黃瓜與土壤中醚菌酯殘留的氣相分析方法研究

葛謙　茍春林等

摘要 [目的] 建立黃瓜和土壤中醚菌酯殘留檢測方法。[方法]用乙腈提取黃瓜和土壤樣品，經(jīng)弗羅里硅柱凈化后用氣相色譜ECD檢測器檢測。[結(jié)果] 在醚菌酯添加水平為0.05、0.20、0.50 mg/kg 3個(gè)濃度時(shí)， 黃瓜中回收率為80.2%～114.0%，變異系數(shù)為2.1%～5.8%；土壤中回收率為95.1%～106.5%，變異系數(shù)為3.1%～7.3%，醚菌酯的最小檢出量為2.5×10-2 ng，最低檢出濃度為2.5 μg/kg。[結(jié)論]該方法靈敏度高、檢測限低、重現(xiàn)性好，完全能夠滿足黃瓜和土壤中醚菌酯殘留的檢測要求。

關(guān)鍵詞 30%醚菌酯懸浮劑；黃瓜；土壤；殘留檢測

中圖分類號(hào) S481+.8 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼

A 文章編號(hào) 0517-6611（2014）20-06690-02

Determination of Kresoximmethyl Residues in Cucumber and Soil by Capillary Gas Chromatography

GE Qian， GOU Chunlin et al （Quality Standard and Technique Institute of Agricultural Products， Ningxia Academy of Agriculture and Forestry， Yinchuan， Ningxia 750002）

Abstract [Objective] The aim was to develop a method to determine kresoximmethyl residues in cucumber and soil. [Method] The cucumber and soil samples were extracted by acetonitrile， and then detected by capillarygas chromatography after florisilphase

extraction. [Result] Under the addition level of 0.05， 0.20， 0.50 mg/kg， the recovery rates of kresoximmethyl in cucumber and soil samples were 80.2%-114.0%， 95.1%-106.5% with RSD of 2.1%-5.8% and 3.1%-7.3% respectively. The LOQ and LOD were 2.5×10-2 ng and 2.5 μg/kg. [Conclusion] This method was sensitive with low detectable limitation and good precision， which could be perfectly adopted in determining the kresoximmethyl residues in cucumber and soil.

Key words 30% kresoximmethyl suspensions； Cucumber； Soil； Residue detection

醚菌酯[1-3]是一種高效、廣譜、新型殺菌劑。它對半知菌、子囊菌、擔(dān)子菌、卵菌綱等真菌引起的多種病害具有很好的活性，如葡萄白粉病、小麥銹病、馬鈴薯疫病、南瓜疫病、水稻稻瘟病等病害。醚菌酯不僅具有廣譜的殺菌活性，同時(shí)具有良好的保護(hù)和治療作用，與其他常用的殺菌劑無交互抗性，且比常規(guī)殺菌劑持效期長。其具有高度的選擇性，對作物、人畜及有益生物安全，對環(huán)境基本無污染。有關(guān)其殘留分析方法，常用的有氣相色譜法（GC）[4-7]、液相色譜法（LC）[8]、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法（GCMS）[9-10]、高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（HPLCMS/MS）[11]等?，F(xiàn)階段對黃瓜中醚菌酯殘留量檢測前處理主要以丙酮、二氯甲烷為主，其毒害性大，并且丙酮易揮發(fā)，從而影響檢測靈敏度。為此，筆者研究了醚菌酯在黃瓜和土壤中殘留分析的樣品前處理和氣相色譜檢測條件，以期為醚菌酯在黃瓜上合理使用和制定 《農(nóng)藥安全使用標(biāo)準(zhǔn)》 提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 儀器。

Agilent 6890N氣相色譜儀，配ECD檢測器，美國安捷倫公司生產(chǎn)；

T18basic型高速勻漿機(jī)，德國IKA公司生產(chǎn)； K600組織搗碎機(jī)，吉列布朗公司生產(chǎn)；MS3 digital漩渦混勻器，德國IKA公司生產(chǎn)；電子天平（精度0.01 g），梅特勒-托利多集團(tuán)生產(chǎn)；R15型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器，瑞士步琪公司生產(chǎn)；TD40L型離心機(jī)，上海安亭科學(xué)儀器廠生產(chǎn)；

DHG9240A型電熱鼓風(fēng)干燥箱，上海一恒科學(xué)儀器有限公司生產(chǎn)。

1.1.2 試劑。醚菌酯標(biāo)準(zhǔn)品：純度98.0%，由德國DR公司提供；乙腈：色譜純；石油醚：分析純；正己烷：色譜純；丙酮：色譜純；去離子水；氯化鈉：分析純，140 ℃烘烤4 h；無水硫酸鈉：分析純，550 ℃高溫干燥；弗羅里硅土（60～100目）：550 ℃活化，4%蒸餾水滅活；弗羅里硅柱：玻璃層析柱底部塞棉花，按1 cm無水硫酸鈉、3 cm弗羅里硅土、1 cm無水硫酸鈉分別裝入填料，備用。

