厚樸提取物的穩(wěn)定性研究

雷海軍等

摘要 [目的]考察厚樸酚、和厚樸酚在不同溶劑中的穩(wěn)定性。[方法]以溶液顏色、澄清度及有效成分含量為考察指標(biāo)，采用高效液相色譜法測定厚樸提取物中厚樸酚、和厚樸酚的含量，考察厚樸提取物在增溶劑水溶液、甘油、丙二醇、1，3-丁二醇、無水乙醇、甲醇、50%乙醇、95%乙醇8種溶劑中的穩(wěn)定性。[結(jié)果]厚樸提取物在1，3-丁二醇中最為穩(wěn)定，試驗(yàn)前后溶液顏色、澄清度及有效成分含量無顯著變化。[結(jié)論]以1，3-丁二醇為溶劑開發(fā)含厚樸提取物的相關(guān)產(chǎn)品，能有效提高產(chǎn)品的穩(wěn)定性和品質(zhì)。

關(guān)鍵詞 厚樸提取物；厚樸酚；和厚樸酚；穩(wěn)定性

中圖分類號(hào) S567；TS201 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼

A 文章編號(hào) 0517-6611（2014）20-06601-02

Study on the Stability of Magnolia Bark Extract

LEI Haijun，LUO Andong et al （Honsea Sunshine Biotech Co.，Ltd，Guangzhou，Guangdong 510530）

Abstract [Objective] The research aimed to study the stability of magnolol and honokiol in different solvents. [Method] The main assessment indexs were solution color，clarity and content of the active ingredients. The content of magnolol and honokiol in Magnolia bark extract were determined by HPLC to investigate their stability in different solvents.The solvents were solubilizer aqueous solution，Glycerin，Propylene glycol，1，3butanediol，dehydrated alcohol，Methanol，50 % and 95 % Ethanol. [Result] Magnolia bark extract solvated in 1，3Butanediol had the best stability and no significant difference in solution color，clarity and content of the active ingredients. [Conclusion]1，3butylene glycol as solvent related products to develop with magnolia bark extract，which can effectively improve the stability and quality of the product.

Key words Magnolia bark extract； Magnolol； Honokiol； Stability

厚樸為傳統(tǒng)中藥材，味苦、辛，性溫，歸脾、胃、大腸經(jīng)，具有行氣消積、燥濕除滿、降逆平喘之功效[1]?，F(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)，厚樸的主要有效成分為厚樸酚、和厚樸酚[2]，在抗菌消炎[3-5]、抗氧化[6]、抗腫瘤[7]、調(diào)理胃腸功能[8]、減肥[9]以及改善焦慮[10]等方面作用顯著。隨著厚樸提取物在醫(yī)藥、保健品、化妝品、口腔護(hù)理等領(lǐng)域應(yīng)用日益廣泛，其活性成分的穩(wěn)定性備受關(guān)注。筆者在含厚樸提取物產(chǎn)品的開發(fā)過程中，發(fā)現(xiàn)厚樸提取物溶液久置后顏色會(huì)變深，因而在此對厚樸有效成分在幾種不同溶劑體系中的穩(wěn)定性進(jìn)行研究，為其推廣應(yīng)用提供一定的依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

厚樸提取物（批號(hào)HS121001，公司自制）；辛普高效增溶劑（SMIP SF400，廣州辛普有限公司）；甲醇、無水乙醇、95%乙醇、丙二醇、甘油、1，3丁二醇均為分析純，購自廣州化學(xué)試劑廠；HPLC用甲醇為色譜純，水為重蒸水。

1.2 儀器與設(shè)備

PL203電子天平（梅特勒-托利多儀器有限公司）、超聲儀（深圳市和波達(dá)超聲設(shè)備有限公司）；Dionex U3000 高效液相色譜儀、Chromeleon 數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)，由美國戴安公司（DIONEX）生產(chǎn)；培養(yǎng)箱（型號(hào)GHX9080B1，上海?，攲?shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司）。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 穩(wěn)定性試驗(yàn)。

稱取已知含量的厚樸提取物0.25 g，8份，分別加入50 ml增溶劑水溶液（增溶劑∶水=9∶1，V/V）、甘油、丙二醇、1，3丁二醇、無水乙醇、甲醇、50%乙醇、95%乙醇8種溶劑，60 ℃水浴或常溫?cái)嚢枞芙?，配制成厚樸提取物含量? mg/ml的溶液。取樣，測定各溶液中厚樸酚、和厚樸酚的含量，然后將所有溶液置于37～40 ℃培養(yǎng)箱中，密封儲(chǔ)存。分別于第7、14、28、60、90天測定各溶液中厚樸酚、和厚樸酚的含量，比較其變化。

1.3.2 色譜條件。色譜柱為Promosil C18（4.6 mm×250 mm，5 μm），流動(dòng)性為甲醇∶水（74∶26，V/V），柱溫為35 ℃，流速為1.0 ml/min，檢測波長為λ=294 nm。在上述條件下，厚樸酚、和厚樸酚與樣品中其他組分的色譜峰達(dá)到基線分離，厚樸酚、和厚樸酚與其鄰近色譜峰的分離度>1.5。

1.3.3 對照品溶液制備。

取厚樸酚、和厚樸酚標(biāo)準(zhǔn)品適量，精密稱定，分別置于25 ml容量瓶中，加甲醇配制成濃度分別為5.12、5.07 mg/ml的對照品儲(chǔ)備液。然后精密量取厚樸酚、和厚樸酚對照品儲(chǔ)備液各3.0 ml，轉(zhuǎn)移至25 ml溶液瓶中，加甲醇定容至刻度，配制成每 ml含厚樸酚0.614 4、0.608 4 mg的混合對照品溶液，搖勻，濾過（微孔濾膜，0.45 μm），取續(xù)濾液，即得。

