高原鼠兔血清生化指標(biāo)測定

姚芳

摘要

[目的] 為今后高原鼠兔在低海拔地區(qū)的全面馴化奠定基礎(chǔ)。[方法] 選取高原鼠兔為研究對象，以SD大鼠為對照，對其血液生化指標(biāo)進(jìn)行測定和對比。[結(jié)果] 高原鼠兔的門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)氨酶、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)氨酶和堿性磷酸酶均明顯低于SD大鼠，且差異極顯著（P<0.01）；高原鼠兔尿素氮和甘油三酯含量明顯高于SD大鼠，差異極顯著（P<0.01）；高原鼠兔總蛋白和總膽固醇指標(biāo)與SD大鼠差異不顯著（P>0.01）。[結(jié)論] 這種差異的產(chǎn)生可能與高原鼠兔與SD大鼠的生活環(huán)境和生活方式不同有關(guān)。

關(guān)鍵詞 高原鼠兔；血清；生化指標(biāo)

中圖分類號 S829.1 文獻(xiàn)標(biāo)識碼 A 文章編號 0517-6611（2014）26-09059-02

Determination of Biochemical Indices in the Serum of Ochotona curzoniae Hodgson

YAO Fang

（Qinghai University， Xining， Qinghai 810016）

Abstract [Objective] The research aimed to lay the foundation for the acclimation of Ochotona curzoniae Hodgson in low-altitude regions in future. [Method] Taking O. curzoniae as the research object，with SD rats as control，their blood biochemical indices were determined and contrasted. [Result] Aspartate aminotransferase（AST）， alanine aminotransferase and alkaline phosphatase in O. curzoniae were extremely significantly lower than those in SD rats （P<0.01）. The contents of urea nitrogen and triglyceride in O. curzoniae were extremely significantly lower than those in SD rats （P<0.01）. The total protein and whole cholesterol in O. curzoniae had no significant difference with SD rats（P>0.01）. [Conclusion] The differences between O. curzoniae and SD rats were related to their different living environment and different way of life.

Key words Ochotona curzoniae Hodgson；Serum； Biochemical indices

高原鼠兔是兔形目（Lagomorpha）、鼠兔科（Ochotonidae）、鼠兔屬（Ochotona）動(dòng)物，具有成熟體重輕、繁殖率高、性成熟早等特點(diǎn)，是一種新開發(fā)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物^[1]。高原鼠兔是青藏高原特有的一種植食性小型哺乳動(dòng)物，主要棲息分布在青藏高原及與高原毗鄰的尼泊爾、錫金等國家與地區(qū)^[2]，適應(yīng)在海拔3 000～5 100 m的高寒草甸、高寒草原、草甸草原及高寒荒漠草原地帶。高原鼠兔是青藏高原主要的害鼠之一，體長10.5～28.5 cm，耳短小而圓。夏季上體毛呈暗沙黃褐色或棕黃色；上下唇及鼻部黑褐色；頸背具有明顯單色斑塊，下體毛色呈淡黃色或近乎白色；季略為淺淡。

