乙肝病毒檢測技術(shù)分析

黃海萍

【摘 要】現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為，乙肝是嚴(yán)重威脅人體健康的一種世界性傳染病，其發(fā)病率和死亡率較高。乙肝病毒是導(dǎo)致患乙肝病癥的病毒，主要是通過血液、母嬰和性接觸進(jìn)行傳播現(xiàn)代醫(yī)療技術(shù)條件下，針對乙肝病毒進(jìn)行技術(shù)檢測是預(yù)防和控制乙肝病毒的重要途徑。

【關(guān)鍵詞】乙肝病毒肝炎、檢測技術(shù)

【中圖分類號(hào)】R81 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B 【文章編號(hào)】004-7484（2014）04-2571-01

近年來，由于人類生活環(huán)境的惡化，導(dǎo)致威脅人類健康的疾病呈多樣化趨勢。乙肝病毒性肝炎，作為嚴(yán)重侵害人類健康的傳染病，是由乙肝病毒引起的重要頑癥，危害性極大。隨著現(xiàn)代醫(yī)療技術(shù)的不斷進(jìn)步，針對乙肝病毒的實(shí)驗(yàn)室檢測方法發(fā)展較快，為乙型肝炎的診斷、治療和深入研究提供了重要依據(jù)。本文針對乙型肝炎疾病的病理特征，對乙型肝炎病毒的檢測技術(shù)進(jìn)行了分析。

1 乙型病毒性肝炎

乙型病毒性肝炎，又稱乙肝，是由乙肝病毒引起的，以肝臟炎癥性病變?yōu)橹鞯?，可引發(fā)人體多種器官功能損壞的一種傳言性疾病。本病主要通過血液、母嬰和性接觸等途徑傳播，主要侵犯兒童和青壯年人群，其癥狀表現(xiàn)為全身乏力，嘔心嘔吐，食欲減退、肝大厭油以及肝功能異常，部分病例伴有黃疸和發(fā)熱現(xiàn)象。少數(shù)病例病程發(fā)展為肝硬化和肝癌。

乙型病毒性肝炎的特點(diǎn)為發(fā)病遲緩，以慢性型肝炎較為常見，也有很多乙肝病毒攜帶者無明顯癥狀表現(xiàn)。乙肝沒有固定流行期，散發(fā)型發(fā)病率高，傳染性強(qiáng)，已成為嚴(yán)重威脅人類生命與健康的世界性傳染病。

乙肝病毒分析

乙肝病毒也叫乙型肝炎病毒，是指引起人類感染急性或慢性肝炎的病毒，它是一種專一的嗜肝性DNA病毒，其傳染性強(qiáng)，人體一旦感染上乙肝病毒，肝臟就會(huì)發(fā)生炎性病變，肝細(xì)胞受損，對人體造成極大地傷害。

乙肝病毒基因組長3.2kb，為部分雙鏈環(huán)狀DNA，完整的乙肝病毒體型呈顆粒狀，直徑為42納米，顆粒分為外殼和核心兩部分。乙肝病毒對外界的抵抗力較強(qiáng)，于37度下抗原性穩(wěn)定，但在高溫或高壓環(huán)境下均可殺滅。

2 乙肝病毒的檢測內(nèi)容

3 乙肝病毒DNA檢測是判斷乙肝病毒復(fù)制的常用手段。乙肝病毒的DNA為乙肝病毒的主要成分，具有傳染性和復(fù)制性。臨床上可操縱斑點(diǎn)雜交法和聚合酶鏈反應(yīng)法從被浸染者的血液中檢測到它。

傳統(tǒng)的乙肝病毒檢測包括“乙肝兩對半”和“肝功能”檢測，乙肝病毒DNA檢測可檢測血清中乙型肝炎病毒在體內(nèi)的含量，成為臨床調(diào)節(jié)療效剖斷的依據(jù)。

4 乙肝病毒的檢測技術(shù)

4.1 免疫學(xué)檢測技術(shù)：免疫學(xué)檢測技術(shù)主要是檢測乙肝病毒感染過程中產(chǎn)生的抗原抗體免疫標(biāo)記物。臨床上常用的免疫學(xué)檢測方法有如下方法：

