嗜熱毛殼菌纖維酶對肉雞消化道酶活性影響的研究

王愛娜 ，楊在賓

（1.濰坊工商職業(yè)學(xué)院，山東 諸城 262234；2.山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院，山東 泰安 271018）

隨著畜牧業(yè)快速發(fā)展，我國飼料資源嚴(yán)重不足，同時家禽飼料中含有非淀粉多糖等抗?fàn)I養(yǎng)因子也影響動物的生產(chǎn)性能。解決該問題的有效方法是在飼糧中添加酶制劑。雖然酶制劑在畜牧生產(chǎn)中的應(yīng)用取得了很大的成果，但其作用機(jī)理還不明了。因此，本試驗通過研究在飼料中添加嗜熱毛殼菌纖維酶對肉雞消化酶活性影響來闡釋酶制劑對肉雞的促生長機(jī)理。

1 材料與方法

1.1 酶制劑

嗜熱毛殼菌纖維酶（其中纖維素酶、木聚糖酶和β-葡聚糖酶活性分別為2 231.64、794.31和3 480.07U · g-1）。

1.2 日糧組成及營養(yǎng)水平

試驗基礎(chǔ)日糧參考NRC肉雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)（1994）配制，飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 飼糧組成及營養(yǎng)水平

1.3 試驗設(shè)計

試驗選用1日齡健康A(chǔ)A肉仔雞120只，隨機(jī)分為4組，分別為對照組和試驗1、2、3組，每組3個重復(fù)，每個重復(fù)10只。各組飼喂基礎(chǔ)日糧，同時分別添加嗜熱毛殼菌纖維酶0、0.05%、0.15%和0.25%。試驗雞網(wǎng)上飼養(yǎng)，自由采食和飲水。

1.4 試驗方法

分別在14、35和49日齡，每個重復(fù)選取體重接近的試驗雞2只，空腹稱重，頸靜脈放血、扭斷頸椎，致其快速死亡。屠宰前禁食12 h。試驗雞屠宰后，迅速剖開腹腔，取胃、十二指腸和空腸食糜及胰臟，然后置液氮中保存。

1.5 測定指標(biāo)和方法

1.5.1 酶活性測定前的預(yù)處理

先將樣品在室溫下解凍，稱取0.2 g，加入0.15mol·L-1的生理鹽水5mL，在冰水浴中勻漿2min，然后4℃，12 000 rpm，離心10min，取上清液用于酶活性的測定。

1.5.2 消化酶活性的測定

胰蛋白酶和α-淀粉酶活性測定按照孫洪新的方法完成[1]。脂肪酶和胃蛋白酶活性的測定采用試劑盒法，試劑盒購于南京建成生物工程公司。

1.6 統(tǒng)計分析

試驗數(shù)據(jù)采用SPSS軟件進(jìn)行單因素方差分析，Duncan's法進(jìn)行多重比較。結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 對肉雞淀粉酶活性的影響

嗜熱毛殼菌纖維酶對其胃腸道淀粉酶活性的影響見表2。

表2 嗜熱毛殼菌纖維酶對其胃腸道淀粉酶活性的影響U·g-1

由表2可見，添加嗜熱毛殼菌纖維酶可以提高肉雞十二指腸、空腸、胰臟淀粉酶的活性，但差異不顯著（P＞0.05）。

程志斌等試驗結(jié)果表明，日糧中添加非淀粉多糖酶制劑（含木聚糖酶、葡聚糖酶和纖維素酶），可使21日齡羅斯肉雞空腸內(nèi)容物的淀粉酶活性顯著提高（P＜0.05）[2]。Ritz等研究表明，在玉米-豆粕型日糧中添加淀粉酶對小火雞胰腺組織生長無顯著影響（P＞0.05），對胰腺淀粉酶活性也無顯著影響（P＞0.05），但外源淀粉酶的添加對腸道淀粉酶活性影響效果不一致[3]。由此可見，外源酶對淀粉酶活性影響的報道差異較大，這是由于酶活測定方法無統(tǒng)一的國家標(biāo)準(zhǔn)所造成的。

2.2 對肉雞胰蛋白酶活性的影響

嗜熱毛殼菌纖維酶對肉雞胰蛋白酶活性的影響見表3。

表3 嗜熱毛殼菌纖維酶對肉雞胰蛋白酶活性的影響U·g-1

由表3可見，添加嗜熱毛殼菌纖維酶0.15%顯著和極顯著提高了14日齡肉雞十二指腸和空腸胰蛋白酶活性（P＜0.05和P＜0.01），胰臟中胰蛋白酶活性雖也有所提高，但差異不顯著（P＞0.05）；對于35日齡肉雞，與對照組相比，添加嗜熱毛殼菌纖維酶0.15%可顯著提高十二指腸胰蛋白酶的活性（P＜0.05），但添加嗜熱毛殼菌纖維酶的3組間無顯著差異（P＞0.05），且對空腸胰蛋白酶活性的影響不顯著（P＞0.05）；添加嗜熱毛殼菌纖維酶0.15%可極顯著提高胰臟胰蛋白酶的活性（P＜0.01）；49日齡時，添加嗜熱毛殼菌纖維酶0.15%可顯著提高十二指腸和胰臟的胰蛋白酶活性（P＜0.05），但與其他兩個試驗組相比，差異不顯著（P＞0.05）。

