養(yǎng)血升白丸的工藝制備及治療白細(xì)胞減少癥的藥效學(xué)研究

李芳

【摘要】目的：研究探討?zhàn)B血升白丸的工藝制備及對(duì)白細(xì)胞減少癥的藥效學(xué)療效。方法：將符合納入標(biāo)準(zhǔn)的256例患者，隨機(jī)分為治療組和對(duì)照組各128例。治療組首先采用養(yǎng)血升白丸治療（主要藥物：神曲、陳皮、桂枝、茯苓、絞股藍(lán)等），一日3次，一次2丸。對(duì)照組：口服地榆升白片，一日3次，一次2片。兩組均于化療結(jié)束后開(kāi)始服藥，連續(xù)服用10天為1個(gè)療程，各組在觀察期不使用影響造血系統(tǒng)的藥物，不作白細(xì)胞成分輸注，同時(shí)給以支持療法，防止感染等措施.治療3個(gè)療程后評(píng)定療效。結(jié)果：兩組臨床療效比較 治療組128例中，顯效85例，顯效率為66.41%，有效38例，有效率為29.68%，無(wú)效5例，取得總有效率為96.09%；對(duì)照組128例，顯效53例，顯效率為41.41%，有效46例，有效率為35.93%，無(wú)效29例，取得總有效率為77.34%，二者比較有顯著性差異（P<0.01），二者比較有顯著性差異（P<0.01）。兩組治療前后白細(xì)胞變化比較 治療組治療前后比較，有顯著性差異（P<0.01）；兩組治療后比較，有顯著性差異（P<0.01）。結(jié)論：養(yǎng)血升白丸的工藝制備簡(jiǎn)便，質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)穩(wěn)定。對(duì)白細(xì)胞減少癥患者進(jìn)行藥效學(xué)研究，取得顯著的治療效果。

【關(guān)鍵詞】白細(xì)胞減少癥；養(yǎng)血升白丸/制備工藝；藥效學(xué)探討

【中圖分類號(hào)】R285 5 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B【文章編號(hào)】1004-4949（2014）03-0031-01

近年來(lái)，腫瘤的發(fā)病率有日趨增高之勢(shì)，據(jù)調(diào)查，我國(guó)每年新發(fā)病人數(shù)約170萬(wàn)人，全世界發(fā)病累計(jì)數(shù)5000萬(wàn)以上，國(guó)家衛(wèi)生部公布的數(shù)據(jù)表明，每10萬(wàn)人中有100人死于癌癥，每年有100多萬(wàn)人被癌癥奪去生命（全世界約500萬(wàn)人）。資料統(tǒng)計(jì)表明：癌癥患者中有1/3是由于放、化療的各種毒副反應(yīng)所引起死亡。癌癥化療所導(dǎo)致的毒副反應(yīng)，主要表現(xiàn)為外周血白細(xì)胞總數(shù)減少，血小板下降及貧血等；更深層次則是骨髓造血功能的抑制，降低了患者自身的免疫功能。臨床多用鯊肝醇、利血生、瑞白等藥物治療。但療效較差，且副反應(yīng)較大。近年來(lái)采用的粒細(xì)胞集落因子雖有一定療效但價(jià)格昂貴、副反應(yīng)大，限制了藥物的推廣。中醫(yī)藥治療化療毒副反應(yīng)有其獨(dú)到之處，彌補(bǔ)了西醫(yī)療法的不足，有些作用又是西藥達(dá)不到的。所以充分發(fā)揮中醫(yī)特色，與化療緊密配合，則會(huì)明顯減少化療毒副反應(yīng)，順利完成抗癌治療。

養(yǎng)血升白丸應(yīng)用于臨床10多年來(lái)，配合其他藥物，治愈癌癥患者化療后血白細(xì)胞減少的患者1000余例，即減輕了他們的痛苦，又提高了他們的生活質(zhì)量，取得了較大的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。本文將其制備工藝、質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)及藥理學(xué)療效探討如下：

1養(yǎng)血升白丸的工藝制備及質(zhì)量控制

1.1養(yǎng)血升白丸的處方組成 神曲60g，陳皮50g，桂枝40g，茯苓60g，絞股藍(lán)150g ，黃芪（炙）100g，白芍60g，雞血藤60g，女貞子60g，墨旱蓮100g，枸杞子60g，焦山楂60g，人參80g，谷芽60g，麥芽60g。

