臨床血液檢驗(yàn)中兩種不同細(xì)菌鑒定法的臨床分析

楊 丹

（農(nóng)安人民醫(yī)院，吉林 農(nóng)安 130200）

臨床血液檢驗(yàn)中兩種不同細(xì)菌鑒定法的臨床分析

楊 丹

（農(nóng)安人民醫(yī)院，吉林 農(nóng)安 130200）

目的 探討臨床血液檢驗(yàn)中兩種不同細(xì)菌鑒定法的使用價(jià)值。方法 選取我院自2011年8月至2013年8月收治的600例發(fā)熱伴隨全身感染患者陽(yáng)性培養(yǎng)標(biāo)本作為研究對(duì)象，分別采用直接藥敏試驗(yàn)與常規(guī)藥敏試驗(yàn)對(duì)所得600份陽(yáng)性血液標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)，觀察兩種檢測(cè)結(jié)果所得與藥敏結(jié)果符合率。結(jié)果 兩種檢測(cè)方法在G+球菌敏感度的檢測(cè)結(jié)果比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），兩種檢測(cè)結(jié)果在G-桿菌耐藥性、敏感度及重度敏感等方面比較亦無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論 常規(guī)藥敏試驗(yàn)與直接藥敏試驗(yàn)檢驗(yàn)符合度較高，直接法在細(xì)菌抗菌藥物敏感度檢測(cè)結(jié)果與常規(guī)檢測(cè)方法基本一致，操作更加方便，可推廣使用。

臨床血液檢驗(yàn)；細(xì)菌鑒定法

細(xì)菌自身變異及抗生素的濫用等多種因素共同作用下，導(dǎo)致細(xì)菌藥敏性及耐藥性均出現(xiàn)明顯改變，臨床治療難度明顯加大，因此加強(qiáng)對(duì)血液細(xì)菌的監(jiān)測(cè)，觀察其耐藥性對(duì)臨床治療有著較大的指導(dǎo)作用[1]。目前臨床常采用鏡檢、血清學(xué)凝集試驗(yàn)、常規(guī)檢驗(yàn)、直接藥敏試驗(yàn)等，細(xì)菌對(duì)抗菌藥物敏感度的檢驗(yàn)準(zhǔn)確度明顯提高，患者疾病細(xì)菌的類型能夠快速準(zhǔn)確的檢測(cè)出，從而更好的治療。筆者對(duì)我院收治的600例發(fā)熱伴隨全身感染患者的陽(yáng)性培養(yǎng)標(biāo)本作為研究，具體報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

我院自2011年8月至2013年8月收治的600例發(fā)熱伴隨全身感染患者，男360例，女240例，年齡2～68歲，平均年齡（32.62±2.18）歲，患者發(fā)熱初期或高峰期，在無菌環(huán)境下采集陽(yáng)性血液標(biāo)本，每位患者接受1次采集，20 mL，共600份標(biāo)本。冷藏保存樣本后，及時(shí)送往檢驗(yàn)科。患者樣本采集前2 d均未使用可影響檢驗(yàn)結(jié)果的藥物，同時(shí)亦未接受任何治療。排除凝血功能障礙及血液系統(tǒng)疾病患者。

1.2 方法

常規(guī)藥敏實(shí)驗(yàn)法：陽(yáng)性標(biāo)本分別與麥康凱平板、巧克力平板及血平板上接種，在5%濃度二氧化痰下孵育，35 ℃下持續(xù)約20 h，取出菌落涂片后，革蘭染色，根據(jù)檢測(cè)所得結(jié)果選擇酶，藥敏試驗(yàn)及鑒定采用walk-away4.0系統(tǒng)進(jìn)行。

直接藥敏實(shí)驗(yàn)法：采用BD公司生產(chǎn)的 BACTEC9240 系統(tǒng)對(duì)采集血液標(biāo)本進(jìn)行培養(yǎng)及檢測(cè)。血樣為陽(yáng)性時(shí)，采用無菌注射器抽取陽(yáng)性樣本10mL后，注入無菌食管內(nèi)，之后離心分離細(xì)菌密度梯度，1500 r離心5 min后收集上層清液，3000 r離心15 min后去除上清液。采用PBS進(jìn)行兩次洗滌沉淀后重懸。將20 μL懸液涂片，革蘭染色，采用倒置顯微鏡觀察：G+菌表現(xiàn)為鏈狀，則采用血瓊脂平板（MH+5%脫纖維無菌綿羊血）對(duì)血液標(biāo)本進(jìn)行初試驗(yàn)，根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果選擇酶，調(diào)整菌液濃度為6.2×108cfu/L后，接種NC21綜合板，進(jìn)行細(xì)菌鑒定及藥敏試驗(yàn)。在MH平板上滴2滴左右菌種（不含真菌），用無菌拭子均勻涂抹后，將藥敏試片貼于其上。細(xì)菌敏感度、耐藥性及中度敏感度均參考2005NCCLSI 的標(biāo)準(zhǔn)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

