BBS 926全自動(dòng)醫(yī)用低速離心機(jī)制備冰凍解凍去甘油紅細(xì)胞的質(zhì)量評(píng)價(jià)

盧少芬 陳志忠 李結(jié)敏 陳馥如 何玉冰 林雪梅 皮 燕

廣東省肇慶市中心血站，廣東肇慶 526020

BBS 926全自動(dòng)醫(yī)用低速離心機(jī)制備冰凍解凍去甘油紅細(xì)胞的質(zhì)量評(píng)價(jià)

盧少芬 陳志忠 李結(jié)敏 陳馥如 何玉冰 林雪梅 皮 燕

廣東省肇慶市中心血站，廣東肇慶 526020

目的評(píng)價(jià)BBS 926全自動(dòng)醫(yī)用低速離心機(jī)制備的冰凍解凍去甘油紅細(xì)胞的質(zhì)量。 方法BBS 926全自動(dòng)醫(yī)用低速離心機(jī)制備冰凍解凍去甘油紅細(xì)胞完成后，立即留取樣本，檢測(cè)其血紅蛋白含量、游離血紅蛋白含量、白細(xì)胞殘留量、甘油殘留量等質(zhì)量監(jiān)測(cè)指標(biāo)。 結(jié)果血紅蛋白含量為（23±5）g/L、游離血紅蛋白含量為（0.43±0.25）g/L、白細(xì)胞殘留量為（0.6±0.3）×107個(gè)、甘油殘留量為（3.6±2.5）g/L、細(xì)菌培養(yǎng)試驗(yàn)陰性。 結(jié)論 BBS 926全自動(dòng)醫(yī)用低速離心機(jī)制備冰凍解凍去甘油紅細(xì)胞各項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)均達(dá)到國(guó)家質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，能有效地保障臨床輸血安全。

BBS 926；制備；冰凍解凍去甘油紅細(xì)胞；質(zhì)量評(píng)價(jià)

隨著臨床成分輸血的開(kāi)展，臨床用血對(duì)Rh（D）陰性血的需求量日益增加，如何保障Rh（D）陰性血型系統(tǒng)患者醫(yī)療急救用血是一個(gè)十分迫切的問(wèn)題［1］，特別是事故搶救和產(chǎn)婦大出血，短時(shí)間內(nèi)需求的血量較多［2］，臨時(shí)招募獻(xiàn)血者很難做到，稀有血型急診患者的生命因此受到威脅，另一方面，血站街頭、獻(xiàn)血屋采集的Rh（D）陰性血液往往因采集后保存期有限，臨床無(wú)需求而造成浪費(fèi)［3］，越來(lái)越多的血站通過(guò)甘油化冷凍保存技術(shù)保存稀有血型冰凍紅細(xì)胞［4］。目前國(guó)內(nèi)多采用手工方法制備和ACP 215型細(xì)胞處理儀制備冰凍解凍去甘油紅細(xì)胞，但是手工方法復(fù)雜，時(shí)間長(zhǎng)，這與人員操作手法及經(jīng)驗(yàn)有很大關(guān)系。本站于2012年底購(gòu)置了一臺(tái)由四川南格爾生物醫(yī)學(xué)股份有限公司制造的BBS 926全自動(dòng)醫(yī)用低速離心機(jī)，用于制備冰凍解凍去甘油紅細(xì)胞，到目前為止，使用該機(jī)器制備冰凍解凍去甘油紅細(xì)胞共28 U，并應(yīng)用于臨床輸注，無(wú)一例出現(xiàn)輸血反應(yīng)，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 材料

9%氯化鈉溶液：北京博德桑特輸采血器材科技開(kāi)發(fā)中心；0.9%氯化鈉溶液500 ml：四川南格爾生物醫(yī)學(xué)股份有限公司；0.9%氯化鈉溶液1000 ml：四川南格爾生物醫(yī)學(xué)股份有限公司；250 ml×3洗滌多聯(lián)血袋：費(fèi)森尤斯卡比（廣州）醫(yī)療用品有限公司；一次性使用單采血漿分離器P-1000B：四川南格爾生物醫(yī)學(xué)股份有限公司。

1.2 設(shè)備

BBS 926全自動(dòng)醫(yī)用低速離心機(jī)：四川南格爾生物醫(yī)學(xué)股份有限公司；離心機(jī)：日立CR7；無(wú)菌接駁機(jī)：費(fèi)森尤斯卡比（廣州）醫(yī)療用品有限公司；血漿解凍箱JXH-I：廣州市金鉉映電子科技開(kāi)發(fā)有限公司。血細(xì)胞分析儀：瑞士奧菲Orphee Mythic 22；全自動(dòng)細(xì)菌培養(yǎng)檢測(cè)系統(tǒng)BACTEC 9120（美國(guó)）。

