微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制與管理

彭雄 徐暉

【關(guān)鍵詞】微生物實(shí)驗(yàn)室；質(zhì)量控制

doi：10.3969/j.issn.1004-7484（s）.2014.01.620文章編號(hào)：1004-7484（2014）-01-0515-01

微生物實(shí)驗(yàn)室是疾病預(yù)防控制與院感控制中一個(gè)非常重要的技術(shù)支持部門，主要承擔(dān)著各種突發(fā)公共衛(wèi)生事業(yè)的應(yīng)急檢驗(yàn)工作、傳染病監(jiān)測(cè)工作、醫(yī)療機(jī)構(gòu)和托幼機(jī)構(gòu)消毒效果監(jiān)測(cè)檢驗(yàn)工作等。在微生物學(xué)檢測(cè)過(guò)程中，大多數(shù)檢驗(yàn)工作內(nèi)容為定性試驗(yàn)，工作方式為手工操作，結(jié)果的觀察是依靠主觀判斷，所以有時(shí)就會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。為了保證結(jié)果的準(zhǔn)確、可靠和可重復(fù)性，在工作當(dāng)中我們必須開(kāi)展實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量控制。做好室內(nèi)質(zhì)量控制直接關(guān)系到日常的檢測(cè)質(zhì)量，是結(jié)果可靠的基礎(chǔ)和核心，室內(nèi)質(zhì)量控制包括對(duì)環(huán)境設(shè)施、培養(yǎng)基、試劑、儀器、實(shí)驗(yàn)過(guò)程和實(shí)驗(yàn)人員的監(jiān)控。

1微生物室內(nèi)質(zhì)量控制

1.1檢驗(yàn)技術(shù)人員的質(zhì)量控制從事微生物的技術(shù)人員必須經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的基礎(chǔ)知識(shí)學(xué)習(xí)和專業(yè)化的實(shí)驗(yàn)技能培訓(xùn)，經(jīng)考核合格后持證上崗[1]；技術(shù)人員還需要培養(yǎng)高度的責(zé)任感和嚴(yán)謹(jǐn)求實(shí)的工作態(tài)度及參加各類短、長(zhǎng)期培訓(xùn)班，到設(shè)備先進(jìn)業(yè)務(wù)水平高的實(shí)驗(yàn)室進(jìn)修學(xué)習(xí)、參加學(xué)術(shù)交流會(huì)、專題討論會(huì)等，以提高技術(shù)水平；并通過(guò)閱讀專業(yè)期刊和書(shū)籍，掌握新技術(shù)和新知識(shí)，應(yīng)用到實(shí)際工作中去。

1.2操作手冊(cè)微生物實(shí)驗(yàn)室必須要有根據(jù)本實(shí)驗(yàn)室條件而編寫的標(biāo)準(zhǔn)操作手冊(cè)并定期組織專業(yè)人員進(jìn)行修改和補(bǔ)充，用于指導(dǎo)實(shí)驗(yàn)室日常工作，使實(shí)驗(yàn)操作不因人員的變動(dòng)而有所改變。主要包括以下內(nèi)容：各級(jí)人員的職責(zé)和權(quán)限、實(shí)驗(yàn)室生物安全措施、實(shí)驗(yàn)室可開(kāi)展的項(xiàng)目、培養(yǎng)基和試劑的配制方法、菌（毒）種管理、質(zhì)量控制方案、環(huán)境設(shè)施監(jiān)控要求、廢棄物處理；配備細(xì)菌學(xué)參書(shū)籍和有權(quán)威性的專業(yè)雜志。

1.3標(biāo)準(zhǔn)菌（毒）株標(biāo)準(zhǔn)菌株的來(lái)源必須從認(rèn)可的菌種或標(biāo)本收集途經(jīng)獲得，必須來(lái)自權(quán)威機(jī)構(gòu)或認(rèn)可部門，如我國(guó)的衛(wèi)生部藥品生物鑒定所菌種保藏中心等。對(duì)于標(biāo)準(zhǔn)菌（毒）株的選擇，在試驗(yàn)過(guò)程中，無(wú)論是定性試驗(yàn)，還是定量試驗(yàn)，質(zhì)控系統(tǒng)必須有足夠的靈敏度檢測(cè)出試驗(yàn)中出現(xiàn)的誤差，因而質(zhì)量的監(jiān)測(cè)點(diǎn)就得設(shè)在一個(gè)敏感的位置。這個(gè)敏感點(diǎn)，對(duì)定性試驗(yàn)，應(yīng)在較弱陽(yáng)性范圍內(nèi)；對(duì)于定性試驗(yàn)，則應(yīng)位于解釋試驗(yàn)結(jié)果的決定水平附近。標(biāo)準(zhǔn)菌（毒）株由專人管理，并在文件中規(guī)定其職責(zé)，非管理者不能隨意獲得。

