化妝品中激素和抗生素的檢測方法研究進(jìn)展

齊尚忠

（山西省產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗研究院，山西 太原 030012）

1.引言

化妝品是許多人日常生活不可或缺的個人護(hù)理產(chǎn)品。其本身的作用及安全性直接關(guān)系到使用者的身體健康和切身利益。雖然《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》中明確禁止在化妝品中添加激素和抗生素，然而一些不法生產(chǎn)商利用人們愛美的急切心理和對于專業(yè)知識的匱乏，非法地將激素和抗生素添加到化妝品中，以期產(chǎn)生特殊功效。長期使用這種化妝品，會對消費者的身體健康造成嚴(yán)重影響，也不利于化妝品市場的健康發(fā)展。

目前，我國化妝品中激素和抗生素的檢測已從研究階段邁向深化應(yīng)用階段。為確保檢測結(jié)果的合理性和準(zhǔn)確性，科學(xué)家仍在不斷努力，探索新方法、新技術(shù)。本文綜述了近年來化妝品中激素和抗生素的檢測方法研究進(jìn)展，旨在為化妝品檢測提供更充分的參考依據(jù)。

2.激素的檢測

激素在化妝品中屬于禁用成分?；瘖y品中激素的檢測方法是否準(zhǔn)確有效，對于嚴(yán)格控制化妝品的產(chǎn)品質(zhì)量、確保化妝品安全使用、保障人民身體健康具有重要意義。目前，對化妝品進(jìn)行激素檢測主要針對的是糖皮質(zhì)激素[1-7]、性激素[8-13]等。

2.1 糖皮質(zhì)激素

糖皮質(zhì)激素對皮膚具有一定的嫩白作用。短期使用時，含有糖皮質(zhì)激素的化妝品可使皮膚光滑細(xì)膩、紅潤白嫩，有著較好的美容效果。但長期使用時，糖皮質(zhì)激素會通過皮膚的吸收，可引起全身的副作用，導(dǎo)致面部皮膚損害、骨質(zhì)疏松、肌肉萎縮、生長發(fā)育遲緩，并誘發(fā)或加重感染和消化性潰瘍、情緒異常、代謝紊亂等各種不良反應(yīng)。

李娟等[1]選擇甲醇-乙腈混合溶劑，與水構(gòu)成流動相進(jìn)行梯度洗脫，用HLB固相萃?。⊿PE）小柱對提取液進(jìn)行凈化，通過擬定相對嚴(yán)密的提取方法，建立了一種固相萃取-高效液相色譜方法，可用以分析檢測化妝品中的酸氟替卡松、曲安奈德、地塞米松等6種激素。

趙曉亞等[2]采用酸化甲醇振蕩提取，并用HLB固相萃取小柱對提取液凈化。在優(yōu)選色譜條件下，通過反高效液相色譜法（RP-HPLC）對化妝品中的9種糖皮質(zhì)激素進(jìn)行了有效的分離檢測，回收率最高可達(dá)99.5%。

田媛等[3]對部分化妝品進(jìn)行了LC-MS/MS分析。她們以串聯(lián)質(zhì)譜為檢測器，克服了常規(guī)紫外檢測器靈敏度較低、專屬性不強(qiáng)的缺點。研究表明:該方法靈敏度高，準(zhǔn)確度好，回收率穩(wěn)定，可作為化妝品中非法添加糖皮質(zhì)激素的常規(guī)分析方法。

江崢等[4]利用三重四極桿液質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)（TSQ Quantum Access Max），對爽膚水和精華油中41種糖皮質(zhì)激素進(jìn)行了定量檢測，定量下限為0.5ng/mL，最低檢測限可達(dá)0.1ng/mL。同時，考察了儀器不同分辨率設(shè)置對化合物檢測的影響。結(jié)果表明:三重四極桿液質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)是化妝品中痕量非法添加成分檢測的最佳選擇。

此外，毛細(xì)管電泳法具有快速、高效、超低樣品量、低溶劑用量等優(yōu)點，也是目前在化妝品中糖皮質(zhì)激素檢測方面應(yīng)用較為廣泛的一種方法。李萌等[6,7]分別采用反向微乳毛細(xì)管電泳法和場放大進(jìn)樣-膠束毛細(xì)管電泳法，在優(yōu)化試驗條件下，對化妝品中氫化可的松、丙酸氟替卡松等進(jìn)行了分析檢測。實驗結(jié)果顯示，該方法樣品處理簡單、樣品用量少、方法經(jīng)濟(jì)快速，具有分離度好和靈敏度高等優(yōu)點，適合應(yīng)用于化妝品質(zhì)量監(jiān)控。同時，毛細(xì)管電泳法對于化妝品中其他激素[8]的檢測也有很好的應(yīng)用價值。

