肝癌衍生生長(zhǎng)因子在胃腺癌組織中的表達(dá)及意義

李惠芬，馬桂芳，宋祥和

（鹽城衛(wèi)生職業(yè)技術(shù)學(xué)院，江蘇 鹽城 224001）

·論著·

肝癌衍生生長(zhǎng)因子在胃腺癌組織中的表達(dá)及意義

李惠芬，馬桂芳，宋祥和

（鹽城衛(wèi)生職業(yè)技術(shù)學(xué)院，江蘇 鹽城 224001）

目的探討肝癌衍生生長(zhǎng)因子（HDGF）在胃腺癌發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移中的作用。方法運(yùn)用免疫組織化學(xué)S-P方法檢測(cè)32例正常胃上皮組織、60例胃腺癌組織中HDGF的表達(dá)，同時(shí)檢測(cè)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）在胃腺癌組織中的表達(dá)。采用χ2檢驗(yàn)比較HGDF在兩種組織中的表達(dá)，分析HDGF表達(dá)與胃腺癌臨床病理學(xué)因素和VEGF的關(guān)系。結(jié)果胃腺癌組織中HDGF的陽(yáng)性表達(dá)率為68.3%，正常胃上皮組織中HDGF的陽(yáng)性表達(dá)率為25.0%，兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=15.752，P<0.01）；HDGF表達(dá)與胃腺癌組織的浸潤(rùn)程度（χ2=6.459，P=0.011）和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)（χ2=5.844，P=0.016）；HDGF與VEGF表達(dá)呈正相關(guān)。結(jié)論HDGF在胃腺癌組織中的表達(dá)顯著高于在正常胃上皮組織中的表達(dá)，與胃腺癌浸潤(rùn)程度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，與VEGF表達(dá)呈正相關(guān)，提示HDGF在胃腺癌的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移中具有重要作用。

胃腺癌；HDGF；VEGF

在我國(guó)，胃癌的死亡率居常見惡性腫瘤之首[1]，而胃腺癌是胃癌最常見的一種，發(fā)生率占胃癌的95%[2]，死亡率占胃癌的14%，居各類癌癥死亡率首位[3]。Nakamura等于1994年從人肝癌細(xì)胞系HuH-7培養(yǎng)液中成功分離出一種新的生長(zhǎng)因子并命名為肝癌衍生生長(zhǎng)因子(Hepatoma-derived growth factor，HDGF)，國(guó)內(nèi)外一系列研究結(jié)果顯示HDGF可能是一個(gè)普遍的腫瘤相關(guān)因子，在多種腫瘤組織如肝癌、非小細(xì)胞肺癌、結(jié)腸癌中高表達(dá)，研究認(rèn)為HDGF具有促進(jìn)細(xì)胞增殖和組織分化的作用，進(jìn)而促進(jìn)新生血管形成，與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展以及轉(zhuǎn)移等密切相關(guān)[4-5]。然而目前對(duì)于HDGF的研究仍處于初級(jí)階段，本研究擬通過(guò)分析HDGF在胃腺癌組織和正常胃上皮組織中的表達(dá)、胃腺癌組織中HDGF表達(dá)與臨床病理學(xué)特征的關(guān)系、胃腺癌組織中HDGF和VEGF表達(dá)的關(guān)系來(lái)探討HDGF在胃腺癌發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移中的作用。

1 資料與方法

1.1 一般資料收集2012年3月至2013年9月鹽城市第一人民醫(yī)院病理科胃腺癌標(biāo)本60例，所有標(biāo)本均為手術(shù)切除，術(shù)前未經(jīng)放療、化療，取同期正常胃上皮組織標(biāo)本32例作為對(duì)照，并獲取患者的年齡、性別、臨床病理學(xué)相關(guān)指標(biāo)。60例胃腺癌標(biāo)本中男性41例，年齡39～78歲，女性19例，年齡41～77歲，其中未侵入漿膜24例，侵入漿膜36例；29例伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。