在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)研究中，臨床血液生化指標(biāo)具有重要的參考價(jià)值，可為病理、毒理學(xué)及發(fā)病機(jī)理等研究選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物提供標(biāo)準(zhǔn)^[3]。鼠兔具有對毒品敏感、對嗎啡類藥物耐受性強(qiáng)和可自身免疫疾病等優(yōu)點(diǎn)，可在生理學(xué)、生殖生理和免疫學(xué)領(lǐng)域中成為具有中國特色的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物新品種。在生化標(biāo)記方面，譚萍萍等^[4]利用醋酸纖維膜電泳技術(shù)，以BALB/c、C56BL/6J、615、CBA純系小鼠和野外捕捉的達(dá)烏爾鼠兔為研究對象，對碳酸肝酶-2（Car-2）、脂酶-l （Es-l）、脂酶-2（Es-2）、脂酶-3（Es-3）、血紅蛋白-卜鏈（Hbb）以及轉(zhuǎn)鐵蛋白（Trf）6個(gè)指標(biāo)作了初步的遺傳圖譜，因材料有限，達(dá)鳥爾鼠兔在樣品收集中由于血液處理不當(dāng)，所以未作Es-1、Hbb、Trf和 Car-2指標(biāo)對照。從其他指標(biāo)來看，高原鼠兔在Es-1中的泳動(dòng)率比小鼠快，條帶粗。在Es-2中，高原鼠免較小鼠的泳動(dòng)率稍慢些，條帶數(shù)差不多，與達(dá)烏爾鼠兔無論是條帶的粗細(xì)還是條帶數(shù)都存在顯著差異。在Es-3上，高原鼠兔的泳動(dòng)率比小鼠慢，小鼠又較達(dá)烏爾鼠兔的泳動(dòng)率慢，帶數(shù)都相同。高原鼠兔在Hbb指標(biāo)中的泳動(dòng)率比小鼠要快，有1條清晰。在Car-2中沒出現(xiàn)條帶。Trf中表現(xiàn)為2條帶的泳動(dòng)率與小鼠存在明顯差異。從以上條帶出現(xiàn)的多少及泳動(dòng)率的獨(dú)特性可以看出高原鼠兔的遺傳本質(zhì)及其特性^[5-6]，為今后高原鼠兔在低海拔的全面馴化奠定了基礎(chǔ)。

研究表明，高原鼠兔的血壓與兔和豚鼠接近， 其心率和呼吸頻率較兔快，耗氧量高于兔、豚鼠和大鼠，而與小鼠接近；其血清白蛋白含量高于兔、大鼠、小鼠和人類，甘油三酯含量高于兔、豚鼠和人類，而血清膽固醇含量則低于兔、小鼠和人類^[7]。高原鼠兔心率較兔快，清蛋白質(zhì)總量及白蛋白含量均較高，而總膽固醇含量則較低，這似與其行動(dòng)敏捷、體質(zhì)健壯、肌肉發(fā)達(dá)的特征相一致。高原鼠兔為兔形目中個(gè)體較小的物種，其解剖學(xué)特征與家兔相似。由于其體型小、性情溫和、繁殖率高、性成熟早、所需飼料簡單，比家兔飼養(yǎng)更為經(jīng)濟(jì)，因此有望成為藥理學(xué)、免疫學(xué)、生殖生理學(xué)、畸形發(fā)生學(xué)、神經(jīng)生理學(xué)和高原低氧生理學(xué)等研究領(lǐng)域的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物^[8]。孫淑芬等^[9]研究表明高原鼠兔血清白蛋白的含量高于人、大鼠及家兔；血清膽固醇含量明顯低于人、大鼠及試驗(yàn)家兔。

高原鼠兔常年生活在高海拔高寒地區(qū)，對低氧的適應(yīng)性極強(qiáng)，對其研究已獲得一系列成果。近年來，低氧適應(yīng)分子機(jī)制是其研究熱點(diǎn)，但仍處于發(fā)展階段。我國高原遼闊，動(dòng)物資源豐富，但是目前對高原土生動(dòng)物的適應(yīng)機(jī)制的研究僅限于器官水平的研究。在細(xì)胞及分子水平上闡明低氧適應(yīng)的詳細(xì)機(jī)制將是對高原鼠兔研究的新進(jìn)展^[10]。筆者以青海省海晏縣甘子河地區(qū)高原鼠兔為研究對象，針對其血液生化指標(biāo)進(jìn)行測定，并以SD大鼠為參照，分析高原鼠兔血液生化適應(yīng)高原低氧環(huán)境的特點(diǎn)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與試劑

野生高原鼠兔捕捉于青海省海晏縣甘子河地區(qū)；SD大鼠，購自青海省地方病防治研究所。2組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物各30只。所有試劑均為國產(chǎn)分析純。