表1列舉了化妝品中糖皮質(zhì)激素檢測應(yīng)用實例。

表1 化妝品中糖皮質(zhì)激素檢測方法研究

2.2 性激素

性激素具有重要的生理功能。將其添加到化妝品中，具有促進(jìn)毛發(fā)生長、豐乳、美白、除皺和增加皮膚彈性等作用。但是，長期使用添加性激素的化妝品會產(chǎn)生大量副作用，甚至有致癌的危險。目前，化妝品中性激素的分析技術(shù)主要有薄層色譜法[9]、分光光度法[10]、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法[11]、高效液相色譜法[12-14]等，詳見表2。

王敏榮等[9]用薄層層析法對化妝品中的雌二醇、雌三醇、雌酮等進(jìn)行測定，其最低檢測量達(dá)到0.05～0.15mg。該方法分離性能較強(qiáng)，但在定量方面有一定的局限性。

余曉等[14]同樣對以上三種雌激素進(jìn)行了檢測，以Inertsil ODS-C18為色譜柱，甲醇-水（體積比為60∶40）為流動相，檢測波長在279nm的實驗條件下，對化妝品中三種雌激素的含量進(jìn)行了檢測。該方法重現(xiàn)性好，目標(biāo)物之間分離效果好，靈敏度高，檢出限為0.02～0.03mg/kg。

表2 化妝品中性激素檢測方法研究

吳維群等[11]采用氣相色譜-質(zhì)譜（GC-MS）聯(lián)用技術(shù)同時對水性化妝品中的多種性激素進(jìn)行了檢測。該方法特異性強(qiáng)、選擇性高，適用于乳、膏狀及固體化妝品中性激素的檢測，但回收率相對較低。

賈彥博等[12]將化妝品樣品采用氯化鈉飽和溶液分散，然后用乙腈從分散液中提取雌激素類藥物，用亞鐵氰化鉀和醋酸鋅從提取液中沉淀大分子，通過固相萃取小柱富集凈化，利用超高效液相色譜法分析檢測，達(dá)到了較好的分離效果。該實驗組運用此方法對市場上的美白類化妝品進(jìn)行了抽樣監(jiān)測，為政府部門進(jìn)行化妝品中雌激素類物質(zhì)的風(fēng)險評估積累了有價值的數(shù)據(jù)。

除此之外，化學(xué)顯色方法[13]是目前建立的一種最為快速篩查化妝品中酚類雌激素的方法。該方法通過與高效液相色譜法進(jìn)行對照分析。結(jié)果表明，化學(xué)顯色法與高效液相色譜法結(jié)果吻合，且化學(xué)顯色法簡單、方便、靈敏度高、特異性好，能夠滿足化妝品中違禁酚類雌激素的現(xiàn)場衛(wèi)生監(jiān)督檢驗需要。

3.抗生素的檢測

根據(jù)我國《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》的規(guī)定，抗生素為化妝品禁用成分。但因其具有殺菌、抑菌的功效，有人將其添加在消炎殺菌類（祛痘）化妝品中。長期使用抗生素，會導(dǎo)致細(xì)菌在巨大的環(huán)境壓力下產(chǎn)生耐藥性，從而給人類疾病的治療帶來困難。因此，研究化妝品中抗生素的檢測方法，對政府更好地實施衛(wèi)生監(jiān)督、保障消費者身體健康具有重要意義。目前，檢測抗生素的通用方法主要有酶聯(lián)免疫法[15]、高效液相色譜法[16,17]和LCMS[18]等，而化妝品中抗生素的檢測方法為液相色譜法[19]、超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法[20]和高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法[21]等。表3總結(jié)了近年來關(guān)于化妝品抗生素檢測的文獻(xiàn)報道。

吳大南等[22]通過HPLC-DAD對化妝品中抗生素含量進(jìn)行了分析檢測，經(jīng)甲醇和0.1mol/L鹽酸的混合溶液提取，色譜柱為Waters-Atlantis T3，4.6 mm×150mm I.D.，流動相為乙腈和0.02mol/L磷酸二氫鉀（含0.1%甲酸）混合溶液。檢測結(jié)果表明，該方法前處理簡單，分離效果好，準(zhǔn)確度高，其工作曲線回歸系數(shù)為0.999以上，精密度（RSD）為3.01%～7.74%。