1.3 方法

1.3.1 制備方法 ①將冰凍紅細(xì)胞從成品庫(kù)領(lǐng)出，放入已預(yù)溫39～40℃的血漿解凍箱進(jìn)行解凍，解凍完通過(guò)無(wú)菌接管機(jī)與一次性塑料轉(zhuǎn)移袋連接，平衡稱重，放置于離心機(jī)內(nèi)杯中以2500 r/min、4℃、離心12 min，去上清液及白膜層，待去甘油化處理；②BBS 926全自動(dòng)醫(yī)用低速離心機(jī)去甘油化處理：開(kāi)機(jī)、自檢、選擇去甘油化程序、安裝耗材、連接各洗滌液，然后打開(kāi)所有管路夾子，連接已解凍的冰凍紅細(xì)胞血袋并將其放置于搖擺機(jī)上，預(yù)沖管路后，按確認(rèn)系統(tǒng)進(jìn)入自動(dòng)洗滌階段，當(dāng)洗滌流程完畢后，進(jìn)行產(chǎn)品收集流程，卸下耗材，去甘油化完成；③去甘油化的后處理：用無(wú)菌接管機(jī)將收集的成品血袋與250 ml×3洗滌多聯(lián)血袋連接，以4℃，3500 r/min，離心9 min，離心后根據(jù)上清液的顏色、透明度等適當(dāng)增減洗滌的次數(shù)，最后1次洗滌上清液無(wú)明顯溶血跡象，再滴加0.9%氯化鈉溶液至容量符合 《全血及成分血質(zhì)量要求 （GB 18 469-2012）》［5］，并按要求進(jìn)行留樣。

1.3.2 冰凍解凍去甘油紅細(xì)胞質(zhì)量檢測(cè)方法 將冰凍解凍去甘油紅細(xì)胞留取的樣品采用血細(xì)胞分析儀檢測(cè)血紅蛋白含量、比色法檢測(cè)游離血紅蛋白、顯微鏡下計(jì)數(shù)白細(xì)胞殘留量、GPO-PAP法檢測(cè)甘油殘留量、全自動(dòng)細(xì)菌培養(yǎng)檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)和檢測(cè)。

2 結(jié)果

1 U×28袋冰凍解凍去甘油紅細(xì)胞各項(xiàng)質(zhì)量檢測(cè)指標(biāo)即甘油殘留量、血紅蛋白含量、游離血紅蛋白含量、白細(xì)胞殘留量、無(wú)菌試驗(yàn)均達(dá)到國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)---《全血及成分血質(zhì)量要求GB 18469-2012》（表1）。

表1 2013年1月～2014年7月BBS 926全自動(dòng)醫(yī)用低速離心機(jī)制備冰凍解凍去甘油紅細(xì)胞的質(zhì)量檢測(cè)結(jié)果（n=28）

3 討論

BBS 926全自動(dòng)醫(yī)用低速離心機(jī)作為目前中國(guó)第一臺(tái)由南格爾自行研制的全自動(dòng)、功能封閉式的紅細(xì)胞處理設(shè)備，可用于紅細(xì)胞的甘油化及去甘油化，雖然去甘油化洗滌時(shí)間與美國(guó)血液技術(shù)公司生產(chǎn)的ACP 215全自動(dòng)細(xì)胞處理系統(tǒng)相比稍長(zhǎng)，據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道ACP 215全自動(dòng)細(xì)胞處理系統(tǒng)去甘油洗滌僅需50～60 min［6］，而B(niǎo)BS 926全自動(dòng)醫(yī)用低速離心機(jī)去甘油化洗滌時(shí)間為75～90 min（傳統(tǒng)手工操作則需3～4 h），技術(shù)上基本實(shí)現(xiàn)全自動(dòng)化（除更換液體）、程序化，最大程度減少人為差錯(cuò)事故的發(fā)生，保證產(chǎn)品質(zhì)量；自動(dòng)化操作降低了勞動(dòng)強(qiáng)度，克服了手工洗滌操作步驟多、所需時(shí)間長(zhǎng)、工作效率低、人為影響因素大等諸多問(wèn)題［7］。BBS 926全自動(dòng)醫(yī)用低速離心機(jī)無(wú)菌接駁血袋和耗材，整個(gè)過(guò)程均為密閉式，耗材還串聯(lián)了無(wú)菌濾器，降低了血液污染的概率，制備的產(chǎn)品細(xì)菌培養(yǎng)試驗(yàn)陰性；同時(shí)配備獨(dú)創(chuàng)360°醫(yī)用雙軸搖擺機(jī)和連續(xù)流動(dòng)洗滌系統(tǒng)，通過(guò)控制血液泵的快慢，實(shí)現(xiàn)對(duì)各種洗滌液加入的精準(zhǔn)調(diào)節(jié)，將去甘油化程序分解成多個(gè)子程序，每個(gè)子程序的加液量和加液速度不同，保持滲透壓變化在紅細(xì)胞的承受范圍內(nèi)，減少對(duì)紅細(xì)胞的影響，保證了紅細(xì)胞的回收率和較低的游離血紅蛋白含量，但其仍存在不足之處，表現(xiàn)在以下幾個(gè)方面：①系統(tǒng)程序沒(méi)有記憶功能，因某一原因需要關(guān)閉電源重新開(kāi)機(jī)時(shí)，無(wú)法恢復(fù)到原來(lái)的工作程序；②最終產(chǎn)品的容量無(wú)法達(dá)到國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，需要作去甘油后處理；③雖配備獨(dú)創(chuàng)360°醫(yī)用雙軸搖擺機(jī)，減少對(duì)紅細(xì)胞的影響，但在血液回輸或添加洗滌液時(shí)仍需要人為地提高或平放血袋，以便于袋中的紅細(xì)胞全部回流至離心杯，減少紅細(xì)胞的損失。這些有待于南格爾公司進(jìn)一步完善和改進(jìn)。