1.2 試劑(1)兔抗HDGF：稀釋度1:100，北京博奧森生物技術(shù)有限公司產(chǎn)品；(2)鼠抗HDGF：稀釋度1:1000，福州邁新生物技術(shù)公司產(chǎn)品；(3)SP免疫組化試劑盒，福州邁新生物技術(shù)公司；(4)PBS磷酸鹽緩沖液，福州邁新生物技術(shù)公司；(5)DAB顯色液，福州邁新生物技術(shù)公司。

1.3 方法采用免疫組化S-P法。步驟如下：石蠟切片60°溫箱烘烤5 min；二甲苯脫蠟2次，每次10 min，梯度酒精脫水；PSB沖洗3次，每次3 min；內(nèi)源性過(guò)氧化酶阻斷10 min；高壓組織抗原修復(fù)；滴加一抗，4℃孵育過(guò)夜；二抗室溫孵育45 min；鏈霉菌抗生物素蛋白過(guò)氧化物酶室溫孵育45 min；DAB顯色5～10 min；蘇木素復(fù)染；脫水、透明、封固后光鏡下觀察。

1.4 結(jié)果判定采用雙盲法由兩名病理科醫(yī)生判讀。參閱相關(guān)文獻(xiàn)[6]，若胞核內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒，為HDGF表達(dá)陽(yáng)性染色，高倍鏡下(×400)觀察，每一張均切片隨機(jī)選擇50個(gè)視野，每個(gè)視野下讀取200個(gè)細(xì)胞，將≥90%的腫瘤細(xì)胞的胞漿和胞核染色均強(qiáng)于或等于血管內(nèi)皮細(xì)胞則判斷為陽(yáng)性表達(dá)，否則為陰性表達(dá)。參閱相關(guān)文獻(xiàn)[7]，若胞漿內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒，為VEGF表達(dá)陽(yáng)性染色，高倍鏡下(×400)觀察，每一張切片均隨機(jī)選擇5個(gè)視野，每個(gè)視野下讀取200個(gè)細(xì)胞，陽(yáng)性細(xì)胞占比高于25%為陽(yáng)性表達(dá)，否則為陰性表達(dá)。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS13.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析，采用χ2檢驗(yàn)分析HDGF在兩種組織中表達(dá)的比較、HDGF與胃腺癌臨床病理學(xué)特征的關(guān)系、胃腺癌組織中HDGF與VEGF表達(dá)的關(guān)系，均以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 胃腺癌組織和正常胃上皮組織中HDGF的表達(dá)60例胃腺癌組織中，HDGF陽(yáng)性表達(dá)41例，陰性表達(dá)19例，陽(yáng)性表達(dá)率為68.3%，而32例正常胃上皮組織中陽(yáng)性表達(dá)8例，陰性表達(dá)24例，陽(yáng)性表達(dá)率為25.0%，兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=15.752，P<0.01)。

2.2 胃腺癌組織中HDGF表達(dá)與臨床病理學(xué)因素的關(guān)系胃腺癌組織中，HDGF表達(dá)與浸潤(rùn)程度(χ2= 6.459，P=0.011)和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)(χ2=5.844，P= 0.016)，浸潤(rùn)程度越高HDGF陽(yáng)性表達(dá)率越高，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者HDGF陽(yáng)性表達(dá)率高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者，而與性別、年齡、腫瘤部位及分化程度均無(wú)關(guān)(P> 0.05)，見表1。

表1 胃腺癌組織HDGF表達(dá)與臨床病理學(xué)因素的關(guān)系(例)

2.3胃腺癌組織中HDGF與VEGF表達(dá)的關(guān)系HDGF陽(yáng)性表達(dá)的41例中，有33例VEGF為陽(yáng)性表達(dá)(χ2=11.130，P<0.01)，列聯(lián)系數(shù)C=0.396，HDGF與VEGF表達(dá)呈正相關(guān)。