1.2制備方法 將以上中藥一十五味，如法炮制，烘干，配料、粉碎過(guò)100目篩，混勻，每100g藥粉加入煉蜜110～130g做成每丸重9克的大蜜丸，即得。

1.3生產(chǎn)工藝流程 炮制→配料→烘干→粉碎→過(guò)100目篩→混勻→加入適量的煉蜜→包裝→檢驗(yàn)→合格→入庫(kù)。

1.4質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)【性狀】本品為丸劑，表面黑褐色，味微苦?！捐b別】（1）絞股藍(lán)成分鑒別 取本品2g，加石油醚（60-90℃）10ml，超聲處理30分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)邮兔眩?0-90℃）1ml，使溶解，作為供試品溶液。另取絞股藍(lán)對(duì)照藥材1g，同法制成對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法（附錄VIB）試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10ul，分別點(diǎn)于同一硅酸G薄層板上，以石油醚（60-90℃）乙酸乙酯-乙醇-水（10：3：0.1）為展開(kāi)劑，展開(kāi)、取出、晾干、置紫外光燈（365nm）下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)。

（2）黃芪成分鑒別 取本品1g，加甲醇20ml，超聲處理10分鐘，濾過(guò)，濾液濃縮至約5ml，作為供試品溶液。另取黃芪對(duì)照藥材0.5g，同法制成對(duì)照藥材溶液，照薄層色譜法試驗(yàn)，吸收上述二種溶液各5ml，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-乙醇-水（8：2：1）為展開(kāi)劑，展開(kāi)、取出、晾干、噴以2%對(duì)二甲氨基苯甲醛的40%硫酸溶液，在60℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，置日光及紫外光燈（365nm）下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)或熒光斑點(diǎn)。（3）雞血藤成分鑒別 取本品1g加乙酸乙酯4ml，超聲處理15分鐘，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液。另取雞血藤對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸收上述兩種溶液各4ul，分別點(diǎn)于同一硅酸G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸（20：4：0.5）為展開(kāi)劑，展開(kāi)、取出、晾干、噴以硫酸乙醇溶液（3→10），在80℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的紫紅色班點(diǎn)；置 紫外光燈（365nm）下檢視，顯相同的橙紅熒光斑點(diǎn)。（4）枸杞子成分鑒別 取本品0.5g，加80%丙酮溶液5ml，密塞振搖15分鐘，靜置；吸取上清液，作為供試品溶液。另取枸杞子對(duì)照藥材0.5g同法制成對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法（附錄VIB）試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5ul，分別于同一以羧甲基纖維互鈉為黏合劑的硅膠H薄板上，以乙酸乙酯-甲酸-水-甲醇（7：2：0.4）為展開(kāi)劑，展開(kāi)、取出、晾干。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。

【含量測(cè)定】（1）黃芪含量測(cè)定 取該品粗粉約1.05g（同時(shí)另取該品粗粉測(cè)定水分），精密稱定，置索氏提取器中，加甲醇40ml，冷浸過(guò)夜，再加甲醇適量，回流4小時(shí)，提取液回收甲醇并濃縮至干，殘?jiān)铀?0ml，微熱使溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取3次，每次20ml，合并正丁醇提取液，用氨試液提取2次，每次20ml，棄去氨液，正丁醇液蒸干，殘?jiān)铀?～5ml使溶解， 放冷，通過(guò)D101型大孔吸附樹(shù)脂柱（內(nèi)徑1.5cm，長(zhǎng)12cm）， 以水50ml洗脫，棄去水液， 再用40%乙醇30ml洗脫，棄去40%乙醇洗脫液，繼用70%乙醇50ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，用甲醇溶解并轉(zhuǎn)移至2ml量瓶?jī)?nèi)，加甲醇至刻度，搖勻，作為供試品溶液。另精密稱取黃芪甲苷對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。精密吸取供試品溶液與6μl、對(duì)照品溶液2μl與4μl，分別交叉點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上， 以氯仿一甲醇一水（13：6：2）10℃以下放置過(guò)夜的下層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在100℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰， 取出，在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板， 周圍用膠布固定，進(jìn)行掃描， 波長(zhǎng)：λS=530nm，λR=700nm，測(cè)量供試品吸收度積分值與對(duì)照品吸收度積分值，計(jì)算，即得.該品按干燥品計(jì)算，含黃芪苷（C41H68O14）不得少于0.040%.（2）白芍含量測(cè)定 照高效液相色譜法（參閱中國(guó)藥典2005版附錄Ⅵ D）測(cè)定.色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液一醋酸一異丙醇（67：173：4：4）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為230nm.理論板數(shù)按芍藥苷峰計(jì)算應(yīng)不低于1500.對(duì)照品溶液的制備：精密稱取在五氧化二磷減壓干燥器中干燥36小時(shí)的芍藥甙對(duì)照品適量， 加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，搖勻，即得.供試品溶液的制備：取該品中粉約0.5g，精密稱定，置20ml量瓶中，加甲醇約18ml，浸泡4小時(shí)，超聲處理（功率150W，頻率20kHz）30分鐘，取出，放冷，加甲醇至刻度，搖勻， 濾過(guò)，取濾液， 即得。測(cè)定法：分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μI，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得.該品含芍藥苷（C23H28O11）不得少于0.80%.【檢查】本品應(yīng)符合丸劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定（參照《中國(guó)藥典》2005年板一部附錄）