4.1.1 免疫熒光法：免疫熒光法是利用化學(xué)方法使熒光素標(biāo)記抗體、抗原與組織細(xì)胞相應(yīng)抗原抗體結(jié)合，通過熒光素?zé)晒忸伾?qiáng)度大小進(jìn)行定位檢測抗原或抗體方法。近年來改進(jìn)的時(shí)間分辨熒光免疫分析法，靈敏度高、穩(wěn)定性好，結(jié)果準(zhǔn)確，成為乙肝免疫標(biāo)記物檢測的新技術(shù)。

4.1.2 免疫法：酶免疫法是以固相酶免疫法的酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)為主，將抗原抗體反應(yīng)的特異性與酶對底物的高效催化作用結(jié)合起來，根據(jù)酶作用底物后顯色，以顏色變化判斷結(jié)果，此技術(shù)無放射性污染，不需昂貴的測試儀器，推廣較快。

4.1.3 固相放射免疫法：固相放射免疫法是利用放射性同位素碘125和131作為標(biāo)記物，標(biāo)記抗原、抗體與相應(yīng)抗體、抗原結(jié)合，通過測定抗原抗體結(jié)合物的放射性活性判斷結(jié)果。此法靈敏度高、特異性強(qiáng)、精度高，可進(jìn)行超微量分析，臨床上可用于檢測抗原或抗體。

4.1.4 金標(biāo)免疫技術(shù)：又稱膠體金免疫層析測定法，是以膠體金作為標(biāo)記物，以硝酸纖維素膜為載體，利用微孔膜毛細(xì)管作用，使膜條測試端的標(biāo)本慢慢向另一端滲移，在移動(dòng)過程中發(fā)生抗原抗體結(jié)合反應(yīng)。具有簡便、快速、可單份操作的優(yōu)點(diǎn)，適用于急診檢驗(yàn)需要。

4.2 分子生物學(xué)檢測技術(shù)：乙肝病毒持續(xù)感染過程中往往會(huì)發(fā)生病毒變異情況，從基因水平上的HBV-DNA檢測，則更能準(zhǔn)確表明它的復(fù)制情況。

4.2.1 核酸探針法：乙型肝炎病毒的核酸探針有DNA探針和RNA探針兩種。是指核酸分子雜交基于其組成的的堿基可通過配對互補(bǔ)結(jié)合，帶有標(biāo)記物的DNA和RNA片段能與互補(bǔ)的核酸序列特異結(jié)合，核酸探針標(biāo)記可用放射性同位素、生物素、地高辛等物質(zhì)標(biāo)記。

4.2.2 基因芯片技術(shù)：基因芯片技術(shù)是將大量特定寡核苷酸或基因片段作為探針，有規(guī)律的高密度固定排列在硅片、玻片上，然后與待檢熒光標(biāo)樣品核酸根據(jù)堿基配對原則雜交，經(jīng)洗滌后檢測信號(hào)強(qiáng)度，由計(jì)算機(jī)分析處理相關(guān)數(shù)據(jù)，獲取生物信息。

4.2.3 PCR擴(kuò)增技術(shù)：PCR擴(kuò)增是一種體外基因擴(kuò)增技術(shù)，經(jīng)過變性-退火-延伸等循環(huán)處理合成DNA片段，經(jīng)電泳-溴化乙啶染色-紫外線燈下觀察結(jié)果。在傳統(tǒng)的PCR擴(kuò)增體系中加入雙熒光標(biāo)記寡核苷酸探針，通過熒光定量PCR儀檢測熒光強(qiáng)度，運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測HBV-DNA

5 結(jié)束語

總之，乙型病毒性肝炎是嚴(yán)重威脅現(xiàn)代人類生命和健康的疑難性傳染病癥，乙肝病毒是引發(fā)乙肝疾病的根源。現(xiàn)代醫(yī)療技術(shù)條件下，優(yōu)化技術(shù)資源，針對乙肝病毒進(jìn)行更有效的實(shí)驗(yàn)室監(jiān)測分析，對臨床診斷治療合理用藥和判斷預(yù)后具有重要意義。