劍麻種質(zhì)資源斑馬紋病抗性鑒定及評價

趙艷龍等

摘 要 通過大田鑒定與室內(nèi)鑒定相結(jié)合的方法，對18份劍麻種質(zhì)資源的抗病性進行了測定評價。結(jié)果表明：H.11648、K1、K3屬于高感種質(zhì)；普通劍麻、粵西114、東109、東5、東74、東16、南亞2和灰葉劍麻為中感種質(zhì)；K2在大田鑒定為高感，而在室內(nèi)鑒定為中感；廣西76416、銀邊假菠蘿麻為中抗種質(zhì)；馬蓋麻為高抗種質(zhì)；南亞1號大田鑒定為高抗種質(zhì)，而室內(nèi)鑒定為免疫種質(zhì)；無刺番麻和番麻為免疫種質(zhì)。

關(guān)鍵詞 劍麻；斑馬紋??；抗性鑒定；評價

中圖分類號 S563.8 文獻標識碼 A

Identification and Evaluation of Resistance to

Zebra Disease of Sisal Germplazm

ZHAO Yanlong，ZHOU Wenzhao*，LU Junying，ZHANG Yanmei，

YANG Yumei，HE Yanbiao，CHANG Jinmei LI Guoping

South Subtropical Crops Research Institute， Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences

/Key Laboratory of Hainan Province for Postharvest Physiology and Preservation of Tropical

Horticultural Products，Zhanjiang，Guangdong 524091，China

Abstract The resistance to zebra disease of 18 sisal germplasms were identified and evaluated by inoculation with Phytophthora nicotianae in the greenhouse and field. The results showed that H.11648， K1 and K3 were highly susceptible to P. Nicotianae； Agave sisal， YueXi114， Dong109， Dong5， Dong74， Dong16， Nanya2 and Agave fourcroydes were moderately susceptible to P. Nicotianae； K2 was highly susceptible in the field， while was moderately susceptible in the greenhouse. Guangxi76416 and A. angustifolia var. marginata Frel. had a moderate resistance to P. nicotianae； A. cantala Roxb. had a high resistance， A. americana L. and A. americana var. rmis were immune to P. nicotianae， Nanya1 had a high resistance in the greenhouse， while was immune to P. nicotianae in the field.

Key words Sisal；Zebra disease；Resistance identification；Resistance evaluation

doi 10.3969/j.issn.1000-2561.2014.04.005

劍麻是中國熱帶地區(qū)重要的經(jīng)濟作物，中國的劍麻單產(chǎn)是世界平均水平的4倍以上，居第1位。劍麻在促進熱區(qū)農(nóng)業(yè)結(jié)構(gòu)調(diào)整，增加農(nóng)民收入及促進出口創(chuàng)匯方面發(fā)揮著重要作用[1-2]。劍麻斑馬紋?。ˋgave zebra disease）是由煙草疫霉菌（Phytophthora nicotianae）引起的真菌病害，中國從20世紀60年代從東非引進優(yōu)良品種H.11648， 70年代初即在廣東東方紅農(nóng)場發(fā)生斑馬紋病并暴發(fā)流行，病區(qū)面積400多hm2，發(fā)病率達7%，經(jīng)濟損失100多萬元[3]，以后都有不同程度地發(fā)生于各個植麻區(qū)，嚴重影響劍麻的生產(chǎn)[4-8]，由于病菌的卵孢子或厚垣孢子可以在土壤中長期存活，一般的方法很難根除該病，所以抗病育種是防治劍麻斑馬紋病的重要途徑[9]，而種質(zhì)的抗病性鑒定是抗病育種的一項重要工作。對于劍麻斑馬紋病的抗性鑒定研究還鮮有報道，本文對斑馬紋病的抗性鑒定方法進行了研究，并對多個劍麻種質(zhì)的抗病性進行了測定評價，以促進劍麻抗病種質(zhì)的篩選，為劍麻的抗病育種奠定良好的基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料

植物材料：來自中國熱帶農(nóng)業(yè)科學院南亞熱帶作物研究所的劍麻種質(zhì)圃，供試種質(zhì)有18個，見表1。

病原菌：本試驗所用菌株采自廣東省農(nóng)墾方紅農(nóng)場農(nóng)科所劍麻園。以常規(guī)組織分離法從劍麻斑馬紋病病株分離病原物并純化。按柯赫氏法則驗證并鑒定確認為煙草疫霉菌后保存，選致病力強的菌株備用。