2資料與方法

2.1一般資料 我們?cè)?011年7月～2012年2月期間，觀察因腫瘤術(shù)后化療及其他原因引起的血白細(xì)胞減少癥的病例共256例，隨機(jī)分為治療組和對(duì)照組各128例。治療組128例中，男78例，女50例，年齡38～75歲，平均（58.32±12.32）歲。對(duì)照組128例中，男82例，女46例，年齡30～75歲，平均（60.67±11.13）歲。兩組年齡、性別、發(fā)病類型、化療前后白細(xì)胞計(jì)數(shù)、合理用藥等經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，無(wú)顯著性差異（P>0.05），具有可比性。

2.2 血白細(xì)胞減少的診斷標(biāo)準(zhǔn)及分度標(biāo)準(zhǔn) 根據(jù)惡性腫瘤臨床表現(xiàn)，結(jié)合檢驗(yàn)及影像學(xué)和（或）病理學(xué)等確診，有明確的放化療病史，血常規(guī)白細(xì)胞計(jì)數(shù)低于4.0×109/L。白細(xì)胞減少癥的分度參考《實(shí)用腫瘤內(nèi)科學(xué)》[1]標(biāo)準(zhǔn)。I度：WBC（3.0～3.9） ×109/L；2度：WBC（2.0～2.9） ×109/L；3度：WBC（1.0～1.9） ×109/L；4度：WBC<1.0×109/L。

2.3治療方法 治療組：采用養(yǎng)血升白丸，口服，一日3次，一次2丸。對(duì)照組：口服地榆升白片，口服，一日3次，一次2片。兩組均于化療結(jié)束后開(kāi)始服藥，連續(xù)服用10天為1個(gè)療程，各組在觀察期不使用影響造血系統(tǒng)的藥物，不作白細(xì)胞成分輸注，同時(shí)給以支持療法，防止感染等措施.治療3個(gè)療程后評(píng)定療效。

2.4觀察指標(biāo) ①白細(xì)胞計(jì)數(shù)：開(kāi)始服藥后每2周復(fù)查1次白細(xì)胞計(jì)數(shù)，取治療前、治療后第2周、治療后第4周、治療后第6周、治療后第8周及24周為觀察期。②肝腎功能；③臨床癥狀：乏力、神倦、少氣、納差、頭暈、面色不華、少寐、心悸、腰膝酸軟、耳鳴、惡心、嘔吐、口腔潰爛、出血及舌脈象。④生活質(zhì)量評(píng)分（KPS），參照WHO制定的標(biāo)準(zhǔn)[1]。⑤藥物不良反應(yīng)。

2.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 所有數(shù)據(jù)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件處理，計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用X2檢驗(yàn)。

3結(jié)果

3.1 臨床療效標(biāo)準(zhǔn) 療效標(biāo)準(zhǔn)參照《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》[1]制定。顯效：白細(xì)胞總數(shù)>4.0×109/L，或由<2.0×109/L，上升達(dá)4.0×109/L，穩(wěn)定2周以上。有效：白細(xì)胞總數(shù)比治療前上升0.5～1.0×109/L，或上升至3.0×109/L，穩(wěn)定2周以上。無(wú)效：白細(xì)胞總數(shù)無(wú)明顯升高或不升反降。

3.2兩組臨床療效比較 治療組128例中，顯效85例，顯效率為66.41%，有效38例，有效率為29.68%，無(wú)效5例，取得總有效率為96.09%；對(duì)照組128例，顯效53例，顯效率為41.41%，有效46例，有效率為35.93%，無(wú)效29例，取得總有效率為77.34%，二者比較有顯著性差異（P<0.01）。見(jiàn)表1

