飼料微生物檢測和血清抗體監(jiān)測的應用

孔春梅

在畜禽養(yǎng)殖過程中，有的養(yǎng)殖戶在飼料管理方面往往只注意飼料的營養(yǎng)價值，而忽視飼料微生物污染；在疫苗免疫上，機械地執(zhí)行免疫程序，盲目免疫，認為只要打了疫苗就能防病，而忽視抗體監(jiān)測。其實，飼料微生物污染檢測和抗體監(jiān)測在養(yǎng)殖生產中舉足輕重，值得推廣和應用。

1飼料中微生物檢測

1.1飼料中微生物污染的危害

飼料中富含各種氨基酸、礦物質、維生素等，且比例合理、營養(yǎng)價值全面是培養(yǎng)微生物的良好培養(yǎng)基。飼料在生產、加工、運輸、銷售、存儲等過程中容易受到微生物的污染，發(fā)生霉變，而在生產實踐中，很多被污染的飼料通常不會有外觀、氣味的變化，很容易被忽視。被污染的飼料造成飼料的營養(yǎng)價值降低、適口性變差，當被動物食用后，會引起動物發(fā)病、機體抗病率下降、生長緩慢，并能將病菌通過糞便、尿等排泄物污染土壤和水源。因此，應控制微生物對飼料的污染， 加強飼料微生物的檢測， 確保飼料的安全。

1.2 飼料中病原微生物檢測內容

飼料中微生物檢測內容包括細菌總數、大腸桿菌群、沙門氏菌、霉菌檢測。

飼料中的細菌總數是指試樣經過處理，稀釋至適當濃度，在一定條件（用特定的培養(yǎng)基，在溫度30℃±1℃培養(yǎng)72h±3h等）下培養(yǎng)后，所得1g（mL）試樣中所含細菌總數。細菌總數能反映飼料被細菌污染的程度和飼料在生產過程中的衛(wèi)生管理狀況，并可推斷飼料是否耐貯存。

飼料中大腸菌群數是指將試樣稀釋至適當濃度，用乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基，36℃±1℃下培養(yǎng)24h±2h，根據確診試驗為大腸菌群陽性的管數，查出每100g（mL） 試樣中大腸菌群的最大可能數（MPN）。大腸菌群數量的高低主要用來推測該飼料中存在腸道致病菌污染的可能性。

飼料中沙門氏菌是指根據沙門氏菌的生理特性，選擇有利于沙門氏菌增值而大多數細菌受到抑制的培養(yǎng)基，進行選擇性增菌、選擇性平板分離，以為求檢出飼料中的沙門氏菌。飼料安全衛(wèi)生標準中一般對沙門氏菌都做出“不得檢出”的規(guī)定，以確保飼料的衛(wèi)生安全。沙門氏菌對畜禽健康危害極大，會引起畜禽發(fā)生傷寒和副傷寒、急性胃腸炎等疾病。

飼料中霉菌是根據霉菌的生理特性，選擇適宜于霉菌生長而不適于細菌生長的培養(yǎng)基，采用平皿計數法，測定霉菌數。霉菌是危害飼料安全的主要微生物類群[1]。其在自然環(huán)境中容易生長，且很多霉菌毒性極強，嚴重影響畜禽健康生長；有的霉菌不產生毒素，但即使不產毒素的霉菌生長也會造成飼料營養(yǎng)價值降低、適口性下降。很多養(yǎng)殖業(yè)主只有肉眼看見霉變，才認為是霉變，其實有的霉變肉眼不一定能見到。