1.4質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)

1.4.1培養(yǎng)基的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)通常以細(xì)菌能否在培養(yǎng)基中生長(zhǎng)或形成典型菌落來(lái)衡量。培養(yǎng)基要求細(xì)菌不但能生長(zhǎng)，而且還要求發(fā)育好并表現(xiàn)出典型的菌落特征。配制的培養(yǎng)基一般質(zhì)量要求為：①培養(yǎng)基應(yīng)有明確的標(biāo)記與配制日期，液體培養(yǎng)基應(yīng)澄清、透明，含導(dǎo)管者，倒管中不得有氣泡且導(dǎo)管內(nèi)充滿液體；固體培養(yǎng)基必須保持適當(dāng)?shù)挠捕?，在接種前應(yīng)為無(wú)菌。②不定期檢查PH值，要求在規(guī)定的PH值±0.2內(nèi)，有指標(biāo)劑的培養(yǎng)基應(yīng)保持其應(yīng)有的顏色。③傾注瓊脂平板的體積一般為15ml，斜面不超過(guò)試管的2/3。④無(wú)菌分裝的培養(yǎng)基應(yīng)在培養(yǎng)箱（36℃）過(guò)夜，無(wú)菌生長(zhǎng)才能使用，高壓滅菌培養(yǎng)基應(yīng)隨機(jī)抽取5%-10%作無(wú)菌試驗(yàn)。⑤培養(yǎng)基應(yīng)放在適當(dāng)溫度下保存。⑥培養(yǎng)基必須在有效期內(nèi)使用，使用時(shí)觀察是否變質(zhì)。記錄所有的結(jié)果。商品化的培養(yǎng)基質(zhì)量控制由廠家負(fù)責(zé)。

1.4.2試劑和染色液的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)試劑和染色液必須注明配制或購(gòu)買日期；按要求貯存并在有效期內(nèi)使用；對(duì)穩(wěn)定性差的試劑，試驗(yàn)時(shí)必須同時(shí)進(jìn)行陽(yáng)性和陰性對(duì)照試驗(yàn)，并記錄結(jié)果。

1.4.3抗血清的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)抗血清的來(lái)源必須可靠，并按制造商的使用說(shuō)明使用和保存。使用前觀察抗血清是否澄清，定期用標(biāo)準(zhǔn)菌株進(jìn)行監(jiān)控，并記錄結(jié)果，注意抗血清的有效期和效價(jià)。

1.5儀器設(shè)備的監(jiān)控高壓滅菌器和干熱滅菌器的監(jiān)測(cè)時(shí)如果是大容量滅菌器，則在其不同位置放置滅菌指示物，以全面評(píng)價(jià)滅菌性能。高壓滅菌器使用生物學(xué)方法和化學(xué)方法兩種方法監(jiān)測(cè)其滅菌效果[2]并記錄結(jié)果；培養(yǎng)箱、冰箱、水浴箱的監(jiān)測(cè)，每天開(kāi)始工作前和結(jié)束工作后都要記錄溫度，如不符合要求則應(yīng)進(jìn)行調(diào)整，隔水式培養(yǎng)箱和水浴箱，則要定期進(jìn)行加水，冰箱則需定期進(jìn)行除霜；二氧化碳培養(yǎng)箱的監(jiān)測(cè)，每天觀察記錄二氧化碳培養(yǎng)箱的溫度，其溫度要求在36℃，濃度要求在5%-10%，必要時(shí)調(diào)整其溫度，測(cè)試其二氧化碳的濃度；生物安全柜的監(jiān)測(cè)，生物安全柜的過(guò)濾網(wǎng)更換由專業(yè)技術(shù)人員進(jìn)行更換，紫外線燈每3個(gè)月檢查一次消毒性能。對(duì)檢測(cè)結(jié)果有重大影響的儀器設(shè)備，在檢定期間內(nèi)還要進(jìn)行期間核查。

