松針提取物對(duì)廣西麻雞血液生化指標(biāo)、抗氧化能力及免疫功能的影響

陸海英，葛洪偉，*，唐燕飛，韋宗海，吳芳輝

（1.廣西南寧市富鳳農(nóng)牧有限公司，南寧 530001；2.泰州市河橫家禽育種有限公司，江蘇 姜堰 225538）

在畜禽生產(chǎn)過(guò)程中，由于各類(lèi)抗生素和化學(xué)合成類(lèi)藥物的不規(guī)范使用造成了許多問(wèn)題，如細(xì)菌性疾病的耐藥性不斷加大，治療成本不斷加大，殘留在畜禽產(chǎn)品的藥物危害人體健康，并對(duì)周邊環(huán)境造成一定的污染。因此，尋求高效、環(huán)保、安全的抗生素可替代物是目前畜牧業(yè)工作者研究的熱點(diǎn)和當(dāng)務(wù)之急[1-2]。松針含有多種成分，包括揮發(fā)油類(lèi)、粗蛋白質(zhì)、氨基酸、色素、多元酚類(lèi)、脂肪酸等，具有抗氧化、抗疲勞、抗衰老、抑菌等多種作用，能提高動(dòng)物的生產(chǎn)性能[3-5]?；谒舍樕鲜鲎饔?，設(shè)計(jì)飼用松針提取物對(duì)廣西麻雞產(chǎn)蛋性能的試驗(yàn)，探討其對(duì)廣西麻雞產(chǎn)蛋性能的影響，以期為廣西麻雞的健康養(yǎng)殖提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 松針提取物制備

將松針切碎后與一定量的95%乙醇溶液混合，常溫下浸提3 h，抽濾（重復(fù)3次），合并濾液，減壓蒸餾，揮去乙醇，并在真空旋轉(zhuǎn)儀上濃縮（水浴恒溫60℃，水真空），制成相對(duì)密度1.18～1.25的清膏，再與二氧化硅以1:3進(jìn)行混合（質(zhì)量比），干燥（經(jīng)測(cè)定水分含量＜8.0%），密封備用。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物及飼糧

試驗(yàn)雞為1日齡廣西麻雞1 600只，隨機(jī)分為2組，每組2個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)400只，試驗(yàn)期120 d。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧；試驗(yàn)組飼喂基礎(chǔ)飼糧+松針提取物300mg·kg-1，飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

表1 飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平

1.3 試驗(yàn)地點(diǎn)和時(shí)間

試驗(yàn)期為2014年2月19日～6月16日，全期為120 d。試驗(yàn)地點(diǎn)為廣西南寧市富鳳農(nóng)牧有限公司叮當(dāng)育種中心。

1.4 飼養(yǎng)管理

所有試驗(yàn)雞全程人工投料，自由采食和飲水；常規(guī)免疫接種；專(zhuān)人負(fù)責(zé)管理，每天專(zhuān)人收集試驗(yàn)雞的采食量、雞群的糞便、呼吸道情況、精神狀態(tài)等相關(guān)數(shù)據(jù)和資料。

1.5 測(cè)定方法

1.5.1 血液抗氧化指標(biāo)測(cè)定

血清中谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px）、過(guò)超氧化物歧化酶（SOD）的活性，總抗氧化能力（TAOC）和丙二醛（MDA）含量均用PowerWave XS型全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀比色法測(cè)定，按試劑盒所提供的方法進(jìn)行測(cè)定。

1.5.2 血液免疫指標(biāo)測(cè)定

免疫球蛋白A（IgA）、血清免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM）、補(bǔ)體C3和補(bǔ)體C4的含量測(cè)定使用RX DAYTONA全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定，按照廠家提供的試劑配制和操作步驟按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.5.3 血清生化指標(biāo)的測(cè)定

在試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，各重復(fù)組隨機(jī)抽取試驗(yàn)蛋雞30只，翅靜脈采集血樣，使用離心機(jī)分離血清（3 000 rpm·min-1，10min），分裝入凍存管中于-20℃保存，測(cè)定各項(xiàng)血液指標(biāo)前于4℃冰箱中自然化凍。鈣、磷和膽固醇含量的測(cè)定均用廠家提供的試劑盒配置和操作步驟按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.6 統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)結(jié)果采用SPSS 10.0軟件OneWay ANOVA進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，并進(jìn)行Duncan's多重比較，結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示。

2 試驗(yàn)結(jié)果

2.1 對(duì)抗氧化能力的影響

對(duì)抗氧化能力的影響見(jiàn)表2。

表2 對(duì)抗氧化能力的影響

由表2可知，與對(duì)照組相比，血清中GSH-Px、SOD和T-AOC分別比對(duì)照組顯著提高57.01μmol·L-1、28.78U·mL-1和3.98U·mL-1（P＜0.05）；MDA含量顯著下降7.73（P＜0.05），說(shuō)明松針提取物能夠顯著提高雞群的抗氧化能力。