外源酶對肉仔雞內(nèi)源性胰蛋白酶活性影響的報道較多。本試驗結(jié)果表明，添加嗜熱毛殼菌纖維酶0.15%顯著提高了各階段肉雞十二指腸胰蛋白酶的活性（P＜0.05），極顯著提高空腸胰蛋白酶的活性（P＜0.01），但對其他階段空腸的胰蛋白酶活性無顯著影響（P＞0.05）。王明海等研究發(fā)現(xiàn)，在玉米-豆粕型日糧中添加復(fù)合酶能提高20日齡肉雞蛋白酶的活性[4]。但徐昌領(lǐng)等研究結(jié)果表明，日糧中添加酶制劑降低21日齡肉雞胰蛋白酶分泌水平[5]。外源酶的添加對胰蛋白酶活性影響報道不盡相同，主要由日糧和試驗雞影響所致。日糧不同，所含的抗?fàn)I養(yǎng)因子（酶作用的底物）不同，如果日糧中可溶性非淀粉多糖（SNSP）的含量過高，那么外源酶就會對內(nèi)源酶的分泌產(chǎn)生抑制效應(yīng)。從本試驗的結(jié)果可以看出，添加酶制劑0.15%能顯著提高肉中雞和肉大雞胰蛋白酶的活性（P＜0.05），對于肉仔雞，雖然胰蛋白酶的活性有所提高，但差異不顯著（P＞0.05）。

2.3 對肉雞胃蛋白酶活性的影響

嗜熱毛殼菌纖維酶對肉雞胃蛋白酶活性的影響見表4。

表4 嗜熱毛殼菌纖維酶對肉雞胃蛋白酶活性的影響U·g-1

由表4可知，添加嗜熱毛殼菌纖維酶0.05%和0.15%可極顯著提高胃蛋白酶活性（P＜0.01），且試驗2組胃蛋白酶的活性最高。張芹等報道，玉米-豆粕型日糧中添加木聚糖酶，可提高42日齡肉雞胃蛋白酶的活性[6]。對于肉雞來講，胃蛋白酶在蛋白質(zhì)的消化過程中意義不大，相關(guān)報道也不多，有限報道表明，外源酶可促進(jìn)家禽腺胃胃蛋白酶分泌。但是通過直接水解底物而表現(xiàn)出胃蛋白酶活性增強(qiáng)，還是真正起到促進(jìn)雞自身內(nèi)源性胃蛋白酶的分泌尚不明確。因此，胃蛋白酶活性測定值的升高并不等同于促進(jìn)內(nèi)源酶的分泌。

2.4 對肉雞脂肪酶活性的影響

嗜熱毛殼菌纖維酶對肉雞脂肪酶活性的影響見表5。

表5 嗜熱毛殼菌纖維酶對肉雞胰脂肪酶活性的影響U·g-1

由表5可知，與對照組相比，添加嗜熱毛殼菌纖維酶0.15%可顯著提高14日齡肉雞十二指腸和胰臟脂肪酶活性（P＜0.05）；但與試驗3組相比，差異不顯著（P＞0.05）；添加酶制劑對空腸脂肪酶活性無顯著影響（P＞0.05）。35日齡時，與對照組相比，添加嗜熱毛殼菌纖維酶0.15%顯著提高十二指腸、空腸和胰臟脂肪酶活性（P＜0.05）。49日齡時，與對照組相比，添加嗜熱毛殼菌纖維酶0.15%顯著提高胰臟脂肪酶活性（P＜0.05）；但與其他各組相比差異不顯著（P＞0.05）。Engberg等試驗表明，在整粒大麥日糧中添加木聚糖酶，可顯著提高糜蛋白酶和脂肪酶活性[7]。王鵬宇等試驗表明，在日糧中添加木聚糖酶500、1 000、1 500 U·kg-1能顯著提高十二指腸和空腸脂肪酶活性[8]。本試驗結(jié)果同上述報道基本一致。

3 結(jié) 論

在本試驗條件下，添加嗜熱毛殼菌纖維復(fù)合酶能顯著提高小腸和胰臟中蛋白酶和脂肪酶活性，對淀粉酶活性幾乎無影響。

[1]孫洪新.羔羊小腸消化酶活性變化規(guī)律研究[D].保定:河北農(nóng)業(yè)大學(xué)，2003.

[2]程志斌，張紅兵，黃遵錫，等.幾種商業(yè)非淀粉多糖酶制劑對肉雞腸道及內(nèi)容物消化酶的影響[J].家畜生態(tài)學(xué)報，2011，32（2）:64-68.

[3]Ritz CW，Hulet RM，Self B B，etal.Endogenous amylase levels and response to supplemental feed enzymes in male turkeys from hatch to eightweeds of age[J].Poultry Sci，1995，74（8）:1 317-1 322.

[4]王明海，高峰.復(fù)合酶制劑對肉仔雞消化酶活性和代謝的影響[J].中國家禽，2008，30（11）:23-26.

[5]徐昌領(lǐng)，左建軍，馮定遠(yuǎn).組合型木聚糖酶對21日齡黃羽肉雞器官指數(shù)、內(nèi)源消化酶活性以及腸道吸收功能的影響[J].飼料工業(yè)，2011（1）:49-53.

[6]張芹，毛勝勇，朱偉云，等.玉米-豆粕型日糧中添加木聚糖酶對肉雞生產(chǎn)性能和內(nèi)源酶活性的影響[J].畜牧與獸醫(yī)，2007，39（8）:5-7.

[7]Engberg R M，Hedemann M S，Jensen B B，et al.Influence of whole wheat and xylanase on broiler performance and microbial composition and activity in the digestive tract[J].Poultry Sci，2004，83:925-938.

[8]王鵬宇，龔月生，張磊，等.木聚糖酶對肉雞生產(chǎn)性能和腸道內(nèi)源酶活性的影響[J].中國家禽，2010（9）:11-14.