1.6環(huán)境設(shè)施的監(jiān)控實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境應(yīng)滿足檢測(cè)要求，不能影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性、可靠性和有效性，此外還應(yīng)有利于工作人員自身的安全和儀器的維護(hù)。對(duì)檢測(cè)結(jié)果有重大的影響的環(huán)境，必須對(duì)其環(huán)境條件實(shí)施監(jiān)控并記錄加以控制。微生物實(shí)驗(yàn)室主要分為無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室、凈化實(shí)驗(yàn)室、生物安全實(shí)驗(yàn)室等。對(duì)有不同要求的區(qū)域加以明確的標(biāo)識(shí)并能有效的控制，防止病原體的擴(kuò)散。涉及生物安全的檢測(cè)區(qū)域按照相關(guān)規(guī)定或要求配置相關(guān)的生物安全設(shè)施，如生物安全柜、無(wú)排放高壓滅菌器等，必須有妥善處理廢棄樣品和有害廢棄物的設(shè)施和制度，無(wú)菌室內(nèi)必須配備紫外線消毒裝置，定期進(jìn)行紫外線消毒及空氣質(zhì)量監(jiān)測(cè)；凈化實(shí)驗(yàn)室在使用之前先送風(fēng)再進(jìn)行紫外線消毒，工作結(jié)束后再進(jìn)行消毒。工作人員在進(jìn)入凈化實(shí)驗(yàn)室之前，必須更換隔離服。使用生物安全實(shí)驗(yàn)室的目的就是為了防止檢測(cè)人員的職業(yè)暴露。

1.7實(shí)驗(yàn)過(guò)程的質(zhì)量控制影響過(guò)程輸出的因素很多，除了以上上6點(diǎn)以外還包括樣品的采集（分析前質(zhì)量控制）、原始記錄及報(bào)告（分析后質(zhì)量控制）等。采集的樣本必須有代表性，保證無(wú)菌采樣，同時(shí)記錄采樣時(shí)的環(huán)境狀況；采集的樣品必須以正確的方式運(yùn)送到實(shí)驗(yàn)室；實(shí)驗(yàn)室內(nèi)樣品必須具備唯一性標(biāo)識(shí)及樣品的儲(chǔ)存和處置應(yīng)有明確規(guī)定，以滿足樣品復(fù)檢。實(shí)驗(yàn)室采取多種形式進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)量控制包括空白試驗(yàn)、行雙樣、人員比對(duì)、樣品復(fù)檢、目擊試驗(yàn)等。室內(nèi)質(zhì)量控制是產(chǎn)生精確和可靠結(jié)果的基礎(chǔ)和核心。

2室間質(zhì)量控制

室間質(zhì)量控制是由實(shí)驗(yàn)室以外的機(jī)構(gòu)或組織對(duì)其已達(dá)到的質(zhì)量水準(zhǔn)進(jìn)行的評(píng)價(jià)，是上級(jí)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行質(zhì)量管理的手段。室間質(zhì)量控制是使實(shí)驗(yàn)室從質(zhì)控過(guò)程中發(fā)現(xiàn)問(wèn)題，制定措施，不斷改進(jìn)檢驗(yàn)技術(shù)水平。室內(nèi)質(zhì)量控制只能了解實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性好壞，而不能了解實(shí)驗(yàn)的偏差或系統(tǒng)誤差，室間質(zhì)量控制能糾正實(shí)驗(yàn)室存在的系統(tǒng)誤差直至減小或消除實(shí)驗(yàn)室間的誤差，可對(duì)實(shí)驗(yàn)室技術(shù)水平進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)，有利于實(shí)驗(yàn)室技術(shù)水平的提高。

3討論

實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制是一項(xiàng)十分艱巨的工作，特別是對(duì)于疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)微生物實(shí)驗(yàn)室來(lái)說(shuō)，由于其主要從事的是產(chǎn)品、公共場(chǎng)所等樣品的衛(wèi)生指標(biāo)菌檢驗(yàn)和傳染病監(jiān)測(cè)及突發(fā)公共衛(wèi)生事件中相關(guān)病原微生物的檢驗(yàn)工作，所出具的實(shí)驗(yàn)結(jié)果是衛(wèi)生行政執(zhí)法、突發(fā)公共衛(wèi)生事件有效應(yīng)對(duì)的重要技術(shù)支持和依據(jù)，具有一定的法律效力，因而疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)微生物實(shí)驗(yàn)室必須不斷加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量控制工作，確保實(shí)驗(yàn)室結(jié)果及時(shí)準(zhǔn)確和公證，才能確保有關(guān)衛(wèi)生行政執(zhí)法能夠順利實(shí)施和確保突發(fā)公共衛(wèi)生事件的有效應(yīng)對(duì)。

參考文獻(xiàn)

[1]國(guó)家認(rèn)證認(rèn)可監(jiān)督委員會(huì).實(shí)驗(yàn)室資質(zhì)認(rèn)定評(píng)審準(zhǔn)則宣貫教材[M].第2版.北京：中國(guó)計(jì)量出版社，2007.1.

[2]史玲.細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)的室內(nèi)質(zhì)量控制[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2007，17（4）：722.