劉華良等[20]建立了測定化妝品中常見的6種抗生素的超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜（UPLC-MS/MS）方法，并用于實際樣品的分析。該方法比現(xiàn)有的HPLC方法的定性可靠性有所提高，檢出限大大降低，速度快，且其他各項方法學(xué)參數(shù)也均可滿足要求。

陳黎明等[26]、楊艷偉等[27]都采用高效液相色譜法對化妝品中的各種抗生素進(jìn)行了分析檢測。實驗證明:該方法前處理簡單，色譜峰重現(xiàn)性好，分離速度快，能較好地應(yīng)用于化妝品的監(jiān)督檢測工作。

喹諾酮類藥物是化妝品中存在的一類具有祛痘、抗粉刺、除螨等功效的抗生素，但作用于人體有一定的危害性。盧曉蕊等[23]在高效液相色譜法的基礎(chǔ)上，建立了一種同時測定化妝品中喹諾酮類抗生素的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法，并通過實驗對樣品提取方法、色譜條件、流量、質(zhì)譜測定條件進(jìn)行了優(yōu)化。他們在最佳實驗條件下，對化妝品中的喹諾酮類抗生素進(jìn)行了檢測分析。結(jié)果表明，該方法回收率高，流動相簡單，試劑易得，分析時間短，線性范圍寬，準(zhǔn)確度和靈敏度高。方法適用于化妝品中喹諾酮類抗生素檢測。

表3 化妝品中抗生素檢測方法研究

莫金娜等[24]參照現(xiàn)版藥典中的薄層色譜法，對祛痘除螨類化妝品中的紅霉素進(jìn)行了檢測。樣品經(jīng)甲醇提取，以硅膠G預(yù)制板為載體，三氯甲烷-甲醇（85∶15）為展開劑，乙醇-對甲氧基苯甲醛-硫酸（90∶5∶5）為顯色劑，其檢測限度可達(dá)1.2mg/g。

此外，陳京閩等[25]根據(jù)ASE200快速溶劑萃取儀的原理，選用合理萃取溶劑，封閉式萃取，用高效液相色譜法測定了部分化妝品營養(yǎng)面霜中的抗生素。該方法簡化了操作過程，降低環(huán)境污染，減少了損失，各項指標(biāo)均符合方法學(xué)要求。

4.結(jié)論

化妝品作為多數(shù)消費者日常生活必不可少的消費品之一，其安全性已直接關(guān)系到使用者的健康。添加禁用物激素和抗生素不僅不會給使用者帶來益處，還會對人體造成危害。因此，化妝品中激素和抗生素的檢測不應(yīng)局限于傳統(tǒng)的檢測手段，開發(fā)應(yīng)用高效率、高靈敏度的檢測方法，運用現(xiàn)代化儀器分析手段已迫在眉睫。同時，應(yīng)該多途徑、多渠道地加快化妝品相應(yīng)檢測方法標(biāo)準(zhǔn)的制訂，切實加強(qiáng)對化妝品行業(yè)的質(zhì)量監(jiān)管，為化妝品市場的穩(wěn)定發(fā)展以及人類的安全健康做出貢獻(xiàn)。

[1]李娟,商少明,陳新,等.固相萃取-高效液相色譜法同時測定化妝品中6 種糖皮質(zhì)激素[J].分析試驗室,2013,32(5):77-80.

[2]ZHAO Xiao-ya,LIN Yan-fei,HU Xiaozhong.Determination of 9 g1ucocorticoids in cosmetics by reversed-phase high performance liquid chromatography[J].Chinese Journal of Analysis Laboratory,2009,28(2):111-115.

[3]田媛,馮舒丹,黃美花,等.化妝品中糖皮質(zhì)激素類非法添加物的LC-MS/MS分析[J].中國藥科大學(xué)學(xué)報[J],2011,42(1):53-57.

[4]江崢,鄧桂鳳.TSQ Quantum Access Max三重四極桿液質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)同時定量化妝品中41種糖皮質(zhì)激素[J].中國食品,2011,20:52-57.

[5]JIA Wei,SONG Ming,YU Xiao-ying.Simultaneous determination of dexamethasone and prednisone in cosmetic by reversedphase liquid chromatography with ultraviolet detection[J].Chinese Journal of Health Laboratory Technology,2007,l7(3):463-464.

