棘孢木霉菌天Q1對(duì)幾種植物病原菌拮抗作用研究

摘要：本研究采用對(duì)峙培養(yǎng)的方法，研究了棘孢木霉菌天Q1對(duì)稻瘟病菌、尖孢鐮刀菌、立枯絲核菌及核盤(pán)菌等9種植物病原菌生長(zhǎng)的抑制作用。結(jié)果表明：棘孢木霉菌天Q1對(duì)不同病原菌都具有較好的抑制作用。對(duì)赤霉菌的抑制效率最高，為59.09%，其次是串珠菌，對(duì)核盤(pán)菌的抑制率較低；棘孢木霉菌天Q1產(chǎn)生的非揮發(fā)性物質(zhì)和揮發(fā)性物質(zhì)的抑菌實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，其產(chǎn)生的非揮發(fā)性物質(zhì)對(duì)9種病原菌都具有一定的抑制效果，但是揮發(fā)性物質(zhì)沒(méi)有明顯的抑制作用。

關(guān)鍵詞：大棘孢木霉菌天Q1；對(duì)峙；拮抗活性

中圖分類(lèi)號(hào)：S482 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼： A 文章編號(hào)： 1674-0432（2014）-16-19-1

隨著生態(tài)農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展重要思想的提出，生物防治受到了人們?cè)絹?lái)越多的關(guān)注。在農(nóng)作物病蟲(chóng)害防治技術(shù)中生物防治是一門(mén)傳統(tǒng)應(yīng)用科學(xué)，因具備對(duì)環(huán)境友好，人、畜、作物安全，應(yīng)用價(jià)值高等諸多優(yōu)點(diǎn)而受到世界各地政府和科學(xué)界關(guān)注。用來(lái)防治作物病害的真菌主要有木霉菌、鐮刀菌、青霉菌等，其中木霉菌是應(yīng)用最多的一種。木霉菌屬于半知菌類(lèi)絲孢綱叢梗孢目叢梗孢科，廣泛存在于土壤、植物殘?bào)w、植物根圍、植物葉片及種子、球莖表面及動(dòng)物糞便上。通過(guò)對(duì)木霉菌對(duì)不同病原菌拮抗作用的測(cè)定，可為開(kāi)發(fā)木霉生物防治產(chǎn)品提供科學(xué)依據(jù)，為農(nóng)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展奠定堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)的同時(shí)也豐富了木霉菌種類(lèi)資源，這是木霉研究中亟待完善的一項(xiàng)基礎(chǔ)工作。

1 材料與方法

1.1 材料

P天A培養(yǎng)基：馬鈴薯200克，葡萄糖20克，瓊脂15～18克，水1000毫升。

CA 培養(yǎng)基：胡蘿卜200克，瓊脂18克，水1000毫升。

1.2 方法

1.2.1 對(duì)峙培養(yǎng) 從活化2天的病原菌菌落邊緣打取菌餅（直徑5毫米），將其置于P天A平板一側(cè)，28℃培養(yǎng)24小時(shí)后，將同樣大小的木霉菌餅置于病原菌的對(duì)側(cè)。每菌株重復(fù)8次，以只接種病原菌的平板作對(duì)照。對(duì)峙平板于28℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3天，測(cè)量病原菌的菌落半徑，并計(jì)算抑制率。抑菌率=（對(duì)照菌落半徑-處理菌落半徑）/對(duì)照菌落半徑×100%。

1.2.2 非揮發(fā)性產(chǎn)物對(duì)病原菌的抑制作用 在直徑9厘米的P天A平板上平鋪滅過(guò)菌的圓形玻璃紙（直徑9.2厘米），將活化2天的木霉菌（直徑5毫米）置于平板玻璃紙中央，28℃恒溫培養(yǎng)。1天后去除玻璃紙，在平板中央接入病原菌菌餅（直徑5 毫米）。以只接種病原菌的處理為對(duì)照。恒溫培養(yǎng)3天，測(cè)量病原菌菌落半徑，并計(jì)算抑制率。

