)性與HPV檢測(cè)陽(yáng)性統(tǒng)計(jì)表

2.2 利用DNA基因捕獲技術(shù)檢測(cè)HPV陽(yáng)性值

利用DNA基因捕獲技術(shù)檢測(cè)HPV陽(yáng)性值，結(jié)果顯示HSIL病人中，HPV陽(yáng)性值最高，均數(shù)達(dá)到1 253.9，是正常人的1 000倍以上（正常人HPV值＜1），見(jiàn)圖1。

圖1 2012年大同市第三人民醫(yī)院利用DNA基因捕獲技術(shù)檢查HPV陽(yáng)性值柱形圖

2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件處理，P＜0.05認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。利用多因素方差分析可知：ASC-US病人和HSIL病人HPV值差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）.

3 討論

宮頸癌是女性生殖系統(tǒng)最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，僅次于乳腺癌。早期發(fā)現(xiàn)各種癌前病變并進(jìn)行及早的預(yù)防和治療能夠有效降低浸潤(rùn)性宮頸癌的發(fā)生率，減輕婦女的身心痛苦，提高生活質(zhì)量。目前利用宮頸液基細(xì)胞學(xué)制成的薄層涂片成份齊全，結(jié)構(gòu)清晰，背景干凈，異常的細(xì)胞很容易被觀察和發(fā)現(xiàn)。與傳統(tǒng)的制片法比較，液基細(xì)胞學(xué)提高了宮頸病變檢出的敏感性[3]。

本研究首先利用宮頸液基細(xì)胞學(xué)檢查對(duì)門診及住院婦女進(jìn)行檢查，從這些檢查結(jié)果中篩查中4類病人，包括ASC-US,HSIL，ASC-H和LSIL。大同市第三人民醫(yī)院2012年鱗狀細(xì)胞癌（ACC）及非典型腺細(xì)胞（AGC）患者檢出率分別為5例和8例，由于例數(shù)極少，所以沒(méi)有對(duì)這2類患者進(jìn)行研究。

高危型人乳頭瘤病毒（HPV）持續(xù)感染是發(fā)生宮頸上皮內(nèi)病變的必要因素，可以導(dǎo)致宮頸病變從LSIL，HSIL發(fā)展到SCC[4]。利用DNA基因捕獲技術(shù)能夠定量的檢查到HPV蛋白含量。在本研究中，HSIL病人HPV值明顯升高，而TCT正常人中HPV值一般小于4。高危險(xiǎn)HPV-DNA檢查對(duì)宮頸液基細(xì)胞學(xué)檢查結(jié)果為ASC-US，HSIL ASC-H，LSIL的患者具有重要的價(jià)值，它可以進(jìn)一步分流診斷，明顯提高宮頸病變的篩查能力。

在本研究中，HSIL病人HPV陽(yáng)性率的值最高，達(dá)到86%，其它依次為L(zhǎng)SIL，ASC-H，ASCUS，其中ASC-US病人HPV陽(yáng)性率最低。從以上調(diào)查的結(jié)果可知宮頸病變的級(jí)別越高，HPV陽(yáng)性率越高，本次研究與肖魏等人的觀點(diǎn)一致[5]。因此對(duì)于利用液基細(xì)胞學(xué)發(fā)現(xiàn)的高級(jí)別的宮頸病變，臨床醫(yī)師應(yīng)該高度重視，對(duì)于這類病人必須要求陰道鏡取活檢以便發(fā)現(xiàn)早期的宮頸癌。

本研究利用DNA基因捕獲技術(shù)定量檢測(cè)HPV蛋白含量，結(jié)果發(fā)現(xiàn)HSIL病人的HPV-DNA含量均值最高，是正常人的1 000倍以上。HPV-DNA定量分析能更加準(zhǔn)確地發(fā)現(xiàn)宮頸病變的早期改變[6]。這一技術(shù)不僅對(duì)液基細(xì)胞學(xué)檢測(cè)的有宮頸病變的病人能夠敏感地檢測(cè)出HPV-DNA的變化，而且對(duì)那些有潛在病變但在細(xì)胞學(xué)還沒(méi)有表現(xiàn)出來(lái)的病人具有早期篩查作用。因此，我們建議有性生活的35歲以上的婦女都應(yīng)該做HPV檢查，以便早期從分子水平發(fā)現(xiàn)宮頸的潛在病變。

結(jié)論：對(duì)于利用宮頸液基細(xì)胞學(xué)檢查出有宮頸病變的病人再輔以HPV檢查，能明顯提高宮頸癌的早期檢出率。而對(duì)于有經(jīng)濟(jì)能力的婦女做HPV檢測(cè)能提前預(yù)知是否存在宮頸癌的潛在危險(xiǎn)性。

[1]郎景和.迎接子宮頸癌預(yù)防的全球挑戰(zhàn)與機(jī)遇[J].中華婦產(chǎn)科雜志,2002,37(3):129-131.

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[3]Papillo J L,Zarka M A,John P L.Evaluation of the Thinprrep Paptest in clinical practice:aseven months,16314-case experi ence in northem Vermont[J].Cytologica,1998,42(1):198-203.

[4]Roden R,Wu T C.How will HPV vaccines affect cervical cancer[J].Nat Rev Cancer,2006,6:753-763.

[5]肖魏，卞美璐，馬莉，等.子宮頸液基細(xì)胞學(xué)檢查異常的涂片中人乳頭瘤狀病毒L1蛋白的表達(dá)及其意義[J].中華婦產(chǎn)科雜志，2009，44（12）：887-891.

[6]Wright T V J,Denny L,Kuhn L,et al.HPV DNA Testing of Self-collected Vaginal Cancer[J].JAMA,2000,283(1):81-86.