本次研究所有患者的臨床資料均采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理，計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)，組間對(duì)比采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異具有顯著性，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 結(jié)果顯示，直接法與常規(guī)法對(duì)血液細(xì)菌鑒定中，G+球菌敏感度直接藥敏法及常規(guī)藥敏法符合率為87.5%（280/320）；G-桿菌直接藥敏法及常規(guī)藥敏法檢出符合率為80%（52/65）；克雷伯桿菌直接藥敏法及常規(guī)藥敏法檢出符合率為80%（46/55）；大腸桿菌直接藥敏法及常規(guī)藥敏法檢出符合率為88.9%（32/36）；葡萄球菌直接藥敏法及常規(guī)藥敏法檢出符合率為90.9%（20/22）；不動(dòng)桿菌直接藥敏法及常規(guī)藥敏法檢出符合率為93.3%（14/15）；變形桿菌直接藥敏法及常規(guī)藥敏法檢出符合率為83.3%（15/18）；假單胞桿菌（45株）、沙門菌（12株）直接藥敏法及常規(guī)藥敏法檢出符合率均為100%。

2.2 兩種檢測(cè)方法抗生素在G+桿菌、G-桿菌的檢測(cè)中，耐藥性、敏感度及重度敏感等比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具體見表2。

表2 兩種檢測(cè)方法抗生素敏感度檢出符合率

3 討 論

近年來抗生素藥物在臨床逐漸推廣使用，感染類疾病的治療取得了一定的成就，有效提高了患者存活率，然而抗生素濫用、誤用等現(xiàn)象的存在導(dǎo)致細(xì)菌耐藥性增強(qiáng)，同時(shí)細(xì)菌自身發(fā)生的變化導(dǎo)致感染類疾病治療難度明顯增加[2]，患者生存質(zhì)量及治療效果明顯下降；院內(nèi)感染亦是抗生素濫用導(dǎo)致的嚴(yán)重后果之一，多重耐藥菌感染下患者可出現(xiàn)敗血癥、全身感染等細(xì)菌性疾病[3]，嚴(yán)重威脅患者生命安全，因此對(duì)細(xì)菌耐藥性進(jìn)行檢測(cè)并明確分類，對(duì)于臨床用藥有著顯著的指導(dǎo)意義。臨床在血液檢驗(yàn)中常采用藥敏試驗(yàn)，然而目前臨床使用的檢測(cè)方法較多，同時(shí)不同檢測(cè)方法均存在一定的利弊。常規(guī)檢測(cè)陽(yáng)性血液標(biāo)本較為準(zhǔn)確，然而藥敏試驗(yàn)及細(xì)菌鑒定速度均較慢[4]，不利于臨床盡快指導(dǎo)用藥。本次研究中采用直接藥敏試驗(yàn)將血液標(biāo)本接種于平板上，并將抗生素紙片提上，在一定溫度賦予下，通過抑菌環(huán)大小進(jìn)行藥敏試驗(yàn)鑒定，無需分離培養(yǎng)，操作更加方便快捷，能夠盡快為臨床治療提供參考[5]，因此有著重要的臨床意義。本次研究結(jié)果顯示，分別采用常規(guī)法及直接法對(duì)600份陽(yáng)性血液標(biāo)本進(jìn)行鑒定，結(jié)果顯示在細(xì)菌檢測(cè)中，總一致率為87.9%，由此可見，在細(xì)菌檢測(cè)中，直接法檢驗(yàn)準(zhǔn)確率較高，能夠有效鑒定細(xì)菌，尤其是對(duì)G-桿菌和G+球菌；在陽(yáng)性血液樣本的藥敏試驗(yàn)中，兩種檢測(cè)法對(duì)G-桿菌和G+球菌的耐藥、中度敏感及敏感度的符合率均比較高，比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），由此可知，直接法在對(duì)抗菌藥物敏感度菌檢測(cè)結(jié)果與常規(guī)檢測(cè)法基本相同，準(zhǔn)確率高，同時(shí)操作方便快捷，能夠及時(shí)反饋檢測(cè)結(jié)果，從而為臨床治療提供有效參考，值得在臨床推廣使用。

[1] 葉明,楊喜民,王剛,等.耐碳青霉烯類銅綠假單細(xì)胞菌的產(chǎn)酶及聯(lián)合藥敏試驗(yàn)[J].東南國(guó)防醫(yī)藥,2011,13(2):135-137.

[2] 任光,虎鳳俠.切口感染23例的病原菌分布及藥物敏感試驗(yàn)分析[J].中國(guó)社區(qū)醫(yī)師(醫(yī)學(xué)專業(yè)半月刊),2009,25(23):181.

[3] 趙碩,朱以軍,單小云,等.576株血液分離病原菌的分布及耐藥性分析[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2011,9(14):218.

[4] 彭代智,劉小玲,劉智勇,等.燒傷患者 2748 株病原菌分布特點(diǎn)及耐藥性分析[J].中華燒傷雜志,2012,2(6):288.

[5] Jammula A,Winawer SJ,Mills GM,et al.1164 Adherence to Programmatic Annual Fecal Occult Blood Test (gFOBt) Versus Screening Colonoscopy in African Americans Compared to Whites With Equal Access and Navigation: Observations From National Colonoscopy Study (NCS)[J].Gastroenterology,2012,142(5):S213.

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1671-8194（2014）19-0280-02