1.2 試驗(yàn)方法

眶后靜脈叢采血，于試驗(yàn)空腹12 h后采血，分離血清。門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)氨酶（Aspartate transaminase， AST）含量采用比色法測定；丙氨酸氨基轉(zhuǎn)氨酶（ALT）含量采用比色法測定；總蛋白（TP）含量采用雙縮脲法測定；甘油三酯（TG）含量采用異丙醇抽提乙酰丙酮顯色法測定；總膽固醇（CHO）含量采用異丙醇抽提高鐵冰醋酸-硫酸顯色法測定；尿素氮（BUG）含量采用二乙酰-肟顯色法測定。

2 結(jié)果與分析

由表1可知，高原鼠兔的門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)氨酶（AST）、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、堿性磷酸酶（ALP）均明顯低于SD大鼠，且差異極顯著（P<0.01）；高原鼠兔尿素氮（BUN）和甘油三酯（TG）含量明顯高于SD大鼠，差異極顯著（P<0.01）；從總蛋白（TP）和總膽固醇（TCH）來看，二者差異不顯著（P>0.01）。

3 討論

谷草轉(zhuǎn)氨酶存在于組織細(xì)胞中，其中心肌細(xì)胞中含量最高，其次為肝臟，而血清中含量極少。谷草轉(zhuǎn)氨酶主要存在于肝細(xì)胞線粒體內(nèi)，當(dāng)肝臟發(fā)生嚴(yán)重壞死或破壞時(shí)，才能引起谷草轉(zhuǎn)氨酶在血清中濃度會偏高。各種病毒性肝炎、肝硬變、肝膿腫、肝結(jié)核、肝癌、脂肪肝、酒精肝等均可引起不同程度的轉(zhuǎn)氨酶升高。從谷草轉(zhuǎn)氨酶來看，高原鼠兔屬于正常參考值范圍，而SD大鼠明顯偏高，這可能與二者的生活環(huán)境差異較大，且SD大鼠大多在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)飼養(yǎng)，活動(dòng)受限，且營養(yǎng)較好有關(guān)，少運(yùn)動(dòng)、營養(yǎng)好可能是導(dǎo)致此種差異的主要原因之一。谷丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶主要存在于肝細(xì)胞漿內(nèi)，細(xì)胞內(nèi)濃度高于血清中1 000～3 000倍。只要有1%的肝細(xì)胞被破壞，就可以使血清酶增高1倍。因此，谷丙轉(zhuǎn)氨酶被世界衛(wèi)生組織推薦為肝功能損害最敏感的檢測指標(biāo)。2種動(dòng)物的谷丙轉(zhuǎn)氨酶雖然差異顯著，但均在正常值的范圍之內(nèi)，可能與2種動(dòng)物的生活環(huán)境和生活方式完全不同有關(guān)。

單純的尿素氮升高可能是因?yàn)轱嬍持袛z入過多的蛋白質(zhì)類食物引起的，改變飲食結(jié)構(gòu)，平衡蛋白質(zhì)、含糖類食物和蔬菜的搭配，很快就可以恢復(fù)正常。2種動(dòng)物的尿素氮含量差異顯著，但也均保持在正常范圍之內(nèi)，這也與2種動(dòng)物的生活環(huán)境和生活方式不同有關(guān)。高原鼠兔的總膽固醇和甘油三酯含量偏高，可能與其食物結(jié)構(gòu)較為單一有關(guān)，因?yàn)楦视腿ゴ蟛糠质菑娘嬍持蝎@得的，只有少部分是動(dòng)物自身合成的。當(dāng)進(jìn)食大量脂肪類、尤其是動(dòng)物脂肪食品后，體內(nèi)甘油三酯水平明顯升高；過多的碳水化合物、尤其是加工精細(xì)的糧食進(jìn)入體內(nèi)后，則引起血糖升高，合成更多的甘油三酯，從而會引起甘油三酯升高。有學(xué)者研究不同季節(jié)高原鼠兔血液生化指標(biāo)中甘油三酯的季節(jié)性變化，發(fā)現(xiàn)高原鼠兔的甘油三酯在夏季最高，冬春季節(jié)最低，這可能與其在夏季牧草生長期能夠采食大量的植物根莖等有關(guān)。

參考文獻(xiàn)

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