1.2 方法

1.2.1 提取。

1.2.1.1 黃瓜樣品。

稱取10 g試樣（精確到0.01 g）于50 ml離心管中，加入20.0 ml乙腈，用均質(zhì)器以15 000 r/min勻漿提取1 min，加入5 g已烘烤的氯化鈉，搖勻，將離心管放入離心機(jī)，在3 000 r/min下離心5 min，取上清液10.0 ml于濃縮瓶中（相當(dāng)于5 g試樣量），待凈化。

1.2.1.2 土壤樣品。

稱取5 g試樣（精確到0.01 g）于50 ml離心管中，加入20.0 ml乙腈，室溫振蕩1 h，加入5 g干燥過的氯化鈉，搖勻，將離心管放入離心機(jī)，在3 000 r/min下離心5 min，取上清液10.0 ml于濃縮瓶中（相當(dāng)于2.5 g試樣量），待凈化。

1.2.2 凈化。將盛有上清液的濃縮瓶置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上，35 ℃水浴，蒸發(fā)近干，加入2.5 ml丙酮+石油醚（10+90）待凈化。將弗羅里硅柱用10 ml石油醚預(yù)淋洗，條件化，當(dāng)溶劑液面到達(dá)吸附層表面時(shí)，立即倒入上述待凈化溶液，用濃縮瓶接受洗脫液，用丙酮+石油醚（10+90）沖洗濃縮瓶后淋洗弗羅里硅柱，并重復(fù)1次。將盛有淋洗液的濃縮瓶置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上，在水浴溫度35 ℃條件下蒸發(fā)至干。用正己烷定容至5.0 ml，在旋渦混合器上混勻，待測。

1.2.3 儀器分析條件。色譜柱：DB35MS色譜柱（30 m×0.25 mm，0.25 μm）；模式：不分流；載氣：N2；加熱器：290 ℃；壓力：27.41 Psi；總流量：101 ml/min；流量：3.2 ml/min；平均線速度：59 cm/s；柱箱溫度：60～300 ℃；尾吹氣流量：N2，60 ml/min；進(jìn)樣量：1.0 μl。在上述條件下，醚菌酯保留時(shí)間約為10.6 min（圖1）。

圖1 0.5 mg/kg醚菌酯標(biāo)樣色譜

2 結(jié)果與分析

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線

將1.0 mg/ml醚菌酯標(biāo)準(zhǔn)溶液用正己烷稀釋配成0.02、0.05、0.10、0.20、1.00、2.00 mg/L系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，在“1.2.3”液相色譜條件下進(jìn)行測定，以醚菌酯標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度與峰面積作標(biāo)準(zhǔn)曲線。標(biāo)樣線性方程為：y=36 703x-255.95，相關(guān)系數(shù)（r）為0.999 8，其中y為醚菌酯峰面積，x為標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度（圖2）。

圖2 醚菌酯標(biāo)準(zhǔn)工作曲線

2.2 最低檢出量與最低檢出濃度

根據(jù)添加回收率試驗(yàn)，在“1.2.3”色譜條件下醚菌酯在黃瓜中的最低檢出量為2.5×10-3ng，最低檢出濃度為2.5 μg/kg，土壤中為2.4 μg/kg，保留時(shí)間約為10.6 min。

2.3 添加回收率與相對標(biāo)準(zhǔn)偏差

分別在空白黃瓜和土壤樣品中添加0.05、0.20、0.50 mg/kg 3個(gè)濃度的醚菌酯標(biāo)準(zhǔn)溶液，5次重復(fù)，按“1.2.3”色譜分析條件測定回收率。由表1可知，黃瓜中醚菌酯回收率為80.2%～114.0%，變異系數(shù)為2.1%～5.8%；土壤中回收率為95.1%～106.5%，變異系數(shù)為3.1%～7.3%，且黃瓜和土壤雜質(zhì)峰對醚菌酯的檢測無影響 （圖 3～ 4）， 說明該方法的準(zhǔn)確度和精確度均符合醚菌酯殘留檢測的要求。

3 結(jié)論

試驗(yàn)建立的黃瓜和土壤中醚菌酯殘留檢測方法，前處理簡便，檢測方法精密度和準(zhǔn)確度較好，線性范圍較寬，添加回收率高，不同水平的添加回收率波動(dòng)小，方法的檢出限低，可準(zhǔn)確、快速地檢測出黃瓜及土壤中醚菌酯的殘留量。

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