3 討論

HDGF表達(dá)在胃腺癌的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移中有重要作用。Hu等[8]研究比較HDGF在肝癌組織與臨近正常肝組織中的表達(dá)，結(jié)果顯示HDGF在肝癌組織中的表達(dá)水平明顯高于正常肝組織。本研究以60例胃腺癌組織為研究組，32例正常胃上皮組織為對(duì)照組，采用免疫組化技術(shù)檢測(cè)兩種組織中HDGF的表達(dá)情況，結(jié)果顯示研究組的陽(yáng)性表達(dá)為41例，陽(yáng)性表達(dá)率為68.3%，顯著高于對(duì)照組陽(yáng)性表達(dá)為8例，陽(yáng)性表達(dá)率為25.0%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=15.752，P<0.01)，表明HDGF表達(dá)在胃腺癌的發(fā)生中可能有重要作用。有學(xué)者研究317例胃癌組織中HDGF的表達(dá)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)HDGF的表達(dá)與胃癌的腫瘤大小、浸潤(rùn)程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及無(wú)瘤生存期密切相關(guān)[9]。本研究對(duì)胃腺癌組織中HDGF的表達(dá)與臨床病理學(xué)特征的關(guān)系行卡方檢驗(yàn)，結(jié)果顯示，HDGF表達(dá)與浸潤(rùn)程度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，而與性別、年齡、腫瘤部位及分化程度無(wú)關(guān)，表明HDGF表達(dá)在胃腺癌的發(fā)展、轉(zhuǎn)移中有可能有重要作用。

研究表明VEGF主要通過(guò)刺激內(nèi)皮細(xì)胞增殖和增加血管通透性的方式，在腫瘤的病理性血管發(fā)生和腫瘤的發(fā)展、轉(zhuǎn)移中起著重要作用[10]。Everett等[11]的研究結(jié)果顯示HDGF可能是通過(guò)誘導(dǎo)VEGF促進(jìn)腫瘤血管的生成，進(jìn)而促進(jìn)腫瘤的生長(zhǎng)，增加轉(zhuǎn)移的風(fēng)險(xiǎn)。目前已有研究顯示，HDGF與VEGF的表達(dá)在一些惡性腫瘤組織中呈正相關(guān)[5，12]。本研究結(jié)果顯示，在胃腺癌組織中HDGF與VEGF的表達(dá)呈正相關(guān)，在HDGF陽(yáng)性表達(dá)的41例中有33例出現(xiàn)了VEGF的陽(yáng)性表達(dá)，與文獻(xiàn)報(bào)道一致，提示HDGF通過(guò)誘導(dǎo)VEGF生成的方式可能是其影響胃腺癌發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移的機(jī)制之一，但具體的機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。

綜上所述，HDGF在胃腺癌組織中的表達(dá)顯著高于在正常胃上皮組織中的表達(dá)，與胃腺癌浸潤(rùn)程度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，與VEGF表達(dá)呈正相關(guān)，提示HDGF在胃腺癌的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移中具有重要作用。

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Expression and significance of hepatoma-derived growth factor in gastric adenocarcinoma.

LI Hui-fen,MA Gui-fang,SONG Xiang-he.Yancheng Institute of Health Sciences,Yancheng 224001,Jiangsu,CHINA

ObjectiveTo explore the effect of on occurence,development,and metastasis of gastric adenocarcinoma.MethodsBased on immunohistochemical S-P method,the expression of HDGF in gastric adenocarcinoma tissues of 60 cases and normal gastric epithelial tissues of 32 cases were detected,as with vascular endothelial growth factor(VEGF)in gastric adenocarcinoma tissues.Compared the expression of HDGF in both tissues and analyzed the relationship between HDGF and clinical pathology,VEGF.ResultsThe positive rate of HDGF in gastric adenocarcinoma tissues was 68.3%,significantly higher than 25.0%in normal gastric epithelial tissues(χ2=15.752,P<0.01).The expression of HDGF was significantly correlated to immersion degree(χ2=6.459,P=0.011)and lymph node metastasis (χ2=5.844,P=0.016).HDGF was positively correlated to VEGF.ConclusionHDGF in gastric adenocarcinoma tissues was greater than normal gastric epithelial tissues,as well as it was closely correlated to immersion degree,lymphnode metastasis and VEGF.HDGF may have great effect on occurence,development,and metastasis of gastric adenocarcinoma.

Gastric adenocarcinoma;Hepatoma-derived growth factor(HDGF);Vascular endothelial growth factor(VEGF)

R735

A

1003—6350（2014）07—0953—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2014.07.0370

2013-10-11)

李惠芬。E-mail：437835649@qq.com