1.3.4 供試品溶液制備。

稱取“1.3.1”中增溶劑水溶液、甘油、丙三醇、1，3丁二醇4種穩(wěn)定性試驗(yàn)樣品2 g，精密稱定；精密量取“1.3.1”中無水乙醇、甲醇、50%乙醇、95%乙醇4種穩(wěn)定性試驗(yàn)樣品2.0 ml；以上8種溶液分別轉(zhuǎn)移至25 ml容量瓶中，加甲醇定容；搖勻，濾過（微孔濾膜，0.45 μm），取續(xù)濾液，即得。

2 結(jié)果與分析

2.1 厚樸提取液含量測定

分別于第0、7、14、28、60、90天按照“1.3.1”色譜條件測定8種溶液中厚樸酚、和厚樸酚的含量。由圖1可知，試驗(yàn)條件下，8種溶液中厚樸酚、和厚樸酚的含量有不同程度的變化，其中增溶劑水溶液中厚樸酚、和厚樸酚的降解程度較大，降解率分別達(dá)34.3%和35.6%；而其他溶液中降解率均小于1%。說明厚樸提取物活性成分在丙二醇、50%乙醇、無水乙醇、甲醇、95%乙醇、甘油、1，3丁

二醇中穩(wěn)定。

2.2 溶液顏色與澄清度 試驗(yàn)前，8種溶液均為無色、透明、澄清液體。3個(gè)月后觀察，8種溶液的顏色有不同程度的加深，顏色變化由深至淺依次為增溶劑水溶液>丙二醇>50%乙醇>無水乙醇>甲醇>95%乙醇>甘油>1，3丁二醇，其中1，3丁二醇和甘油溶液的顏色相對于試驗(yàn)前無明顯差異。8種溶液中，增溶劑水溶液、甘油、50%乙醇在試驗(yàn)3個(gè)月后出現(xiàn)渾濁，其他溶液仍為澄清狀。

3 小結(jié)與討論

（1）由于增溶劑水溶液、甘油、丙二醇、1，3丁二醇溶液的粘稠度較大，導(dǎo)致無法采用精密量取的方法給予定量。筆者采用重量法，精密稱定樣品，計(jì)算有效成分含量。

（2）厚樸提取物在1，3丁二醇中穩(wěn)定，試驗(yàn)前后溶液顏色、澄清度及有效成分含量無顯著變化，以1，3丁二醇為溶劑開發(fā)含厚樸提取物的相關(guān)產(chǎn)品，能有效提高產(chǎn)品的穩(wěn)定性和品質(zhì)。厚樸提取物溶液的顏色變化可能是由于活性成分的氧化聚合或重組導(dǎo)致，抑或是由雜質(zhì)成分發(fā)生化學(xué)反應(yīng)所致。

（3）8種溶液中，增溶劑水溶液、甘油、50%乙醇在試驗(yàn)3個(gè)月后出現(xiàn)渾濁，可能是由于3組溶劑的溶解性不夠所致。

參考文獻(xiàn)

[1]

呂雪斌，羅安東，胡家敏，等. 厚樸藥材研究進(jìn)展[J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，39（16）：9614-9615.

[2] 殷帥文，何旭梅，郎鋒祥，等. 厚樸化學(xué)成分和藥理作用研究概況[J]. 貴州農(nóng)業(yè)科學(xué)，2007，35（6）：133-135.

[3] HO K Y，TSAI C C，CHEN C P，et al. Antimicrobial Activity of Honokiol and Magnolol Isolated from Magnolia officinalis[J].Phytotherapy Rsearch，2001，15（2）：139-141.

[4] WANG J H，SHIH K S，LIOU J P，et al. Anti-Arthritic Effects of Magnolol in Human Interleukin 1β-Stimulated Fibroblast-Like Synoviocytes and in a Rat Arthritis Model[J]. Plos One，2012，7（2）：31368.

[5] MUNROE M E，BUSINGA T R，KLINE J N，et al. Anti-inflammatory effects of the neurotransmitter agonist Honokiol in a mouse model of allergic asthma[J]. The Journal of Immunology，2010，185（9）：5586-5597.

[6] 吳春，韓玲. 厚樸提取物對芝麻油的抗氧化活性研究[J]. 食品研究與開發(fā)，2004，25（2）：32-34.

[7] 劉麗. 和厚樸酚的抗腫瘤作用研究進(jìn)展[J].華西醫(yī)學(xué)，2006，21（3）：629-630.

[8] ZHANG W W，LI Y，WANG X Q，et al. Effects of magnolol and honokiol derived from traditional Chinese herbal remedies on gastrointestinal movement[J]. World J Gastroenterol，2005，11（28）：4414-4418.

[9] YANG J Y，DELLA-FERA M A，RAYALAM S，et al. Enhanced Effects of Xanthohumol Plus Honokiol on Apoptosis in 3T3-L1 Adipocytes [J]. Obesity （Silver Spring），2008，16（6）：1232-1238.

[10] AGOSTA C，ATLANTE M，BENVENUTI C. Randomized controlled study on clinical efficacy of isoflavones plus Lactobacillus sporogenes，associated or not with a natural anxiolytic agent in menopause[J]. Minerva Ginecologica，2011，63（1）：11.