[6]李萌,金勉勉,陳新,等.場放大進(jìn)樣-膠束毛細(xì)管電泳法測定化妝品中3種 糖皮質(zhì)激素[J].理化檢驗-化學(xué)分冊,2013,49(4):435-438.

[7]李萌,金勉勉,李娟,等.離子液體和β-環(huán)糊精修飾反向微乳毛細(xì)管電動色譜分析化妝品中的激素[J].分析試驗室,2012,31(2):75-78.

[8]杭棟,汪小婭,倪鑫炯.鼠李糖脂應(yīng)用于微乳毛細(xì)管電動色譜快速測定化妝品中激素類物質(zhì)[J].分析化學(xué)研究報告,2011,39(2):168-172.

[9]王敏榮,單琴.薄層層析法檢測化妝品中部分雌性激素[J].中國公共衛(wèi)生,1997,13(12):749-750.

[10]劉軍.分光光度法測定化妝品中甾體激素含量[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志,2000,10(5):571-572.

[11]吳維群,沈朝燁,楊玉林,等.GC-MS聯(lián)用技術(shù)檢測水性化妝品中性激素成分的方法研究[J].環(huán)境與職業(yè)醫(yī)學(xué),2004,21(4):307-309.

[12]賈彥博,孫嵐,屠海云,等.超高效液相色譜法同時測定化妝品中多種雌激素[J].日用化學(xué)工業(yè),2011,41(4):303-306.

[13]袁凱松,招春華,溫飛容,等.化妝品中酚類雌激素的一種快速篩查方法[J].宜春學(xué)院學(xué)報.2013,35(3):100-102.

[14]余曉,袁凱松,翟海云,等.高效液相色譜法測定化妝品中四種雌激素[J].宜春學(xué)院學(xué)報.2012,34(12):91-93.

[15]KORSRUDGO,MACNEILJ D.A comparison of three bioassay techniques and high performance liquid chromatography for the detection of chlortetracycline residues in swine tissues[J].Food Addit Contam,1987,5(2):149-153.

[16]SOKOLJ,MATISOVAE.Determination of tetracycline antibiotics in animal tissues of food-Producing animals by high performance liquid chromatography using solid phase extraction[J].J Chromatogr:A,1994,669:75-80.

[17]KAWATA S,SATOK,NISHIKAWA Y,et al.Liquid chromatographic determination of ox tetracycline in swine tissues[J].J Assoc of Anal Chem.,1996,79(6):1463-1465.

[18]FRANCIUS G,LEBEER S,ALSTEENS D,et a1.Detection,localization and conformational analysis of single poly-saccharide molecules on live bacteria[J].ACSNANO,2009,2(9):1921-1929.

[19]TOUHAMI A,HOFFMANN B,VASELLA A,et al.Probing specific lectin-carbohydrate interactions using atomic force microscopy imaging and force measurements[J].Langmuir,2003,19(5):1745-1751.

[20]劉華良,李放,楊潤,等.超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法分析化妝品中的常見抗生素及甲硝唑[J].色譜,2009,27(1):50-53.

[21]趙曉亞,李娟,林雁飛.高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法對化妝品中9種四環(huán)素類藥物的同時測定[J].分析測試學(xué)報,2009,28(10):1138-1142.

[22]吳大南,鄭和輝.高效液相色譜法測定化妝品中四種抗生素[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志,2012,22(12):2837-2841.

[23]盧曉蕊,霍任鋒,許海東,等.化妝品中喹諾酮類抗生素的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測定法[J].環(huán)境與健康雜志,2013,30(6):518-520.

[24]莫金娜,溫玉瑩,李汶.薄層色譜法鑒別化妝品中的紅霉素[J].學(xué)術(shù)與經(jīng)驗,2008,2:42-43.

[25]陳京閩.儀器萃取法在化妝品營養(yǎng)面霜抗生素測定中的應(yīng)用[J].寧夏醫(yī)科大學(xué)學(xué)報,2012,34(2):191-193.

[26]陳黎明,胡國勝,田玉平.高效液相色譜法測定化妝品中6種四環(huán)素類抗生素[J].日用化學(xué)工業(yè),2010,40(1):64-66.

[27]楊艷偉,朱英,張衛(wèi)強(qiáng).化妝品中7種抗生素及地塞米松磷酸鈉和水楊酸的高效液相色譜測定法[J].環(huán)境與健康雜志,2006,23(3):264-266.