慢性牙周炎與口腔幽門螺桿菌的關(guān)聯(lián)性分析

朱柯　付深利　陳業(yè)

摘要：目的 探討慢性牙周炎患者與其口腔中的幽門螺桿菌（helicobacter pylori，HP）的相關(guān)性。方法 將我院收治的80例患者，分為觀察組和對照組，觀察組41例牙周炎患者，對照組39例同期健康人，采集受試對象的牙菌斑和含漱液標(biāo)本，運用二氧化硅微粒法提取DNA并進(jìn)行PCR 擴(kuò)增，電泳及銀染色，檢測Hp 陽性率，比較兩組的檢測結(jié)果及牙周炎組不同程度炎癥之間的Hp 陽性率比較。結(jié)果 觀察組中HP陽性35例，陽性率85.37%，對照組中陽性18例，陽性率46.15%，兩組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；不同類型牙周炎患者中，輕度牙周炎患者低于中、重度型牙周炎患者（P<0.05）。結(jié)論 HP參與了慢性牙周炎的致病過程，抑或是加強(qiáng)了其它因素的致病過程，HP 與牙周炎有相關(guān)性。

關(guān)鍵詞：牙周炎；幽門螺桿菌；相關(guān)性

慢性牙周炎是口腔科最常見的慢性疾病，其病因十分復(fù)雜，牙菌斑是最重要的致病因素。Hp是一種革蘭陰性微需氧菌，是消化道潰瘍的重要致病因子。近年來研究顯示，在胃炎患者的牙菌斑、唾液和牙周袋中HP有較高的檢出率[1]而口腔牙菌斑是HP的第二個重要貯存地[2]。牙周病變有可能增加HP感染，而后者的增加會導(dǎo)致慢性胃炎、胃潰瘍及胃癌發(fā)生，本文旨在觀察牙周病與HP的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1一般資料 將我院收治的80例患者，分為觀察組和對照組兩組。觀察組41例（男24例，女17例），年齡22～62歲，平均（42.4±18.7）歲，其中輕度13例，中度19，重度9例。健康組39例（男21例，女18例），年齡21～65歲，平均（44.2±16.7）歲。入選標(biāo)準(zhǔn)： <12個月未接受牙周治療；全口牙≥24顆；3個月內(nèi)未服用抗生素；無上消化道主訴癥狀，無胃腸疾病史及其他全身系統(tǒng)性疾病。兩組的性別、年齡等無明顯差異（P>0.05），具有可比性。

1.2 方法 牙菌斑和含漱液標(biāo)本采集： 要求所有患者至少>12h未作任何口腔清潔及護(hù)理工作。每例取4個象限的第一磨牙頰側(cè)近中位點（第一磨牙缺失記錄第二磨牙）的齦溝內(nèi)菌斑及含漱液。檢測并記錄患者取樣牙的探診深度（PD）、出血指數(shù)（BI）、菌斑指數(shù)（PLI）。所有患者的臨床檢查與標(biāo)本的取樣均由同一位口腔臨床醫(yī)師操作。牙菌斑的采集：消毒棉卷隔濕、消毒三用槍吹干后，用消毒牙簽取齦上牙菌斑混合放置于1.5砌的無菌Ep管（內(nèi)事先放有0. 9%的生理鹽水）中，做標(biāo)記與記錄，80℃保存，待提取DNA。含漱液的收集： 讓患者口含0.9%生理鹽水，含漱20s，用5mlEp管收集4ml含漱液，做標(biāo)記與記錄，80℃保存，待提取DNA。