1.2.3 揮發(fā)性產(chǎn)物對(duì)病原菌的抑制作用 在活化2天的木霉菌菌落邊緣打取直徑5毫米的菌餅，接種于P天A平板中央，黑暗條件下28℃恒溫培養(yǎng)至菌落半徑約5厘米。此時(shí)，棄去平板上的菌餅，在平板上方蓋直徑為9厘米的單層無(wú)菌玻璃紙，然后對(duì)扣1個(gè)大小相等、且接種有直徑5毫米的病原菌菌餅的平板，病原菌菌餅與上方玻璃紙之間的空間供木霉菌揮發(fā)性物質(zhì)與病原菌互作，封口膜密封后，將平板置于黑暗條件下28℃恒溫培養(yǎng)。以未接種供試木霉菌株的P天A平板和接種病原菌的平板對(duì)扣處理作為對(duì)照，每處理重復(fù)8次，3天后測(cè)量病原菌菌落半徑并計(jì)算抑制率。

2 結(jié)果與分析

2.1 對(duì)峙培養(yǎng)

對(duì)峙試驗(yàn)結(jié)果表明，天Q1對(duì)不同病菌的拮抗效果有明顯差異（見(jiàn)圖1）。對(duì)赤霉菌的抑制效果最高，為59.09%；其次是串珠菌，為57.14%；對(duì)紋枯菌、早疫菌、灰霉菌和茄腐菌的抑制效果也較好，分別為55.17%，51.51%，53.85%，52.78%；對(duì)立枯菌和核盤(pán)菌的抑制效果較低，分別為42.86%和40%；對(duì)稻瘟菌的抑制率最低，為38.89%。

2.2 非揮發(fā)性產(chǎn)物對(duì)病原菌的抑制作用

由圖2可以看出，天Q1對(duì)立枯菌的抑制效果最好，對(duì)病原菌的抑制率為77.78%；對(duì)紋枯菌也表現(xiàn)出較好的抑制作用，抑制率為73.33%；對(duì)灰霉菌、茄腐菌和早疫菌的抑制效果一般，分別為35.56%、24.44%和21.12%；對(duì)核盤(pán)菌、串珠菌和赤霉菌的抑制效果較弱，分別為18.18%、13.33%和15.56%；對(duì)稻瘟菌的抑制效果最弱，為5.4%。

2.3 揮發(fā)性產(chǎn)物對(duì)病原菌的抑制作用

通過(guò)實(shí)驗(yàn)測(cè)得結(jié)果顯示，天Q1的揮發(fā)性產(chǎn)物對(duì)立枯菌的抑制效果較明顯，為37.23%；對(duì)赤霉菌、灰霉菌、核盤(pán)菌和串珠菌的抑制效果一般，分別為5.73%、1.43%、6.22%和5.43%；對(duì)紋枯菌、早疫菌、稻瘟菌和茄腐菌的抑制效果不明顯，分別為0.02%、0.15%、0.01%和0.12%。

3 結(jié)語(yǔ)

本研究結(jié)果顯示，天Q1對(duì)9種病原菌都有抑制效果，對(duì)赤霉病菌的抑制效果最好；對(duì)紋枯病菌、串珠病菌和立枯病菌抑制效果較好；對(duì)茄腐病菌、灰霉病菌和早疫病菌也有較好的抑制效果。其中天Q1的非揮發(fā)性產(chǎn)物抑制作用較明顯，而揮發(fā)性產(chǎn)物沒(méi)有表現(xiàn)出明顯的抑制效果。由于木霉菌極高的生防應(yīng)用價(jià)值，因此對(duì)局部地域的優(yōu)勢(shì)木霉菌的篩選就顯得尤為重要，從而可以充分開(kāi)發(fā)優(yōu)勢(shì)種，生產(chǎn)木霉菌制劑，大面積推廣使用用于防治農(nóng)作物的病害。這對(duì)減少化學(xué)農(nóng)藥的使用，大力發(fā)展綠色農(nóng)業(yè)，提高食品安全性等工作具有非凡的意義。

作者簡(jiǎn)介：侯巨梅，碩士，黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)，研究方向：應(yīng)用微生物及生物防治。