從表1可以看出，BBS 926全自動(dòng)醫(yī)用低速離心機(jī)制備冰凍解凍去甘油紅細(xì)胞，其制品質(zhì)量符合《全血及成分血質(zhì)量要求GB 18469-2012》的要求。其制備的冰凍解凍去甘油紅細(xì)胞形態(tài)上雖有輕微改變，但不影響攜氧等功能，且由于多次洗滌，白細(xì)胞、血小板、抗凝劑、細(xì)胞外鉀、游離血紅蛋白等物質(zhì)幾乎被洗去，所以輸注時(shí)患者輸血不良反應(yīng)大大減少［8］。-80℃冰凍保存紅細(xì)胞具有保存時(shí)間長(zhǎng)、保存效果好的特點(diǎn)，是目前最有效的紅細(xì)胞長(zhǎng)期保存方法［9］，是稀有血型輸血以及自身輸血的重要手段。冷凍保存紅細(xì)胞既爭(zhēng)取了搶救時(shí)間，又極大地方便了臨床用血，近年來(lái)機(jī)器制備冰凍解凍去甘油紅細(xì)胞在我國(guó)已逐步取代手工制備，本站自2013年3月份開(kāi)始正式使用BBS 926全自動(dòng)醫(yī)用低速離心機(jī)制備冰凍解凍去甘油紅細(xì)胞，至今共制備28 U，并應(yīng)用于臨床輸注，無(wú)一例出現(xiàn)輸血反應(yīng)。隨著臨床醫(yī)療水平的不斷提高，肇慶市稀有血型血液的臨床供應(yīng)量也逐年增加，BBS 926全自動(dòng)醫(yī)用低速離心機(jī)作為國(guó)內(nèi)性價(jià)比較高的全自動(dòng)洗滌機(jī)，克服了手工洗滌操作步驟多、時(shí)間長(zhǎng)、效率低，人為因素影響大等問(wèn)題［10］，在一定程度上緩解了臨床稀有血型急診患者的應(yīng)急供血，為患者贏得了搶救時(shí)間，也為臨床提供了更符合國(guó)家質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的血液產(chǎn)品，更有效地保障了臨床輸血安全，機(jī)器制備是有效保證血液質(zhì)量的前提［11］。

［1］陳均.深低溫保存Rh（D）陰性血冷凍血庫(kù)的建立及其臨床應(yīng)用［J］.臨床血液學(xué)雜志·輸血與檢驗(yàn)版，2007，4（2）：66-68.

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The quality evaluation of BBS 926 automatic medical low-speed centrifugal mechanism preparing the ice thawed deglycerolized red cell

LU Shao-fen CHEN Zhi-zhong LI Jie-min CHEN Fu-ru HE Yu-bing LIN Xue-meiPI Yan
Central Blood Station of Zhaoqing City in Guangdong Province,Zhaoqing 526020,China

ObjectiveTo evaluate the quality of BBS 926 automatic medical low-speed centrifugal mechanism preparing the ice thawed deglycerolized red cell.MethodsAfter BBS 926 automatic medical low-speed centrifugal mechanism preparing the ice thawed deglycerolized red cell,blood sample were collected and tested quality indicators,and the indicators included the content of hemoglobin and free hemoglobin,leukocyte residues,glycerol residues and on on.ResultsThe content of hemoglobin was (23±5)g/L,the content of free hemoglobin was (0.43±0.25)g/L,leukocyte residues were(0.6±0.3)×107,glycerol residues were(3.6±2.5)g/L,and bacterial culture test was negative.ConclusionEach index of BBS 926 automatic medical low-speed centrifugal mechanism preparing the ice thawed can meet the national quality standards,and it can guarantee the safety of clinical transfusion.

BBS 926;Preparation;Ice thawed deglycerolized red cell;Quality evaluation

R446.11+3

A

1674-4721（2014）10（c）-0087-03

2014-08-05本文編輯：許俊琴）

廣東省肇慶市科技計(jì)劃項(xiàng)目（2014E2813）

盧少芬（1981-），女，主管護(hù)師，主要從事血液成分制備和研究