氣相色譜法測(cè)定香附揮發(fā)油中α-香附酮的含量

徐 程，張利萍

（廣州立白企業(yè)集團(tuán)有限公司，廣東 廣州 510170）

香附為莎草科植物莎草（Cyperus rotundus L.）的干燥根莖。它秋季采挖，燎去毛須后置沸水中略煮或蒸透后曬干，或燎后直接曬干。香附具有疏肝解郁、理氣寬中、調(diào)經(jīng)止痛之功效，適用于肝郁氣滯、胸脅脹痛、疝氣疼痛、乳房脹痛、脾胃氣滯、烷腹痞悶、脹滿疼痛、月經(jīng)不調(diào)、經(jīng)閉痛經(jīng)[1]等癥，被歷代許多醫(yī)學(xué)家視為婦科良藥。

香附的有效成分主要集中在其揮發(fā)油中。研究表明，香附的揮發(fā)油中含有多種單萜、倍半萜及其氧化物[2]。《中國(guó)藥典》（2010年版）一部規(guī)定了以α-香附酮作為對(duì)照品、采用薄層色譜法鑒別香附，而已報(bào)道的香附揮發(fā)油中α-香附酮的測(cè)定多采用高效液相色譜法[3]。

本文采用氣相色譜儀，建立了香附揮發(fā)油中α-香附酮的測(cè)定方法。該方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確，為香附藥材的質(zhì)量控制提供了科學(xué)依據(jù)。

1.實(shí)驗(yàn)部分

1.1 試劑與器材

島津GC-2014C氣相色譜儀，具有FID檢測(cè)器；甲醇，色譜純，Merck；α-香附酮，質(zhì)量分?jǐn)?shù)99.3%，中國(guó)藥品生物制品檢定所。

1.2 色譜條件

色譜柱:DB-5（30m×0.320mm×0.25mm）毛細(xì)管色譜柱，起始溫度150℃，以5℃/min恒速升溫至260℃，在260℃下恒溫5min；進(jìn)樣口:260℃；檢測(cè)器:280℃；進(jìn)樣量:1mL；分流比:1∶10，分流速度10mL/min。

1.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

準(zhǔn)確稱取香附酮0.05g于100mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，分別移取上液0.5mL、2.5mL、5mL、7mL、10mL于10mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，制得系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，備用。

2.結(jié)果與分析

2.1 典型色譜圖與線性范圍

按1.2的色譜條件得到α-香附酮的典型色譜圖（圖1）。由圖1可以看出，α-香附酮的出峰時(shí)間在8.2min，與其他物質(zhì)完全分離，且沒有雜質(zhì)干擾，滿足分析要求。

圖1 α-香附酮的標(biāo)準(zhǔn)品與樣品色譜圖

取配制好的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別進(jìn)樣1mL，按色譜條件進(jìn)行分析。以標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo)（x，mg/mL），峰面積為縱坐標(biāo)（y）繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到α-香附酮的線性回歸方程y＝21.7926x－128.4379，回歸系數(shù)r＝0.9996，滿足線性要求（圖2）。

圖2 α-香附酮的標(biāo)準(zhǔn)曲線

2.2 精密度試驗(yàn)

取同一濃度的對(duì)照品溶液，在同樣的色譜條件下重復(fù)進(jìn)樣6次進(jìn)行檢測(cè)，測(cè)得α-香附酮的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD為1.1431%（見表1），表明此方法有很好的精密度。

表1 α-香附酮的精密度試驗(yàn)

2.3 加標(biāo)回收率試驗(yàn)

準(zhǔn)確稱取0.05g香附精油樣品3份于10mL容量瓶中，分別加入2mL、3mL、4mL的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液，再加入甲醇定容至刻度，充分振搖混合均勻，用0.45mm濾膜過濾，按色譜條件分析。試驗(yàn)結(jié)果見表2。

表2 回收率試驗(yàn)結(jié)果

2.4 樣品測(cè)定

準(zhǔn)確稱取香附精油樣品0.05g于10mL容量瓶中，加入甲醇定容至刻度，充分振搖混合均勻，制得樣品溶液，用0.455mm濾膜過濾。在上述色譜條件下，待儀器就緒后，測(cè)試樣品溶液，以2次重復(fù)測(cè)得的峰面積數(shù)據(jù)計(jì)算結(jié)果（見表3）。

表3 香附精油樣品含量測(cè)試數(shù)據(jù)

3.結(jié)論

建立了中藥提取物香附揮發(fā)油中α-香附酮的檢測(cè)方法。此方法用甲醇提取香附揮發(fā)油中的α-香附酮，經(jīng)DB-5毛細(xì)管色譜柱進(jìn)行分離后，由氫火焰離子化檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)。方法簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好，對(duì)于建立香附揮發(fā)油的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)具有重要意義。

[1]中國(guó)藥典，2010年版.一部[S].2010:241-242.

[2]林曉珊,吳惠勤,黃芳,等.香附揮發(fā)油的提取和GC/MS分析[J].2006,27(1):40-44.

[3]侯曉虹,李巖,唐星,等.HPLC法測(cè)定香附二氧化碳超臨界流體萃取物中α型β-香附酮與香附烯酮含量[J].沈陽(yáng)藥科大學(xué)學(xué)報(bào),2006,23(6):373-375.