1.2 方法

1.2.1 不同劍麻種質(zhì)資源大田抗病性測定 選取H.11648、粵西114、南亞1號、K1、K2，每份種質(zhì)25株，各株葉片至少20片以上，大小一致，按隨機區(qū)組設(shè)計，于雨季來臨前的4月份種植于地勢低洼易積水的劍麻斑馬紋病重發(fā)區(qū)，重復(fù)3次。試驗地點為廣西東方農(nóng)場，2012年4月種植。

雨季過后，于當年10月，調(diào)查各種質(zhì)的發(fā)病情況（包括有無病斑及病情擴展程度），計算病情指數(shù)。病情分級標準參照行業(yè)標準《龍舌蘭麻抗病性鑒定技術(shù)規(guī)程》[10]： 0級-無?。?級-葉片有病斑；2級-葉片基部出現(xiàn)病斑；3級-莖腐或軸腐。

1.2.2 劍麻不同種質(zhì)室內(nèi)抗病性測定 接種方法：采用葉面針刺法接種。每株于不同方向選取種苗中下部的葉片3片，先用70%酒精棉球擦拭葉片表面進行消毒后，再用灼燒滅菌后冷涼的大頭針在距離葉基部10 cm處將葉片正面的表皮刺破，將菌餅的菌絲生長面貼在針刺的位置，用無菌濕棉花覆蓋菌餅保濕，48 h后除去棉花及菌餅，繼續(xù)在溫度為25～30 ℃，濕度80%以上的條件下培養(yǎng)。

2 結(jié)果與分析

2.1 劍麻不同種質(zhì)大田抗病性測定結(jié)果

從上述結(jié)果可見，有個別種質(zhì)的抗病性大田鑒定與室內(nèi)鑒定結(jié)果有一定差異，如K2大田鑒定為高感，而室內(nèi)鑒定為中感，南亞1號大田鑒定為高抗，室內(nèi)鑒定為免疫。但其相對抗病性強弱都是一致的

3 討論與結(jié)論

在抗病性鑒定研究中，大多采用大田鑒定與室內(nèi)鑒定相結(jié)合的方法，室內(nèi)鑒定采用致病力強的菌株才具有較好的篩選效果[11-12]。而室內(nèi)鑒定以活體接種最能反映其本身的抗病性，對于大量鑒定材料，也有采用離體接種進行室內(nèi)鑒定的報道[13]。本研究也是以致病力強的菌株接種，采用室內(nèi)活體接種與大田鑒定相結(jié)合的方法，對18份劍麻種質(zhì)的抗病性進行了鑒定與評價。

大田鑒定與室內(nèi)鑒定的結(jié)果基本相符，只有個別的結(jié)果不一致，如K2大田鑒定為高感，而室內(nèi)鑒定為中感，粵西114大田鑒定為中感，而室內(nèi)鑒定為中抗，南亞1號大田鑒定為高抗，室內(nèi)鑒定為免疫?？赡苁且驗榇筇锏沫h(huán)境如濕度更適合斑馬紋病的發(fā)生與擴展，所以表現(xiàn)得嚴重一些。另外，病原菌不同的生理小種或者致病力強弱不同的菌株接種，都可能引起實驗室鑒定結(jié)果的差異，本文中大田鑒定與室內(nèi)鑒定的結(jié)果不完全相同，可能與此有關(guān)，今后應(yīng)該采集不同劍麻生產(chǎn)區(qū)的病菌并以致病力強的菌株接種，可能鑒定結(jié)果更加準確?？傊?，鑒定抗病性，不但要根據(jù)病情指數(shù)，還要綜合考慮各方面的因素，如參鑒種質(zhì)是否一致、接種病原菌致病力強弱、溫濕度的控制以及大田鑒定與室內(nèi)鑒定相結(jié)合等等，并要通過多次重復(fù)的試驗才能得到準確的結(jié)論。

關(guān)于劍麻抗病性鑒定的報道[14-17]，只是做了定性評價，而陳河龍等[18]的報道中，鑒定結(jié)果與本研究有出入，如普通劍麻本文鑒定為中感，而前者鑒定為高感，這是因為二者的鑒定方法與標準不同造成的，因此，筆者建議，為避免造成混亂，對于劍麻斑馬紋病的抗病性鑒定，最好采用農(nóng)業(yè)行業(yè)標準中的方法[10]。

本研究運用前人的鑒定方法，首次對多種劍麻的抗病性進行了比較系統(tǒng)與科學的鑒定與評價，研究結(jié)果初步揭示了目前中國部分劍麻種質(zhì)的抗病特性，為下一步進行的劍麻抗病遺傳規(guī)律及分子育種研究打下了重要的基礎(chǔ)。另外，還有很多劍麻種質(zhì)的抗病性沒有被鑒定，有待進一步研究。

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