4討論

白細(xì)胞減少為白細(xì)胞總數(shù)持續(xù)低于4.0×109/L，多數(shù)伴有頭暈、乏力、食欲減退、面色無(wú)華、心悸、耳鳴等非特異性癥狀，嚴(yán)重者因粒細(xì)胞缺乏感染出血而死亡。該病最常見(jiàn)的病因是放化療所致。近年來(lái)，腫瘤的發(fā)病率有日趨增高之勢(shì)，據(jù)調(diào)查，我國(guó)每年新發(fā)病人數(shù)約170萬(wàn)人，全世界發(fā)病累計(jì)數(shù)5000萬(wàn)以上，國(guó)家衛(wèi)生部公布的數(shù)據(jù)表明，每10萬(wàn)人中有100人死于癌癥，每年有100多萬(wàn)人被癌癥奪去生命（全世界約500萬(wàn)人）。資料統(tǒng)計(jì)表明：癌癥患者中有1/3是由于放、化療的各種毒副反應(yīng)所引起死亡。癌癥化療所導(dǎo)致的毒副反應(yīng)，主要表現(xiàn)為外周血白細(xì)胞總數(shù)減少，血小板下降及貧血等；更深層次則是骨髓造血功能的抑制，降低了患者自身的免疫功能。臨床多用鯊肝醇、利血生、瑞白等藥物治療。但療效較差，且副反應(yīng)較大。近年來(lái)采用的粒細(xì)胞集落因子雖有一定療效但價(jià)格昂貴、副反應(yīng)大，限制了藥物的推廣。中醫(yī)藥治療化療毒副反應(yīng)有其獨(dú)到之處，彌補(bǔ)了西醫(yī)療法的不足，有些作用又是西藥達(dá)不到的。所以充分發(fā)揮中醫(yī)特色，與化療緊密配合，則會(huì)明顯減少化療毒副反應(yīng)，順利完成抗癌治療。

腫瘤患者術(shù)后化療由于出現(xiàn)骨髓抑制而導(dǎo)致白細(xì)胞減少，除白細(xì)胞大量減少外根據(jù)其神疲、倦怠、自汗乏力、頭暈?zāi)垦?、腰腿酸軟、口咽干燥、納差嘔惡等臨床表現(xiàn)，屬祖國(guó)醫(yī)學(xué)“虛勞”、“血虛”范疇。患者由于發(fā)病時(shí)間較長(zhǎng)，慢性消耗體質(zhì)己虛，復(fù)因術(shù)后氣血損傷，五臟皆虛，加之化療后骨髓造血機(jī)能逐步衰退，血液生化障礙，故而導(dǎo)致白細(xì)胞減少。我們?cè)谂R床實(shí)踐中發(fā)現(xiàn)，腫瘤術(shù)后化療的患者，以腎氣虛損多見(jiàn)，病位波及心、肝、脾多臟，因此認(rèn)為，本病以虛為主，其根本病機(jī)在于腎氣虛損。臨床常把放化療引起的毒副反應(yīng)白細(xì)胞減少歸結(jié)為脾腎虧虛氣血不足，按中醫(yī)辨證施治原則，而組方的養(yǎng)血升白丸切中病機(jī)，方中配伍人參、黃芪補(bǔ)氣升陽(yáng)，扶正固表，以助生血之本；配伍焦山楂、谷芽、麥芽、神曲健胃消食、消積開(kāi)胃，以補(bǔ)生血之源；配伍陳皮、茯苓具理氣降逆、健脾和胃之功，以調(diào)理全身氣機(jī)；桂枝具有發(fā)汗解表、散寒止痛、通陽(yáng)化氣；絞股藍(lán)補(bǔ)五臟，強(qiáng)身體，卻病抗癌，適用于一切虛癥，尤其是癌癥患者放化療后體弱者；雞血藤補(bǔ)血，活血，養(yǎng)血通絡(luò)；白芍、女貞子、墨旱蓮、枸杞子滋補(bǔ)肝腎，養(yǎng)陰補(bǔ)血，以達(dá)生血之實(shí)。諸藥合用具有益氣養(yǎng)血，健胃消食，補(bǔ)血活血，調(diào)和陰陽(yáng)，滋腎填精，益髓生血之功。以上藥物合用能從多靶點(diǎn)、多重作用機(jī)制促進(jìn)白細(xì)胞增多和功能恢復(fù)。本方已經(jīng)臨床運(yùn)用多年，能有效改善腫瘤患者的生存質(zhì)量和生存率，且服用方便，無(wú)毒副反應(yīng)，成本低廉，患者易于接受，值得推廣應(yīng)用。

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