檢測方法：采用二氧化硅微粒法提取DNA。將凍存標(biāo)本自液氮中取出后立即放在冰上，加標(biāo)本體積3倍的結(jié)合液A及10/A玻璃奶，置于55℃恒溫器上5min并每分鐘搖動1次，以促進(jìn)DNA和玻璃奶的結(jié)合。然后用離心機(jī)10000rpm離心20s，棄上清，再加入洗滌液0.5ml，用震蕩器使玻璃奶重懸。如此重復(fù)洗滌共3次，短暫離心后吸盡洗滌液，放在55℃恒溫器上至完全干燥。再加入TE緩沖液30ml，混勻后在55℃恒溫器上放置2min，12000rpm離心3min，小心吸出上清，4℃保存。然后進(jìn)行PCR擴(kuò)增，引物根據(jù)尿素酶C基因和CagA基因進(jìn)行設(shè)計。最后進(jìn)行聚丙烯酰胺凝膠電泳，凝膠中的DNA片段用銀染方法顯色。

1.3統(tǒng)計學(xué)方法 所有所得數(shù)據(jù)錄入統(tǒng)計學(xué)分析軟件SPSS17.0進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析與處理。計數(shù)資料均采用χ2檢驗，檢驗水準(zhǔn)為a=0.05，P<0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

觀察組中，牙齦上菌斑檢測陽性28例，含漱液檢測陽性18例，總陽性35例，陽性率85.37%；對照組中，牙齦上菌斑檢測陽性14例，含漱液檢測陽性7例，總陽性18例，陽性率46.15，兩組陽性率比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），見表1。

輕度牙周炎患者HP陽性檢出率為38.46%，中度牙周炎78.95%，重度牙周炎77.78%；輕度牙周炎患者HP陽性檢出率明顯低于中度和重度牙周炎患者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），中度牙周炎患者和重度牙周炎患者陽性檢出率無明顯差異（P>0.05），見表2。

牙周病是目前人類最常見的口腔疾病之一，在世界范圍內(nèi)均有較高的患病率。慢性牙周炎也叫成人牙周炎或慢性成人牙周炎，此類牙周炎最常見于成年人，其主要癥狀是牙周袋形成、牙齦炎癥、牙周附著喪失、牙槽骨吸收，是導(dǎo)致老年人牙齒喪失的主要原因。近年來相繼有文章報道自口腔中檢測到Hp，但對其來源及作用觀點不一。有學(xué)者認(rèn)為，Hp寄居于口腔內(nèi)，是健康人口腔中的常駐菌群；但也有學(xué)者認(rèn)為，牙菌斑和唾液不是HP永久的寄居地，HP無規(guī)律地分布在口腔不同的生態(tài)龕中，它的獲取是間歇性的，與胃食管返流有關(guān)，而且口腔中的厭氧環(huán)境不利于HP的生長[3]。

本組研究結(jié)果顯示，39例健康人中僅有18例檢測出Hp，占牙周健康組患者的46.15%，支持Hp可能不是健康人口腔中的常駐菌群的觀點。而且輕度牙周炎患者HP陽性檢出率明顯低于中度和重度牙周炎患者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），中度牙周炎患者和重度牙周炎患者陽性檢出率無明顯差異（P>0.05），說明Hp的陽性率與牙周炎的輕重程度密切相關(guān)，二者呈正相關(guān)。

綜上所述， HP可能與牙石、食物嵌塞等局部因素和全身因素共同作用引起牙周病，同時牙周病患者可能易感染系統(tǒng)性疾病，是消化道疾病的危險因素。因此，作為口腔科醫(yī)生不應(yīng)僅局限于牙周病的治療還應(yīng)著眼于全身系統(tǒng)性疾病的預(yù)防和治療，阻斷HP在消化道疾病及牙周病反復(fù)發(fā)作中的橋梁作用。

參考文獻(xiàn)：

[1]Gebara EC， Pannuti C， Faria CM， et al. Prevalence of chain reaction in the oral cavity of periodontitis patients [J].Oral Microbiol Immuno，2004，19（4）.

[2]高靜，李毅，王慶才.慢性胃病患者口腔與胃內(nèi)幽門螺桿菌的研究[J].臨床口腔醫(yī)學(xué)雜志，2006，22（9）：524-525.

[3]Asikainen S， Chen C， Slots J. Absence of helicobacter in determined by polymerase chain reaction[J].Oral Microbiol Immunol，1994，9：318-320.

編輯/劉小燕