2.2 對(duì)免疫功能的影響

對(duì)免疫功能的影響見(jiàn)表3。

由表3可知，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組免疫球蛋白A（IgA）活性提高0.082 g·L-1（P＜0.05）、免疫球蛋白G（IgG）的活性提高0.114 g·L-1（P＜0.05）、免疫球蛋白M（IgM）提高0.082 g·L-1（P＜0.05）、補(bǔ)體C3提高0.35 g·L-1（P＜0.05）、補(bǔ)體C4的活性則提高0.044 g·L-1（P＜0.05）。說(shuō)明本試驗(yàn)方案能顯著提高廣西麻雞免疫功能。

表3 對(duì)免疫功能的影響g·L-1

2.3 對(duì)血清生化指標(biāo)的影響

對(duì)血清生化指標(biāo)的影響見(jiàn)表4。

表4 對(duì)血清生化指標(biāo)的影響mmol·L-1

由表4可知，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組雞群的血清中鈣、磷含量分別提高0.81和1.17mmol·L-1（P＜0.05）；膽固醇含量則比對(duì)照組下降0.64mmol·L-1（P＜0.05），說(shuō)明本試驗(yàn)方案能顯著提高廣西麻雞的血清生化指標(biāo)。

3 討 論

3.1 對(duì)廣西麻雞血清抗氧化能力的影響

松針含有豐富的黃酮類(lèi)化合物，Kwak等通過(guò)研究表明，松針黃酮有清除氧自由基的作用[6]。李慶明等對(duì)4種松針春季老葉和嫩葉水提物的還原力和抗氧化能力進(jìn)行了測(cè)定，原料經(jīng)研磨、用蒸餾水浸提和離心得到水提液，還原力的測(cè)定以BHT為對(duì)照，抗氧化能力的測(cè)定采用DPPH#、羥自由基（OH#）、超氧根陰離子自由基（O-2#）3種方法，經(jīng)直線回歸分析和計(jì)算IC50值，結(jié)果表明4種松針老葉都有較高的還原力和抗氧化能力，且對(duì)上述幾種自由基清除率存在顯著的劑量效應(yīng)關(guān)系，說(shuō)明松針在抗氧化方面有巨大的開(kāi)發(fā)潛力[7]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，松針能顯著提高廣西麻雞血清中的GSH-Px、SOD含量，提高T-AOD能力，顯著降低MDA含量，本試驗(yàn)結(jié)果與上述學(xué)者結(jié)果一致。

3.2 對(duì)廣西麻雞免疫功能的影響

陳長(zhǎng)武等通過(guò)利用白鼠為試驗(yàn)動(dòng)物，觀察白鼠的存活時(shí)間，連續(xù)游泳時(shí)間，并做免疫器官重量試驗(yàn)表明，松針能夠提高小鼠SOD活性，降低老年鼠血清過(guò)氧化脂質(zhì)（LPO）含量，這表明松針具有抗衰老作用，進(jìn)而提升白鼠免疫功能[8]。曾明等以小鼠為試驗(yàn)動(dòng)物研究松針對(duì)小鼠抗疲勞的影響，結(jié)果表明，松針能夠試驗(yàn)小鼠的SOD和乳酸脫氫酶（LDH）的活性、血紅蛋白（Hb）的含量顯著升高，這表明松針有顯著的抗疲勞作用，提高免疫功能的作用與本試驗(yàn)結(jié)論一致[9]。梁衛(wèi)花研究表明，添加松針提取物飼料添加劑能增加免疫器官指數(shù)，促進(jìn)巨噬細(xì)胞的吞噬功能，提高淋巴細(xì)胞（增殖）轉(zhuǎn)化率，對(duì)肉雞的體液免疫和細(xì)胞免疫有明顯促進(jìn)作用[10]。

3.3 對(duì)廣西麻雞血清生化指標(biāo)的影響

鄭曉珂等研究表明，大鼠去卵巢15周后血清總膽固醇（TC）、血清甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）均升高，松針提取物有降低TC、TG、LDL-C的作用，但對(duì)高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）無(wú)影響[11]。王春梅等研究表明，松針提取物200、400、800mg·kg-1對(duì)正常小鼠的血糖水平無(wú)明顯影響，但均可降低由腎上腺素和四氧嘧啶引起的高血糖小鼠的血糖，且呈現(xiàn)良好的劑量依賴(lài)性[12]。說(shuō)明松針具有抗應(yīng)激、降低膽固醇、降血糖和抑菌等作用。鈣、磷是影響蛋品質(zhì)的重要因子，應(yīng)激會(huì)干擾蛋雞體內(nèi)的鈣磷代謝，造成血清中鈣、磷含量下降，從而影響蛋雞產(chǎn)蛋性能和蛋品質(zhì)。膽固醇是類(lèi)固醇激素合成的前體，應(yīng)激能夠刺激腎上腺素加強(qiáng)，從而增強(qiáng)對(duì)膽固醇需求。本試驗(yàn)結(jié)果表明，松針提取物能顯著提高血清中鈣磷含量，從而提高雞蛋品質(zhì)，降低膽固醇水平，因此可知本方案可顯著改善上述血清生化指標(biāo)。

4 結(jié)論

松針提取物作為飼料添加劑，能明顯提高廣西麻雞血清生化指標(biāo)，抗氧化能力和免疫能力。除松針外，糖萜素、微生態(tài)制劑在畜禽養(yǎng)殖應(yīng)用中也有不俗表現(xiàn)，這些研究成果也為畜禽的健康養(yǎng)殖提供了思路[12-14]。

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