2血清抗體監(jiān)測

2.1血清抗體監(jiān)測的作用

2.1.1評價免疫效果、制定免疫程序

在養(yǎng)殖生產實踐中，有些養(yǎng)殖戶機械地效仿其它場的免疫程序，盲目免疫，而忽視抗體監(jiān)測工作。認為只要做了免疫接種工作，就萬事大吉。其實，免疫效果受幼畜（禽）母源抗體和成年畜（禽）抗體水平高低、免疫時間、免疫方法、疫苗種類、免疫次數和當地疫病流行情況等因素的影響。良好免疫效果的獲得依賴于首次免疫和再次免疫時機是否合適；幼畜（禽）母源抗體水平決定首次免疫的時間；上一次免疫畜禽體內的殘留抗體水平決定再次免疫時間。因此，每個養(yǎng)殖場都要以本場所測的實際抗體水平為依據， 確定免疫時間，并結合當地的實際， 制定適合本場的免疫程序。在每次接種疫苗后，抽樣檢測免疫效果，看免疫是否成功，及時進行補免或重免工作，調整改進免疫程序，達到防疫滅病的目的。

2.1.2輔助診斷動物疫病

抗體監(jiān)測可作為診斷動物疫病的一個重要依據。其作為診斷時必須與臨床癥狀、病理變化、流行病學等各種資料進行綜合分析。

2.2 血清抗體監(jiān)測方法

目前實驗室常用的抗體監(jiān)測方法主要是血凝-血凝抑制試驗（HA- HI）、正向間接血凝試驗（IHA）、平板凝集試驗和ELISA 等。其中，HA- HI 試驗（β- 微量法）最常用。

2.3監(jiān)測結果分析

在評價監(jiān)測結果時，根據抗體效價的高低、均勻度、畜禽免疫狀況、臨床癥狀、病理變化、流行病學等進行綜合分析， 以對各個群體的健康狀況、免疫的成功狀況， 或是對疾病診斷提供依據。

2.3.1抗體低于保護值

若進行過免疫接種， 則表示免疫不成功或是上次免疫接種的保護期就要過了，應進行補免；若未進行過免疫接種，說明未被野毒感染， 則根據季節(jié)、周邊流行情況決定是否進行免疫接種及免疫接種的方式。

2.3.2抗體高于保護值（ 屬正常范圍）

進行過免疫接種， 則表示接種成功且在保護期內， 注意監(jiān)測， 避免出現空白期； 若未進行過免疫接種， 則表示在過去的一段時間曾出現過野毒感染，提醒是否對其進行淘汰或是補免。

2.3.3抗體水平大大高于保護值

若進行過免疫接種， 看接種的時間與抽樣檢測時的間隔， 若時間不是很長（ 如7 d至1個月以內），且均勻度高， 臨床無任何可見病變， 則可判斷是疫苗的免疫性極佳；若注射疫苗的時間較長，且豬群曾出現過可見臨床癥狀， 抗體水平參差不齊，說明曾發(fā)生過野毒感染。

2.3.4 整齊度及均勻度

血清中抗體水平的整齊度是評價免疫狀況的一個重要指標， 在看其抗體水平的同時， 應關注其均勻度。均勻度高則可根據上述標準來判斷， 若均勻度低則應考慮免疫是否失敗或是否存在野毒感染。

3小結

3.1現階段仍有的飼料工廠加工方法簡單或缺乏有效的管理，飼料生物安全問題依然存在。這要求養(yǎng)殖戶選擇質量好信譽好廠家的飼料，把好飼料質量關；在注重飼料營養(yǎng)價值的同時，抽樣送檢飼料或飼料原料中微生物檢測，能有效避免一些由飼料污染引起的疾病。

3.2 養(yǎng)殖場應建立疫苗免疫抗體監(jiān)測制度，定期或不定期進行抗體監(jiān)測，檢查免疫效果，并為養(yǎng)殖生產制定免疫程序提供依據，反過來也能檢驗現有免疫程序是否合理，有效避免在防疫活動中盲目性，為安全養(yǎng)殖最大限度地提供保障。

3.3現階段絕大部分養(yǎng)殖場并不具有獸醫(yī)化驗室，不能開展檢測工作。這要求養(yǎng)殖業(yè)主具有保健意識，積極主動抽樣送檢。

（編輯：何芳）